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食品中亞硝酸鹽的測定和水中亞硝酸鹽的測定原理都是將試樣經(jīng)沉淀蛋自質(zhì)、除去脂肪后或?qū)鞚岷蜕容^高的水樣用氫氧化鋁沉淀過濾后，在弱酸性條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化后，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料，外標(biāo)法測得亞硝酸鹽含量。

(2)兩種檢驗方法所用的試劑均是在酸性條件下;

(3)對氨基苯磺酞胺在酸性條件下與鹽酸發(fā)生反應(yīng)，生成對氨基苯磺酸。

(4)由原理及試劑的配制，可以知道:兩種測定方法實質(zhì)上均是在酸性條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮化后再與鹽酸萘乙二胺偶合生成紫紅色染料，比色定量而得。

(1)對氨基苯磺酸溶液(4g/L):稱取0.4g對氨基苯磺酸，溶于100mL20%的鹽酸溶液中，混勻，置棕色瓶中，避光保存。

(2)對氨基苯磺酞胺溶液(l0g/L):稱取5g對氨基苯磺酞胺，溶于350mI鹽酸溶液(1+6)中，用純水稀釋至500mI

(3)鹽酸萘乙二胺溶液(2g/L):稱取0.2g鹽酸萘乙二胺，溶于100mL水中，混勻，置棕色瓶中，避光保存。

(4)亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液(200μg/ml):準(zhǔn)確稱取0.1000g于110℃一120℃干燥恒重的亞硝酸鈉，加水溶解，移入500mI容量瓶中，加水至刻度，搖勻。

(5)亞鐵氰化鉀溶液(106g/L:稱取106.0g亞鐵氰化鉀，加水溶解，并稀釋至1000mL

(6)乙酸鋅溶液(220g/L:稱取220.0g乙酸鋅，先加入30mL冰乙酸溶解，再用水稀釋至1000mL

(7)飽和硼砂溶液(50g/L):稱取5.0g硼酸鈉，溶于100ml熱水中，冷卻后備用。

分光光度計、分析天平、恒溫水浴鍋、容量瓶、移液管、比色管等。

按GB5009.33-2016和GB/T5750-2006標(biāo)準(zhǔn)要求處理好樣品，依次加入對氨基苯磺酸溶液(或?qū)Π被交翘啡芤?2ml，并靜置3一5min，鹽酸萘乙二胺溶液1ml，混勻放置15min。在540nm波長下測定。結(jié)果如下:

標(biāo)準(zhǔn)曲線的測定

準(zhǔn)確移取0.00ml、0.20ml、0.40ml、0.60ml、0.8 0 m l、1.0 0 m l、1.5 0 m l、2.0 0 m l、2.5 0 m l亞硝酸鹽標(biāo)準(zhǔn)使用液 (相當(dāng)于0μg、1.0μg、2.0μg、3.0μg、4.0μg、5.0μg、7.5μg、12.5μg亞硝酸鈉) 分別置于50ml帶塞比色管中, 于標(biāo)準(zhǔn)管中分別加入2ml試劑1:對氨基苯磺酸溶液和試劑2:1ml對氨基苯磺酰胺溶液, 混勻, 靜置3~5min后, 各加入1ml鹽酸萘乙二胺溶液, 加水至刻度, 混勻, 靜置15min, 用1 (或3) cm比色皿, 零管調(diào)節(jié)零點, 于波長538nm處測定吸光度。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。同時做試劑空白。

(1)理論上，對氨基苯磺酸和對氨基苯磺酞胺都是在酸性條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸重氮后，再與鹽酸萘乙二胺偶合形成紫紅色染料，比色定量，得出樣品的亞硝酸鹽含量。

(2)實驗中，分別用對氨基苯磺酸和用對氨基苯磺酞胺作為檢驗試劑，得出的檢測結(jié)果誤差在平行誤差范圍內(nèi)，結(jié)果可靠。

(3)可以用一種試劑(對氨基苯磺酸或者對氨基苯磺酞胺)進(jìn)行食品中亞硝酸鹽的測定和水中亞硝酸鹽的測定，不必同時配制兩種試劑，不影響檢驗結(jié)果。