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近年來，食品中非法添加罌粟殼事件頻頻報道，一些不法商販為了吸引顧客，大肆在火鍋、面湯、酸辣粉、麻辣燙、小龍蝦等食品或配料中添加罌粟殼來調(diào)味，食品安全問題形勢嚴峻，對罌粟殼中罌粟堿等主要成分進行檢測是相關(guān)部門的重要執(zhí)法手段。

 

罌粟堿的化學名為1-[(3,4-二甲氧基苯基)甲基]-6,7-二甲氧基異喹啉，是一種非麻醉生物堿，屬于血管舒張藥，在心?腦和外周血管痙攣引起的缺血以及腎?膽和胃腸道等內(nèi)臟痙攣的臨床治療中起到肌肉松弛劑的重要作用，但長期食用會導致上癮，可能引起心律不齊，精神失常，甚至呼吸停止而死亡。由于罌粟堿對人類健康的危害及其在食品中的非法添加問題，眾多學者開展了罌粟堿檢測方法的研究。

 

1、光譜分析技術(shù)

光譜分析技術(shù)是以光的吸收、發(fā)射、散射等作用而建立的分析方法，通過檢測光譜的波長和強度來確定物質(zhì)的結(jié)構(gòu)和含量，已廣泛應(yīng)用于物理、化學、生物等多個學科領(lǐng)域。

 

01分光光度法

分光光度法是通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸光度或發(fā)光強度來進行定性和定量分析的方法?；诶浰趬A自身或其他配對劑等物質(zhì)的紫外-可見吸收，可實現(xiàn)對罌粟堿的分光光度法檢測。

分光光度法操作簡單，儀器設(shè)備易得，檢測速率快，但干擾因素多，靈敏度不高，難以滿足復雜樣品檢測或痕量分析的要求。

 

02熒光分析法

熒光分析法是利用某些物質(zhì)被紫外光照射后處于激發(fā)態(tài)，激發(fā)態(tài)分子經(jīng)歷碰撞及發(fā)射的去激發(fā)過程能反映出該物質(zhì)特性的熒光，建立的定性或定量分析的方法。罌粟堿自身的熒光強度很弱，需要進行處理后采用熒光分析法檢測。

熒光分析法的靈敏度要優(yōu)于一般的分光光度法，但體系的穩(wěn)定性不高。此外，能夠引起熒光的化學物質(zhì)較少，該方法的應(yīng)用范圍也相對較小。

 

03化學發(fā)光法

化學發(fā)光法利用化學發(fā)光物質(zhì)由激發(fā)態(tài)躍遷回基態(tài)時發(fā)出的光信號進行定量分析，因為沒有外來激發(fā)光源存在時散射光背景的干擾，因而具有較高的靈敏度、較寬的線性范圍，且檢測設(shè)備簡單廉價，易微型化。

化學發(fā)光法雖簡單易行，但容易受其他生物堿的干擾、穩(wěn)定性較差，且樣品的發(fā)光不能再現(xiàn)。

 

04紅外光譜法

紅外光譜法是根據(jù)分子內(nèi)部原子間相對振動和分子轉(zhuǎn)動等信息來確定物質(zhì)分子結(jié)構(gòu)和鑒別化合物的分析方法，根據(jù)分子對紅外光吸收譜帶的數(shù)目、位置、形狀和強度等特征可以判定物質(zhì)結(jié)構(gòu)，紅外光譜法也是鑒定罌粟堿的重要方法之一。

另外，在用紅外光譜法檢測罌粟籽時，除了基團頻率區(qū)外，還要注意觀察指紋區(qū)，以便得出準確結(jié)果。

 

05拉曼光譜法

拉曼光譜法是利用激光來照射被測物質(zhì)時發(fā)生散射現(xiàn)象而產(chǎn)生與入射光頻率不同的散射光譜所進行的分析方法，在定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析方面同樣占有重要地位。

紅外光譜法和拉曼光譜法在分析物質(zhì)結(jié)構(gòu)、鑒別物質(zhì)方面有著不可比擬的優(yōu)勢，快速、簡便，且樣品無需預(yù)處理，可實現(xiàn)在線無損分析，是重要的定性分析技術(shù)，但在實際檢測中樣品成分往往很復雜，難以從獲得的光譜中提取特征信息，且這兩種分析方法定量能力欠佳。

 

2、色譜分析技術(shù)

色譜分析技術(shù)是利用不同物質(zhì)在不同相態(tài)的選擇性分配，以流動相對固定相中的混合物進行洗脫，混合物中不同的物質(zhì)會以不同的速率沿固定相移動，最終達到分離分析的效果。近年來，隨著各種聯(lián)用技術(shù)的發(fā)展，色譜法發(fā)展飛速，在眾多領(lǐng)域有著極其廣泛的應(yīng)用，也成為目前檢測罌粟堿的最主要的分析技術(shù)之一。

 

01薄層色譜法

薄層色譜又稱為薄層層析法，是一種快速分離多種物質(zhì)的特別有效的層析分離技術(shù)，它以涂布于支持板上的支持物作為固定相，以合適的溶劑為流動相，對混合樣品進行分離、鑒定和定量分析。

薄層色譜法設(shè)備簡單、成本低廉、顯色容易、展開速率快，但相對其他現(xiàn)代化儀器來說，操作復雜、自動化程度低，且特異性差，靈敏度低，由于操作過程中使用較多有機溶劑，對操作人員傷害較大。

 

02氣相色譜法

氣相色譜法是一種以氣體作為流動相、對易揮發(fā)而不發(fā)生分解的化合物進行分離分析的色譜技術(shù)，近年來發(fā)展較快，應(yīng)用較多。

隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的發(fā)展，氣相色譜法機械化程度已很高，應(yīng)用也很廣泛，但其定性完全依靠保留時間導致方法選擇性不高，如果檢測樣品基體較為復雜，可能會出現(xiàn)很多雜峰，容易出現(xiàn)假陽性，且樣品前處理過程繁瑣費時。

 

03液相色譜法

液相色譜法是一種用液體作為流動相，對揮發(fā)性差、極性或熱不穩(wěn)定的化合物進行分離分析的色譜技術(shù)，在罌粟堿檢測中應(yīng)用較多。

液相色譜法分離效率高、靈敏度高，但對于基質(zhì)復雜、罌粟堿含量較低的樣品來說，容易受干擾物質(zhì)的影響。

 

3、質(zhì)譜分析技術(shù)

質(zhì)譜分析技術(shù)是通過電場和磁場將運動的離子按質(zhì)荷比分離后進行檢測的方法，可以進行有效的定性分析，包括相對分子質(zhì)量測定、化學式的確定、結(jié)構(gòu)鑒定等。色譜分析技術(shù)是一種有效的定量分析方法，現(xiàn)代分析技術(shù)中常常將兩者結(jié)合，形成了多種聯(lián)用技術(shù)，用來進行復雜化合物的準確高效的定性定量分析。常見的方法有氣相色譜-質(zhì)譜法、液相色譜-質(zhì)譜法等。

 

01氣相色譜-質(zhì)譜法

氣相色譜-質(zhì)譜法適宜測定小分子、易揮發(fā)、熱穩(wěn)定、能氣化的化合物，用電子轟擊方式得到的譜圖可與標準譜庫對比。

質(zhì)譜法彌補了氣相色譜法選擇性不高、易產(chǎn)生假陽性的缺陷，極大地擴寬了氣相色譜的應(yīng)用范圍，氣相色譜-質(zhì)譜法靈敏度高、檢出限低，尤其在多種成分同時測定中表現(xiàn)了很大的優(yōu)勢，但儀器昂貴，檢測成本較高，且很多食品樣品基質(zhì)復雜，前處理過程繁瑣費時，易造成樣品損失。

 

02液相色譜-質(zhì)譜法

液相色譜-質(zhì)譜法彌補了氣相色譜-質(zhì)譜法的缺陷，可測定不揮發(fā)性化合物、極性化合物、熱不穩(wěn)定化合物及相對分子質(zhì)量較大的化合物等，尤其是升級為高效液相色譜、超高效液相色譜、串聯(lián)質(zhì)譜等，結(jié)合固相萃取等方法后適用范圍更廣，已成為現(xiàn)代分析技術(shù)中不可或缺的一部分。

液相色譜-質(zhì)譜法定性準確、靈敏度高，是目前最有效的分析技術(shù)之一，但是儀器設(shè)備價格昂貴，對操作人員要求高，普及推廣使用存在一定的難度。

 

4、電化學分析技術(shù)

電化學分析技術(shù)是現(xiàn)代分析技術(shù)的重要組成部分之一。它是根據(jù)溶液中物質(zhì)的電化學性質(zhì)及其變化規(guī)律，對組分進行定性和定量的儀器分析方法，在罌粟堿的檢測中應(yīng)用也非常廣泛。

電化學分析法靈活多變，可制備不同種類性能優(yōu)越的傳感器，靈敏度較高、測定范圍寬、檢測速率快，且儀器設(shè)備簡單、價格低廉、操作簡單，便于攜帶，適合現(xiàn)場檢測，但常常存在選擇性不高、重現(xiàn)性不好的問題。

 

5、免疫分析技術(shù)

免疫分析技術(shù)是一種利用抗原抗體特異性結(jié)合反應(yīng)來檢測各種物質(zhì)的分析方法，通過人工合成相應(yīng)的抗原/抗體可實現(xiàn)罌粟堿的檢測。

免疫分析法特異性強、操作簡單快速，但容易出現(xiàn)交叉反應(yīng)，相比較儀器昂貴、檢測費時的色譜法，更適合應(yīng)用于現(xiàn)場快速初篩。

 

6、各種分析技術(shù)的對比

 

分光光度法

優(yōu)點：儀器設(shè)備易得，成本低，操作簡單快速

缺點：靈敏度低，選擇性不高，易受其他生物堿的干擾

發(fā)展趨勢：提高靈敏度和選擇性，可應(yīng)用于基層單位罌粟堿檢測

 

熒光分析法

優(yōu)點：儀器設(shè)備簡單，成本低，操作簡單快速

缺點：穩(wěn)定性差，選擇性不高，能引起熒光的化學物質(zhì)較少，應(yīng)用范圍受限

發(fā)展趨勢：提高穩(wěn)定性和選擇性，開發(fā)新的熒光體系

 

化學發(fā)光法

優(yōu)點：儀器設(shè)備簡單，成本低，操作簡單快速

缺點：穩(wěn)定性差，選擇性不高，樣品的發(fā)光不能再現(xiàn)

發(fā)展趨勢：提高穩(wěn)定性和選擇性，開發(fā)新的化學發(fā)光體系

 

紅外光譜法

優(yōu)點：操作簡單快速，樣品無需預(yù)處理，可進行無損分析，定性能力強

缺點：對復雜樣品分析能力弱，定量能力弱

發(fā)展趨勢：可用于鑒定罌粟堿，作為罌粟堿檢測的輔助手段

 

拉曼光譜法

優(yōu)點：操作簡單快速，樣品無需預(yù)處理，可進行無損分析，定性能力強

缺點：對復雜樣品分析能力弱，定量能力弱

發(fā)展趨勢：可用于鑒定罌粟堿，作為罌粟堿檢測的輔助手段

 

薄層色譜法

優(yōu)點：設(shè)備簡單，成本低，檢測快速

缺點：操作復雜，特異性差，靈敏度低，干擾大，對操作人員傷害大

發(fā)展趨勢：在設(shè)備條件不足的情況下可用此法粗測

 

氣相色譜法

優(yōu)點：分離分析能力較強，可同時檢測多種物質(zhì)

缺點：設(shè)備昂貴，難以普及，檢測速率慢，樣品前處理繁雜，分析基質(zhì)復雜的樣品時，干擾物質(zhì)多，易出現(xiàn)假陽性，對操作人員要求高

發(fā)展趨勢：優(yōu)化前處理過程，提高靈敏度、選擇性和檢測速率

 

液相色譜法

優(yōu)點：分離分析能力較強，可同時檢測多種物質(zhì)，應(yīng)用范圍比氣相色譜法更廣

缺點：設(shè)備昂貴，難以普及，檢測速率慢，樣品前處理繁雜，分析基質(zhì)復雜的樣品時，干擾物質(zhì)多，易出現(xiàn)假陽性，對操作人員要求高

發(fā)展趨勢：優(yōu)化前處理過程，提高選擇性、靈敏度和檢測速率

 

氣相色譜-質(zhì)譜法

優(yōu)點：分離分析能力強，可同時檢測多種物質(zhì)，靈敏度高，選擇性好

缺點：昂貴，難以普及，檢測速率慢，樣品前處理繁雜，對操作人員要求高

發(fā)展趨勢：優(yōu)化前處理過程，提高檢測速率

 

液相色譜-質(zhì)譜法

優(yōu)點：分離分析能力強，可同時檢測多種物質(zhì)，靈敏度高，選擇性好，應(yīng)用范圍比氣相色譜-質(zhì)譜法更廣，適用于復雜樣品中罌粟堿的痕量分析

缺點：設(shè)備昂貴，難以普及，檢測速率慢，樣品前處理繁雜，對操作人員要求高

發(fā)展趨勢：優(yōu)化前處理過程，提高檢測速率，有望成為罌粟堿檢測的標準方法

 

電化學分析法

優(yōu)點：靈敏度高，測量范圍寬，儀器設(shè)備簡單、成本低，操作簡單快速，便于攜帶

缺點：干擾因素多，穩(wěn)定性和重現(xiàn)性差

發(fā)展趨勢：提高穩(wěn)定性、重現(xiàn)性和抗干擾能力，微型化、便攜化

 

免疫分析法

優(yōu)點：特異性強，靈敏度高，儀器設(shè)備簡單，成本低，操作簡單快速

缺點：容易產(chǎn)生交叉反應(yīng)，定量能力弱

發(fā)展趨勢：微型化、便攜化，可廣泛應(yīng)用于現(xiàn)場快速初篩

 

7、結(jié)語

電化學分析技術(shù)由于穩(wěn)定性和重現(xiàn)性差，在實際應(yīng)用中尚不成熟；紅外光譜法和拉曼光譜法一般用于定性分析；免疫分析技術(shù)的優(yōu)勢獨特；其他幾種分析技術(shù)的靈敏度通常是：

質(zhì)譜分析技術(shù)＞色譜分析技術(shù)＞分光光度法、熒光分析法和化學發(fā)光法

目前應(yīng)用前景最好的是免疫分析法和液相色譜-質(zhì)譜法。前者由于具有特異性強、成本低、操作簡單、檢測速率快等特點，可廣泛應(yīng)用于現(xiàn)場快速篩查；后者因設(shè)備昂貴、操作繁瑣費時等問題難以普及，但該方法在靈敏度、選擇性、準確性等方面的優(yōu)勢非常明顯，有望成為罌粟堿檢測的標準方法。

隨著科技的發(fā)展、儀器聯(lián)用技術(shù)的進步，罌粟堿的分析技術(shù)也將向著更高靈敏度、高選擇性、快速、簡單、低成本的方向發(fā)展，同時，根據(jù)不同的檢測目的、試驗條件，選擇合適的分析方法。