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分子生物學實驗室常用儀器及使用

嘉峪檢測網(wǎng)        2019-02-15 19:45

事實證明,在科學飛速發(fā)展的今天,無論從事哪個領(lǐng)域的研究,要想突破,除了有良好的理論基礎(chǔ)外,更重要的是依賴于先進的技術(shù)和優(yōu)良的儀器設(shè)備以及良好的研究環(huán)境。一個標準的分子生物學實驗室除了具有一般生物學實驗室的常規(guī)儀器設(shè)備外,還具有一些特殊用途的儀器,這些儀器一般較精密,價格昂貴。下面介紹這些儀器的使用方法和注意事項。

 

 一、冷凍離心機

 

低溫分離技術(shù)是分子生物學研究中必不可少的手段?;蚱蔚姆蛛x、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物樣品的分離制備實驗中都離不開低溫離心技術(shù),因此低溫冷凍離心機成為分子生物學研究中必備的重要儀器。在國內(nèi),有多個廠家生產(chǎn)冷凍離心機,本實驗室的高速冷凍離心機為GL-20G-Ⅱ型(上海安亭),落地式。配有角式轉(zhuǎn)頭:6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。極限轉(zhuǎn)速20000rpm。

 

1.  安裝與調(diào)試

離心機應放置在水平堅固的地面上,應至少距離10cm以上且具有良好的通風環(huán)境中,周圍空氣應呈中性,且無導電性灰塵、易燃氣體和腐蝕性氣體,環(huán)境溫度應在0~30℃之間,相對濕度小于80%。試轉(zhuǎn)前應先打開蓋門,用手盤動轉(zhuǎn)軸,輕巧靈活,無異?,F(xiàn)象方可上所用的轉(zhuǎn)頭。轉(zhuǎn)子準確到位后打開電源開關(guān),然后用手按住門開關(guān),再按運轉(zhuǎn)鍵,轉(zhuǎn)動后立即停止,并觀察轉(zhuǎn)軸的轉(zhuǎn)向,若逆時針旋轉(zhuǎn)即為正確,機器可投入使用。

 

2.  操作程序

 

   (1)插上電源,待機指示燈亮;打開電源開關(guān),調(diào)速與定時系統(tǒng)的數(shù)碼管顯示的閃爍數(shù)字為機器工作轉(zhuǎn)速的出廠設(shè)定,溫控系統(tǒng)的數(shù)碼管顯示此時離心腔的溫度。

 

         (2)設(shè)定機器的工作參數(shù),如工作溫度,運轉(zhuǎn)時間,工作轉(zhuǎn)速等。

 

         (3)將預先平衡好的樣品放置于轉(zhuǎn)頭樣品架上,關(guān)閉機蓋。

 

         (4)按控制面板的運轉(zhuǎn)鍵,離心機開始運轉(zhuǎn)。在預先設(shè)定的加速時間內(nèi),其運速升 至預先設(shè)定的值。

 

    (5)在預先設(shè)定的運轉(zhuǎn)時間內(nèi)(不包括減速時間),離心機開始減速,其轉(zhuǎn)速在預先設(shè)定的減速時間內(nèi)降至零。

 

    (6)按控制面板上的停止鍵,數(shù)碼管顯示dedT,數(shù)秒鐘后即顯示閃爍的轉(zhuǎn)速值,這時機器已準備好下一次工作。

 

              3.  注意事項

 

    (1)離心機應始終處于水平位置,外接電源系統(tǒng)的電壓要匹配,并要求有良好的接地線,機器不使用,要拔掉電源插頭。

 

         (2)開機前應檢查轉(zhuǎn)頭安裝是否牢固,機腔中有無異物掉入。

 

         (3)樣品應預先平衡,使用離心筒離心時離心筒與樣品應同時平衡。

 

         (4)揮發(fā)性或腐蝕性液體離心時,應使用帶蓋的離心管,并確保液體不外漏以免腐蝕機腔或造成事故。

 

   (5)除工作溫度、運轉(zhuǎn)速度和運轉(zhuǎn)時間外,不要隨意更改機器的工作參數(shù),以免影響機器性能。轉(zhuǎn)速設(shè)定不得超過最高轉(zhuǎn)速,以確保機器安全運轉(zhuǎn)。

 

   (6)使用中如出現(xiàn)0.00或其它數(shù)字,機器不運轉(zhuǎn),應關(guān)機斷電,10秒鐘后重新開機,待所設(shè)轉(zhuǎn)速顯示后,再按運轉(zhuǎn)鍵,機器將照常運轉(zhuǎn)。

 

         (7)不得在機器運轉(zhuǎn)過程中或轉(zhuǎn)子未停穩(wěn)的情況下打開蓋門,以免發(fā)生事故。

 

         (8)每次操作完畢應做好使用情況記錄,并定期對機器各項性能進行檢修。

 

二、電泳儀

 

       電泳技術(shù)是分子生物學研究不可缺少的重要手段。電泳一般分為自由界面電泳和區(qū)帶電泳大類,自由界面電泳不需支持物,如等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。區(qū)帶電泳需用各種類型的物質(zhì)作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及硅膠―G薄層等,分子生物學實驗中最常用的是瓊脂糖凝膠電泳。應用電泳法可以對不同物質(zhì)進行定性或定量分析,或?qū)⒁欢ɑ旌衔镞M行組份分析或單個組份提取制備。下面以DYY-12型電腦三恒多用電泳儀(北京六一儀器廠)為例介紹其使用方法。

 

1.使用方法

 

(1)按電源開關(guān),顯示屏出現(xiàn)“歡迎使用DYY-12型電腦三恒多用電泳儀…”等字樣后,同時系統(tǒng)初始化,蜂鳴4聲,設(shè)置常設(shè)置。屏幕轉(zhuǎn)成參數(shù)設(shè)置狀態(tài),見圖一:

 

 U:     0V     U=   100V   |  Mode:  STD

 

I:     0mA    I =  50mA   |  

 

P:     0W     P=   50W   |

 

T:   00:00     T=  01:00   |   

 

 

        其中:左側(cè)大寫U: I: P: T: 為電泳時實際值;中間部分顯示程序的常設(shè)值(預置值)。Mode(模式):STD(標準);TIME(定時);VH(伏時);STEP(分步)

 

   (2)設(shè)置工作程序。用鍵盤輸入新的工作程序。例如,要求工作電壓U=1000V,電流I限制在200mA以內(nèi),功率W限制在100W以內(nèi),時間T為3小時20分,并且到時間自動關(guān)掉輸出。則操作步驟如下:

 

①按“模式”鍵,將工作模式由標準(STD)轉(zhuǎn)為定時(TIME)

 

模式。每按一下模式鍵,其工作方式按下列順序改變:          STD®TIME®VH®STEP®STD。

 

      ②先設(shè)置電壓U,按“選擇”鍵,先將其反顯,然后輸入數(shù)字鍵即可設(shè)置該參數(shù)的數(shù)值。按數(shù)字1000,則電壓即設(shè)置完成。

 

     ③設(shè)置電流I,按“選擇”鍵,先使I反顯,然后輸入數(shù)字200。

 

     ④設(shè)置功率P,按“選擇”鍵,先使P反顯,然后輸入數(shù)字100。

 

     ⑤設(shè)置時間T,按“選擇”鍵,先使T反顯,然后輸入數(shù)字320。如果輸入錯誤,可以按“清除”鍵,再重新輸入。

 

      ⑥確認各參數(shù)無誤后,按“啟動”鍵,啟動電泳儀輸出程序。在顯示屏狀態(tài)欄中顯示Start! 并蜂鳴4聲,提醒操作者電泳儀將輸出高電壓,注意安全。之后逐漸將輸出電壓加至設(shè)置值。同時在狀態(tài)欄中顯示“Run”,并有兩個不斷閃爍的高壓符號,表示端口已有電壓輸出。在狀態(tài)欄最下方,顯示實際的工作時間(精確到秒)。

 

      ⑦每次啟動輸出時,儀器自動將此時的設(shè)置數(shù)值存入“MO”號存儲單元。以后需要調(diào)用時可以按“讀取”鍵,再按“0”鍵,按“確定”鍵,即可將上次設(shè)置的工作程序取出執(zhí)行。

 

      ⑧電泳結(jié)束,儀器顯示:“END”,并連續(xù)蜂鳴提醒。此時按任一鍵可止鳴。

 

2.注意事項

 

(1)U、I、P三個參數(shù)的有效輸入范圍是:U:5~3000V;I: 4~400mA;P:4~400W.

 

(2)一般情況下,當No  Load!時,首先應關(guān)機檢查電極導線與電泳槽之間是否有接觸不良的地方,可以用萬用表的歐姆檔逐段測量。

 

(3)如果輸出端接多個電泳槽,則儀器顯示的電流數(shù)值為各槽電流之和,此時應選擇穩(wěn)壓輸出,以減小各槽的相互影響。

 

(4)注意保持儀器的清潔,不要遮擋儀器后方進風通道。嚴禁將電泳槽放在儀器頂部,避免緩沖液灑進儀器內(nèi)部。

 

(5)本儀器輸出電壓較高,使用中應不避免接觸輸出回路及電泳槽內(nèi)部,以免發(fā)生危險。

 

(6)長期不用儀器,應放置在干燥通風的清潔環(huán)境中保存。

 

       三、分析天平

 

    分析天平是定量分析工作中不可缺少的重要儀器,充分了解儀器性能及熟練掌握其使用方法,是獲得可靠分析結(jié)果的保證。分析天平的種類很多,有普通分析天平、半自動/全自動電光分析天平及電子分析天平等。目前實驗室常規(guī)備用的是自動化程度較高的電子分析天平。下面介紹電子分析天平 PL203/01型和AL104/01型 (METTLER-TOLEDO)的性能及使用方法。PL203/01型精密電子天平:最大稱量210g;實際分度值0.001g;AL104/01型高分辨率電子分析天平:最大稱量110g;實際分度值0.0001g

 

       1.  使用方法

 

     (1)檢查并調(diào)整天平至水平位置。檢查電源電壓是否匹配(使用配置的穩(wěn)壓器),按天平儀器要求通電預熱至所需時間30min 。

 

     (2)打開天平開關(guān)“on”,天平則自動進行靈敏度及零點調(diào)節(jié)。待顯示屏上所有字段短時點亮,天平回零時,可進行正式稱量。

 

    (3)稱量時將潔凈稱量瓶或稱量紙置于稱盤上,關(guān)上側(cè)門,天平將顯示該重量,點擊“®O/T¬”鍵自動校對零,然后逐漸加入待稱物質(zhì),直至所需重量為止。

 

    (4)稱量結(jié)束應及時除去稱量瓶(紙),關(guān)上側(cè)門,切斷電源,并做好使用情況登記。

 

      2.  注意事項

 

    (1)天平應放置在牢固平穩(wěn)水泥臺或木臺上,室內(nèi)要求清潔、干燥,同時應避免光線直接照射到天平上。

 

    (2)稱量時應從側(cè)門取放物質(zhì),讀數(shù)時應關(guān)閉箱門以免空氣流動引起天平擺動。

 

    (3)揮發(fā)性、腐蝕性、強酸強堿類物質(zhì)應盛于帶蓋稱量瓶內(nèi)稱量,防止腐蝕天平。

 

    (4)電子分析天平若長時間不使用,則應定時通電預熱,每周一次,每次預熱2h,以確保儀器始終處于良好使用狀態(tài)。

 

        四、分光光度計

 

    不同物質(zhì)對不同波長入射的吸收程度各不相同,從而形成各具特征的吸收光譜。根據(jù)這一原理,應用比色法可以對某些有色物質(zhì)進行定性或定量分析。但由于比色法僅限于可見光區(qū),而且精度低,已遠遠不能滿足高精度微量分析的要求。隨著科學技術(shù)不斷發(fā)展,分析儀器也不斷地更新?lián)Q代,人們引進了分光光度法的概念,分光光度計隨之應用。分光光度計由光源、單色器、吸收池、接受器、顯示屏幕所組成,它不僅適應于可見光區(qū),同時還擴展至紫外光區(qū)及紅外光區(qū)。光密度(OD)是許多溶液中的溶質(zhì)定量的指標之一,通過所產(chǎn)生的單色光而測定某一溶液對該單色光的吸收值。分子生物學實驗中常使用紫外分光光度計進行核酸溶液定量和純度的初步判斷。下面介紹紫外可見光分光光度計GeneQantTM Pro(Amersham)的使用方法。該儀器除了能檢測核酸樣品濃度外,還可進行蛋白質(zhì)濃度以及細胞培養(yǎng)液濃度的測定,能檢測低至幾微升樣品(70µl和5~7µl),樣品無需稀釋,測量后還可全部回收。

 

使用方法

 

(1)打開電源開關(guān)(ON),等待數(shù)秒鐘,顯示屏上顯示一系列數(shù)據(jù),如本機型號、當前日期等,這些數(shù)據(jù)可以重新設(shè)置,當出現(xiàn)“instrument  Ready”即可進入下一程序。

 

 (2)在儀器面板上有許多功能鍵,其中包括檢測base sep 、Tm、DNA、RNA、oligo、Protein595assay、Protein280 meas、cell culture等。例如,欲檢測DNA, 按DNA鍵,即進入DNA檢測程序。在顯示屏上:                      

 

                                         Pathlengh              10mm

 

                                         Units                      µg/µl

 

                                        Use 320nm              NO

 

                                       Dilution Faotor  1

 

                                       Insert  reference,    

 

以上為儀器預設(shè)置的參考數(shù)據(jù),若按“enter”鍵,和“select”鍵可以將以上的參數(shù)進行重新設(shè)定。

 

(3)取石英樣品杯70µl或5~7µl ,容量大小根據(jù)需要。先用吸管吸高純水入樣品杯中,然后放入儀器上的樣品槽中,放入時注意樣品杯的光學面朝前方。

 

(4)按“set  ref”鍵,進行空白測試。顯示屏上出現(xiàn)一系列數(shù)據(jù)均“0.000”并提示插入樣品“Insert sample ”。將樣品杯取出,吸干水分,稍干燥后,同樣吸入待測樣品,放入樣品槽中進行測定。

 

(5)一個樣品測定完畢,按“stop”鍵,返回“InstrumentReady”。

 

(6)取出樣品杯,吸出樣品,然后用高純水洗幾次,自然晾干。由于樣品杯十分昂貴,使用時要小心操作。不能用手指拿樣品杯的光學面,用后要及時洗滌,可用溫水或稀鹽酸,乙醇以至鉻酸洗液(濃酸中浸泡不要超過15分鐘),表面只能用柔軟的絨布或拭鏡頭紙擦凈。

 

  五、數(shù)字式酸度計

 

      酸度計是實驗室配置溶液必備的儀器。本實驗室的酸度計為臺式微電腦酸堿度計和溫度計(Hanna),測量pH范圍為0.00~14.00pH;溫度為0.0~100.0℃;

 

      1.  使用方法

 

   (1)將pH電極和溫度探頭與主機連接,主機與電源連接。

 

   (2)取出電極保護套,如果有結(jié)晶鹽出現(xiàn),這是電極常見現(xiàn)象,浸入水后就會消逝。如果薄膜玻璃或透析膜發(fā)干,可在HI170300電極保存液中浸泡1小時。

 

(3)pH校準。將pH電極和溫度探棒浸泡在所選的標準緩沖液內(nèi)4cm(建議用pH6.86、7.01),緩沖液值可通過“D℃”或“Ñ℃”鍵來調(diào)節(jié)。按“CAL”鍵,儀器將顯示“CAL”和“BUF”符號及“7.01”數(shù)據(jù)。當讀數(shù)不穩(wěn)定時,屏幕會顯示“NOTREADY”;當讀數(shù)穩(wěn)定時,屏幕會顯示“READY”和“CFM”,按“CFM”鍵確認校準值。確認第一校準點后,將pH電極與溫度探棒浸泡在標準緩沖液內(nèi)4cm(建議用pH4.01、9.18、10.01);再按“CAL”鍵,儀器將顯示“CAL”和“BUF”符號及“4.01”數(shù)據(jù)。按“CFM”鍵確認校正值。

 

 (4)pH測量。校準完畢后,儀器自動進入pH測量狀態(tài),將電極與溫度探棒浸泡在待測溶液約4cm,停幾分鐘讓電極讀數(shù)穩(wěn)定。

 

2.  注意事項

 

 (1)由于pH211酸度計內(nèi)裝有可充電電池,在剛購買或長時間放置后,再使用時,通電校正測量完畢后,可將電源繼續(xù)還插入電源插座,只需關(guān)閉開關(guān),這樣可以保證電池充電,是校正值得以儲存,下次測量時無須校正即可進入精確測量。

 

 (2)不可用蒸餾水、去離子水和純水浸泡電極。如果讀數(shù)偏差太大(±1pH),則是由于沒有校正或電極變干。為避免電極受損,在關(guān)機前要將pH電極從溶液中拿出。當處于關(guān)機狀態(tài)時,在電極浸入電極保存液前,電極要與機器分開。

 

 (3)如儀器已測過幾種不同的樣品溶液,請用自來水清洗,或在插入樣品溶液前,用待測樣品清洗電極。

 

 (4)溫度會影響pH的讀數(shù),為測量準確的pH值,溫度要在適合的范圍內(nèi)進行自動溫度補償,用HI7669/2W溫度探棒浸入樣品中,緊靠電極并停幾分鐘,如果被測溶液的溫度已知或測量是在相同溫度下進行,只需動手補償,那么此時溫度探棒是不用連接,屏幕上會顯示溫度讀數(shù)伴有℃信號閃爍。溫度可通過“Ñ℃”或“D℃”來調(diào)節(jié)。

 

六、PCR儀

 

    PCR儀,也稱DNA熱循環(huán)儀、基因擴增儀,它是使一對寡核苷酸引物結(jié)合到正負DNA鏈上的靶序列兩側(cè),從而酶促合成拷貝數(shù)為百萬倍的靶序列DNA片段,它的每一循環(huán)包括在三種不同溫度進行DNA變性、引物復性、DNA聚合酶催化的延伸反應的三個過程。

 

    PCR儀主要應用于基礎(chǔ)研究和應用研究等許多領(lǐng)域,如基因分析、序列分析、進化分析、臨床診斷、法醫(yī)學等等。隨著分子生物學的不斷發(fā)展,PCR擴增技術(shù)也得到普及推廣應用,因此了解PCR儀的性能,熟練掌握儀器的正確使用方法及使用過程中的注意事項,將是十分必要的。

 

    現(xiàn)介紹PCR 擴增儀(Tl Thermocycler)的使用方法和注意事項。

 

1.  使用方法

 

(1)接通電源開關(guān),儀器進入準備狀態(tài);在顯示屏上記錄了當前儀器的溫度和蓋子(Lid)的溫度。若儀器正在運行時,須按“  B  ”鍵(start/stop),才能退出運行并返回準備狀態(tài)。

 

(2)編寫程序段。在準備狀態(tài)下按“  C ”鍵(programs)進入編程狀態(tài),選定一程序號,然后按“enter”鍵,進入下一程序;按 “A”(list)鍵后,選一文件號(empty program);再按“enter”鍵,進入下一程序;按“ABC”鍵,進入下一程序,用上下左右鍵號選擇一個字母(A、B、C、D、…),然后按“enter”鍵,進入下一程序;按“name ok”鍵,完成文件命名。

 

(3)設(shè)定蓋子的溫度。“lid temp:    ℃”,蓋子的溫度一般比變性溫度要高10℃,例如變性溫度是95℃,那么蓋子的溫度就要設(shè)定為105℃。待蓋子預熱后按“enter”鍵,進入下一程序。

 

(4)設(shè)定變性溫度、變性時間、延伸溫度、延伸時間、退火溫度、退火時間及循環(huán)總數(shù)等參數(shù)。從第一步依次按“enter”鍵進入,用四個移位鍵移動設(shè)定位置。先設(shè)定溫度,后設(shè)定時間,全部參數(shù)設(shè)置完后,按“pgm ok”鍵,所設(shè)定的程序自動被保存。

 

(5)運行程序。檢查設(shè)定是否正確,  按“start”鍵,選擇設(shè)定好的程序,開始運行。顯示屏上可觀察到系統(tǒng)運行的情況,按“Stop”可停止運行。

 

七、凝膠成像系統(tǒng)

 

    本系統(tǒng)屬全自動電腦控制影像分析系統(tǒng),主要拍攝核酸的agarose電泳膠片,及蛋白質(zhì)的acrylamide電泳膠片。在與markers比較后,可精確計算樣本的分子量,對核酸電泳也可準確定量,是分子生物學及生化蛋白試驗的重要檢測工具。本系統(tǒng)包括暗箱,紫外透射儀,攝像頭,變焦鏡,電腦以及專業(yè)凝膠圖象采集及分析.軟件(3.3版)。該軟件提供對電泳凝膠、斑點測量、PCR密度的定量分析等。此外,還提供圖像采集、標注、打印、數(shù)據(jù)和圖像發(fā)送到Word、Excel、圖像處理等功能。

 

1.使用方法

 

      (1) 打開電腦,啟動凝膠分析軟件,進入用戶界面。

 

    (2)打開采集凝膠圖像的暗箱裝置電源開關(guān),放入凝膠,打開紫外光源或白光光源,將采集裝置與電腦上采集卡相連,然后選擇“文件”菜單中的“圖像采集”或工具欄的“圖像采集”按鈕,出現(xiàn)圖像窗口:“開始采集”、“停止采集”、“采集圖像”等。如果圖像不清晰,可以調(diào)節(jié)暗箱上的變焦鏡,使之清晰。可直接將圖像保存起來,也可通過“圖像處理”對圖像進行旋轉(zhuǎn)、裁剪、濾波、調(diào)節(jié)對比度……方面的處理。

 

      (3)對讀入的電泳凝膠圖像,可以啟動電泳凝膠分析系統(tǒng)。在“功能選擇”菜單中選擇“電泳凝膠”或在工具欄上的“電泳凝膠”工具,將出現(xiàn)泳道分析工具欄,并在“圖像顯示”子窗口中出現(xiàn)一個紅色的矩形框。還可進入“條帶分析”系統(tǒng),對條帶進行編號,對二條以上的條帶進行比較。

 

     (4)采集圖像結(jié)束后,關(guān)閉暗箱電源開關(guān),從暗箱中取出凝膠,并將玻璃板清洗干凈,晾干。

 

八、空氣恒溫搖床

 

    搖床(振蕩器)為實驗室的常規(guī)設(shè)備。SHK-99-Ⅱ型臺式空氣恒溫搖床,采用微電腦控制系統(tǒng),溫度范圍:室溫+5℃~60℃,精度±0.5℃;時間范圍:1分鐘~99小時59分鐘;轉(zhuǎn)速范圍:60RPM~250RPM。

 

1.使用方法

 

(1)LED屏幕上各段數(shù)據(jù):

 

      RPM       Temp      Time

 

      1    000           00.0       00:00

 

屏幕上“1”表示第一段,如果是第二段則為“2”,“Temp”表示溫度,“RPM”表示每分鐘轉(zhuǎn)速,“Time”表示時間,不設(shè)定時可自動累計時間一直運行。“Temp”、“RPM”、“Time”的值隨時可以修改,隨時按新值運行。

 

(2)工作程序設(shè)置。按“F1”鍵,進入設(shè)置狀態(tài)??稍谒俣?,溫度,時間,運行等四部分之間切換。在每一部分按“F2”鍵輸入數(shù)據(jù),輸入完十位數(shù)據(jù),再輸入個位數(shù)據(jù),按“F2”鍵,再按“F2”鍵,到小數(shù)位,再按“F2”鍵,又到十位,以此循環(huán)。

 

(3)再按“F1”鍵,轉(zhuǎn)回運行狀態(tài),按“Start”鍵,電機開始運行,時間開始計時。

 

(4)按“End”鍵,結(jié)束系統(tǒng)運行。

 

       2.  注意事項

 

     (1)打開電源,系統(tǒng)開始自檢,等待LCD屏幕出現(xiàn)“WELCOME”字樣,系統(tǒng)自檢完畢,可以進行第2步參數(shù)設(shè)置。若屏幕出現(xiàn):a.“TEMP ERROR”,表示溫度檢測線路有錯誤;b.“MOTOR ERROR”,表示電機部分有錯誤。

 

     (2)運行過程可以打開箱蓋,這樣電機不運行,時間也停止,蓋上蓋接著運行。

 

     (3)工作完畢,關(guān)閉電源。關(guān)機后,要等一段時間再開機。

 

       九、水的凈化裝置

 

    分子生物學實驗對水的純度要求越來越高,一般蒸餾水常常難以滿足實驗要求,大多要求要進行第二次蒸餾(雙蒸水),它可以去除水中的大部分有機雜質(zhì),但制作時間較長,而且無機雜質(zhì)還是很多。許多實驗還需要去離子水,這就需要陰陽離子交換樹脂進行處理。目前,分子生物學實驗室都使用高質(zhì)量的超純水。如美國微孔濾膜公司的Milli-Q超純水制造系統(tǒng)所制造的超純水適用于許多學科領(lǐng)域,如分子克隆、各種色譜分析、氨基酸分析、DNA測序、酶反應、組織和細胞培養(yǎng)等實驗。下面介紹RO-MB壁掛式反滲透高純水機性能及使用方法。RO-MB反滲透高純水機(杭州永潔達)產(chǎn)水量(25℃)10L/H;產(chǎn)水水質(zhì):RO純水:<10μs/cm,高純水:>15MΩ.cm;可用自來水制成普通實驗用水和高純水,同時滿足不同水質(zhì)要求。在線電導率儀對產(chǎn)水水質(zhì)連續(xù)檢測,可保證產(chǎn)水質(zhì)量。

 

1.  使用方法

 

(1)準備:先檢測與純水機相連的原水管路、廢水管路連接是否正常,打開原水閥門。供電電源是否正常,檢查按鈕是否在關(guān)閉狀態(tài)(按鈕彈出狀態(tài))。將電源插頭插入帶有接地線的220V電源插座上。

 

(2)開機:依次按下電源開關(guān),泵開關(guān),純水機啟動產(chǎn)水,同時廢水排出,指示燈亮起,并處于自動運行狀態(tài)。

 

(3)取純水:若打開RO純水或高純水出口閥門,則可獲得相應水質(zhì)的純水。當高純水出口閥門打開時,檢測儀表顯示高純水電導率或電阻值。為了獲得高質(zhì)量的高純水,可以先放掉一杯水后再取新鮮水。

 

(4)關(guān)機:不用時可關(guān)閉個按鈕停機,自來水進水閥門不必關(guān)閉,這時機子內(nèi)部的進水電磁閥已自動切斷水路。只要管路閥門不漏,也可使機子保持自動待機狀態(tài)。

 

2.注意事項

 

  (1)純水機的正常使用環(huán)境溫度為15~35℃,產(chǎn)水量會隨溫度降低而下降,冬季保養(yǎng)溫度不低于5℃。

 

  (2)預處理濾芯一般三至六個月更換一次,實際使用壽命與自來水水質(zhì)、總過濾量等有關(guān)。

 

  (3)混床濾芯產(chǎn)高純水約1~3噸,約二至四個月更換一次,實際使用壽命與自來水水質(zhì)、水中含鹽量、總用水量等有關(guān)。設(shè)備停運時間超過2天。必須注意定期沖洗維護。夏季宜每天開機30分鐘沖洗一次,冬季每隔2~3天開機沖洗一次。

 

  (4)使用過程若發(fā)現(xiàn)停機后泵仍頻繁地每隔數(shù)分鐘有規(guī)則地啟動數(shù)秒鐘又停機,此為管路漏水引起,需及時打開機箱加以解決。若每隔半小時以上啟動數(shù)秒鐘又停機,乃屬正?,F(xiàn)象,有利于沖洗和保護反滲透膜元件,避免遭到微生物繁殖和減少污物沉積,尤其高溫季節(jié)。

 

十、消毒設(shè)備

 

細菌和細胞培養(yǎng)以及核酸等有關(guān)實驗所用的試劑、器皿及實驗用具,應嚴格滅菌,有的實驗還要求沒有核酸酶的污染,故應將實驗器械,試劑等進行高壓消毒。對于經(jīng)過導入DNA重組分子的菌株,操作后必須進行嚴格的高壓消毒滅活處理。

 

大批實驗物品、試劑、培養(yǎng)基等可以使用大型消毒器進行消毒。一些不能經(jīng)受高壓、高溫消毒的試劑可用濾器濾膜除菌,器皿可用紫外線照射、75%乙醇或0.1%的十二烷基硫酸鈉(SDS)浸泡消毒。所有的細胞培養(yǎng)、細菌培養(yǎng)的操作,都應在紫外線消毒后的超凈工作臺中進行。

 

下面介紹立式自動壓力蒸汽滅菌器(LDZX-40BI)的使用方法。

 

1.使用方法

 

  (1)開蓋:轉(zhuǎn)動手輪,使鍋蓋離開密封圈。

 

  (2)通電:連接自動進水裝置。接通電源,將控制面板上電源開關(guān)按至ON處,若水位低(LOW)紅燈亮,蒸發(fā)鍋內(nèi)屬斷水狀態(tài);缺水(LACK)黃燈亮,電源已正常輸入。

 

  (3)加水:打開水源,水位達到低水位,控制面板上低水位紅燈和缺水黃燈相繼滅,加熱(1-綠燈)亮,繼續(xù)加水至高水位(HIGH)綠燈亮,自動停止加水。

 

    (4)堆放物品:需包扎的滅菌物品,體積不超過200mm×100mm×100mm為宜,各包裝之間留有間隙,堆放在金屬框內(nèi),這樣有利于蒸汽的穿透,提高滅菌效果。

 

    (5)密封高壓鍋:推橫梁入立柱內(nèi),旋轉(zhuǎn)手輪,使鍋蓋下壓,充分壓緊。

 

    (6)設(shè)定溫度:通電后數(shù)顯窗燈亮,上層為紅色,顯示溫度,下層為綠色,設(shè)定溫度和時間。先按控制面板上確認鍵,綠色數(shù)顯閃爍,進入溫度設(shè)定狀態(tài)。按一次移位鍵   所指相應位置閃爍,根據(jù)所需數(shù)據(jù)位置進行(單項循環(huán))移位。按△增加鍵或??減少鍵,進行所需溫度設(shè)定。設(shè)定完畢,按二次確認鍵,進行溫度確認。

 

    (7)設(shè)定時間:按一次確認鍵,將溫度設(shè)定切換成時間設(shè)定;再按一次移位鍵,所指相應位置閃爍,根據(jù)所需數(shù)據(jù)位置進行移位;按增加鍵或減少鍵,進行所需時間設(shè)定。設(shè)定完畢,按二次確認鍵,進行時間設(shè)定確認。時間采用倒計時,當滅菌鍋內(nèi)溫度達到設(shè)定溫度,定時器開始倒計時。

 

    (8)滅菌:在加熱初,將下排汽閥打開至垂直位置;下排汽閥待蒸汽冒出時,壓力表顯示指示為100℃時,將下排汽閥推向水平關(guān)閉位置;留有微量蒸汽逸出,以控制總汽流量的15%為宜。使用最高滅菌溫度為124℃~126℃,壓力在0.145Mpa~0.165Mpa范圍內(nèi)屬于安全閥設(shè)定數(shù),超出壓力部分,安全閥將自動泄壓,并開始計數(shù)滅菌所需時間。滅菌完成,電控裝置將自動關(guān)閉加熱系統(tǒng),伴有蜂鳴提醒;并將保溫時間切換成END顯示;此時,將控制面板上電源開關(guān)按至OFF處;關(guān)閉電源,停止加熱待其冷卻。

 

  (9)干燥:物品滅菌后需要迅速干燥,須打開放汽閥和下排汽閥,將滅菌器內(nèi)的蒸汽迅速排出,使物品上殘留水蒸汽快速揮發(fā)。

 

  (10)將蓋開啟,取出已滅菌物品。關(guān)閉水源,打開下排水閥,排盡滅菌室的水與水垢,以備下次使用。

 

2.注意事項

 

  (1)堆放滅菌物品時,嚴禁堵塞安全閥的出汽孔,必須留出空位保證其空氣暢通,否則安全閥因出汽孔堵塞不能工作,造成事故。

 

  (2)滅菌液體時,應將液體灌裝在硬制的耐熱玻璃瓶中,以不超過3/4體積為好,瓶口選用棉花紗塞,切勿使用未打孔的橡膠或軟木塞,特別注意,在滅菌液體結(jié)束時不準立即釋放蒸汽,必須待壓力表指針回零位方可排放余汽。

 

  (3)對不同類型,不同滅菌物要求的物品,切勿放在一起滅菌,以免顧此失彼,造成損失。

 

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來源:AnyTesting

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