您當前的位置：檢測資訊 > 法規(guī)標準
嘉峪檢測網(wǎng) 2019-07-22 18:41
近日，國家藥品監(jiān)督管理局批準，現(xiàn)予發(fā)布《心可寧膠囊中酸性紅73檢查項補充檢驗方法》等17項藥品補充檢驗方法，內(nèi)容如下。
1.心可寧膠囊中酸性紅73檢查項補充檢驗方法（BJY201901）
?2.婦科止帶片中金胺O檢查項補充檢驗方法（BJY201902）
3.心寧片中赤芍、三七莖葉植物組織檢查項補充檢驗方法（BJY201903）
4.銀柴顆粒中灰氈毛忍冬皂苷乙檢查項補充檢驗方法（BJY201904）
5.心可舒膠囊中人參皂苷Rb3檢查項補充檢驗方法（BJY201905）
6.女金丸中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY201906）
7.女金丸中莧菜紅、日落黃和亮藍檢查項補充檢驗方法（BJY201907）
8.女金丸中松香酸檢查項補充檢驗方法（BJY201908）
9.潔白膠囊（丸）中松香酸檢查項補充檢驗方法（BJY201909）
10.歸脾丸（濃縮丸）中酸棗仁植物組織檢查項補充檢驗方法（BJY201910）
11.膽香鼻炎片中蒼耳子、金銀花及甘草植物組織檢查項補充檢驗方法（BJY201911）
12.阿膠顆粒中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY201912）
13.阿膠黃芪口服液中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY201913）
14.婦科止帶片中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY201914）
15.鹿角膠中豬皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY201915）
16.龜甲膠中豬皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY201916）
17.阿膠中豬皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY201917）
附件1
心可寧膠囊中酸性紅73檢查項補充檢驗方法（BJY 201901）
【檢查】酸性紅73 照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈－0.05mol/L乙酸銨溶液（24∶76）為流動相；檢測波長為509nm。理論板數(shù)按酸性紅73峰計算應(yīng)不低于3000。
對照品溶液的制備 取酸性紅73對照品適量，精密稱定，加70%甲醇制成每1ml中含20μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品內(nèi)容物4.0g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入70%甲醇20ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率500W，頻率40kHz）20分鐘，放冷，稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
結(jié)果判斷 供試品色譜中，應(yīng)不得出現(xiàn)與對照品色譜保留時間相同的色譜峰。若出現(xiàn)保留時間相同的色譜峰，采用二級管陣列檢測器比較相應(yīng)色譜峰在200～600nm波長范圍內(nèi)的紫外-可見吸收光譜，吸收光譜應(yīng)不相同。
備注：必要時，可采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法驗證。建議使用乙腈-0.01mol/L乙酸銨溶液流動相系統(tǒng)。
附件2
婦科止帶片中金胺O檢查項補充檢驗方法（BJY 201902）
【檢查】金胺Ｏ照高效液相色譜法（中國藥典 2015年版通則0512）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.033mol/L磷酸二氫鉀溶液（30∶70）為流動相；檢測波長為435nm。理論板數(shù)按金胺Ｏ峰計算應(yīng)不低于2000。
對照品溶液的制備 取金胺Ｏ對照品適量，加70%乙醇制成每1ml含2μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品（包衣片除去包衣）適量，研細，取2.5g，加入70%乙醇10ml，密塞，超聲處理30分鐘，放冷，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
結(jié)果判斷 供試品色譜中，應(yīng)不得出現(xiàn)與對照品色譜保留時間相同的色譜峰。若出現(xiàn)保留時間相同的色譜峰，則采用二極管陣列檢測器比較相應(yīng)色譜峰在320～500nm波長范圍內(nèi)的紫外-可見吸收光譜，吸收光譜應(yīng)不相同。
備注：必要時，可采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法驗證。建議采用乙腈-5mmol/L乙酸銨溶液（25∶75）流動相系統(tǒng)。
附件3
心寧片中赤芍、三七莖葉植物組織檢查項補充檢驗方法（BJY 201903）
【檢查】赤芍、三七莖葉植物組織 本品為部分浸膏片，除三七、川芎原藥材組織外，不得檢出赤芍、三七莖葉植物組織。
取本品2片，除去包衣，研細，取0.1g，加水10ml使溶解，離心，棄去上清液，沉淀加水2ml使混懸，加水合氯醛試液2ml，加熱透化，搖勻，取混懸液1滴，置載玻片上，加稀甘油1滴，蓋上蓋玻片，置顯微鏡100倍下，參照下圖位置，選取9個檢查點檢視。視野中不得檢出以下任一植物組織：草酸鈣簇晶眾多，散在或存在于薄壁細胞中，常數(shù)個至數(shù)十個排列成行，直徑7~41μm，棱角較平截或稍尖，有的似方晶狀；木栓細胞淡紅色、棕色或微顯紫色，表面觀呈長條形、長方形或長多角形，壁稍厚，平直或稍波狀彎曲，有的細胞中充滿棕色或紅棕色塊狀物（赤芍）。莖纖維長，多成束存在；葉肉組織由類圓形薄壁細胞組成（三七莖葉）。
如僅有1個檢查點視野中檢出上述植物組織，應(yīng)依法制片復(fù)試，復(fù)試應(yīng)不得檢出。
圖：蓋玻片上檢查點示意圖
附件4
銀柴顆粒中灰氈毛忍冬皂苷乙檢查項補充檢驗方法（BJY 201904）
【檢查】灰氈毛忍冬皂苷乙 照高效液相色譜法（中國藥典 2015年版通則0512）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動相A ，以水為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；蒸發(fā)光散射檢測器檢測。理論板數(shù)按灰氈毛忍冬皂苷乙峰計算應(yīng)不低于5000。
對照品溶液的制備 取灰氈毛忍冬皂苷乙對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品5袋內(nèi)容物，研細，混勻，取2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入加甲醇25ml，稱定重量，超聲處理30分鐘（300W，50kHz），放冷，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各20μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
結(jié)果判斷 供試品色譜中，應(yīng)不得出現(xiàn)與對照品色譜保留時間相同的色譜峰。
備注：必要時，可采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法驗證。建議采用乙腈-0.1%甲酸流動相系統(tǒng)。
附件5
心可舒膠囊中人參皂苷Rb3檢查項補充檢驗方法（BJY 201905）
【檢查】人參皂苷Rb3 照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑2.1mm）；以乙腈為流動相A，水為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫，流速為0.3ml/min；柱溫為40℃；采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧負離子模式（ESI-），進行多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇質(zhì)荷比m/z 1077.7→783.4和m/z 1077.7→945.4作為檢測離子對。
對照品溶液的制備取人參皂苷Rb3對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，精密量取適量，用20%乙腈稀釋制成每1ml含4ng的溶液，即得。
供試品溶液的制備取本品10粒的內(nèi)容物，研細，取約1.2g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，置80℃水浴中加熱回流2小時，取出，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置100ml量瓶中，加20%乙腈稀釋至刻度，搖勻，濾過，即得。
測定法分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各5µl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，記錄色譜圖。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 1077.7→783.4的色譜峰面積值不大于對照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 1077.7→783.4的色譜峰面積值大于對照品溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與對照品溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
附件6
女金丸中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY 201906）
【檢查】牛皮源成分 照高效液相色譜（中國藥典2015年版通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性實驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑為2.1mm）；以0.1%甲酸乙腈溶液為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫，流速為每分鐘0.3m1。采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇m/z 641.3（雙電荷）→726.2和m/z 641.3（雙電荷）→783.3作為檢測離子對。取牛皮源成分參比溶液，進樣5µl，按上述離子對測定的MRM色譜峰的信噪比均應(yīng)大于10:1。
牛皮源成分參比溶液的制備 取黃明膠對照藥材0.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5ml，置100ml量瓶中，加入阿膠對照藥材粉末0.20g，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理30分鐘，再加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液100μl，置微量進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析級胰蛋白酶，加1%碳酸氫銨溶液制成每1μl中含1μg的溶液，臨用前現(xiàn)配）10μl，搖勻，37℃恒溫酶解12小時，即得。
供試品溶液的制備 取本品水蜜丸適量，研碎，取4.00g，精密稱定；或取大蜜丸10丸，剪碎，混勻，取7.00g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘使溶散，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，離心（3000轉(zhuǎn)/分鐘）5分鐘，將上清液轉(zhuǎn)移至另一離心管中，離心（9000轉(zhuǎn)/分鐘）5分鐘，取上清液，用0.45μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，自“用0.22μm微孔濾膜濾過”起，照牛皮源成分參比溶液的制備方法同法操作，即得。
測定法 分別精密吸取參比溶液與供試品溶液各5μl，注入液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，即得。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜離子質(zhì)荷比（m/z）數(shù)值相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值不大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
附件7
女金丸中莧菜紅、日落黃和亮藍檢查項補充檢驗方法（BJY 201907）
【檢查】莧菜紅、日落黃和亮藍（1）取本品2g，加硅藻土1g，研細，加50%甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液。另取莧菜紅、日落黃和亮藍對照試劑，加50%甲醇制成每1ml含20μg的混合溶液，作為對照試劑溶液。照薄層色譜法（中國藥典2015年版通則0502）試驗，吸取上述兩種溶液各5μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯-正丁醇-乙醇-濃氨試液-水（1∶3∶3∶1∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，日光下檢視。供試品色譜中，在與對照試劑色譜相應(yīng)的位置上，不得檢出相同顏色的斑點；若檢出相同顏色的斑點，或相同位置有干擾不能判斷時，則采用下列高效液相色譜法驗證。
（2）照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇為流動相A，以0.05mol/L乙酸銨為流動相B，按下表梯度進行洗脫；采用二極管陣列檢測器；檢測波長為521nm（檢測莧菜紅）、484nm（檢測日落黃）、629nm（檢測亮藍）。理論板數(shù)按莧菜紅峰計算應(yīng)不低于4000。
測定法 分別精密吸取供試品溶液和對照試劑溶液各10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。
結(jié)果判斷 供試品色譜中，應(yīng)不得出現(xiàn)與對照試劑色譜保留時間相同的色譜峰。若出現(xiàn)保留時間相同的色譜峰，則采用二極管陣列檢測器比較相應(yīng)色譜峰在200～700nm波長范圍內(nèi)的紫外-可見吸收光譜，吸收光譜應(yīng)不相同。
備注：必要時，可采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法驗證。
附件8
女金丸中松香酸檢查項補充檢驗方法（BJY 201908）
【檢查】松香酸 照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%甲酸（80 :20）為流動相；采用二極管陣列檢測器；檢測波長為241nm。理論板數(shù)按松香酸峰計算應(yīng)不低于2000。
對照溶液的制備（臨用新制） 取松香酸對照試劑適量，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含2μg的溶液，作為對照試劑溶液。另取11-羰基-β-乙酰乳香酸對照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含2μg的溶液，作為參照溶液。
供試品溶液的制備 取本品9g，加硅藻土4.5g，研細，取約3g，精密稱定，加50%甲醇20ml，超聲處理30分鐘，濾過，精密量取續(xù)濾液1ml，置10ml量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。
測定法 分別精密吸取供試品溶液、對照試劑溶液與參照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
結(jié)果判斷 供試品色譜中，在與松香酸對照試劑溶液色譜峰保留時間相應(yīng)的位置上不得出現(xiàn)相同的色譜峰。若出現(xiàn)保留時間相同的色譜峰，采用二極管陣列檢測器比較相應(yīng)色譜峰的紫外-可見吸收光譜，吸收光譜應(yīng)不同（松香酸對照試劑色譜峰在241nm顯示最大吸收）；若吸收光譜相同，且該色譜峰的峰面積大于11-羰基-β-乙酰乳香酸參照溶液色譜峰的峰面積值，則視為陽性檢出。
備注：必要時，可采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法驗證。
附件9
潔白膠囊（丸）中松香酸檢查項補充檢驗方法（BJY 201909）
【檢查】松香酸 （1）取本品膠囊內(nèi)容物適量，研細，取1g；取本品丸適量，研細，取1g，加乙醇20ml，密塞，超聲處理20分鐘，濾過，蒸干，殘渣加無水乙醇2ml溶解，作為供試品溶液。取松香酸對照試劑適量，加乙醇制成每1ml含1mg的溶液，即得（臨用新制）。照薄層色譜法（中國藥典2015年版通則0502）試驗，吸取供試品溶液和對照試劑溶液各5μl，分別點于同一硅膠GF254薄層板上，以甲苯-乙酸乙酯-正庚烷-無水甲酸（8:2:1:0.3）為展開劑，展開，取出，晾干，放置10分鐘后置紫外光燈（254nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照試劑色譜相應(yīng)的位置上，不得顯相同的熒光淬滅斑點。再噴以10%硫酸乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰，置紫外光燈（365nm）下檢視。供試品色譜中，在與松香酸對照試劑相應(yīng)的位置上，不得顯相應(yīng)的熒光斑點。若出現(xiàn)相同顏色的斑點，則用下列高效液相色譜法驗證。
（2）照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）測定。
色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.1%甲酸溶液（80：20）為流動相；檢測波長為241nm。理論板數(shù)按松香酸峰計算應(yīng)不低于2000。
對照試劑溶液的制備（臨用新制） 取松香酸對照試劑適量，加乙醇制成每1ml含10μg的溶液，即得。
供試品溶液的制備 取本品膠囊內(nèi)容物適量，研細，取0.2g；取本品丸適量，研細，取0.2g，加乙醇20ml，超聲處理20分鐘，放至室溫，上清液用微孔濾膜（0.45μm）濾過，取續(xù)濾液，即得。
測定法 分別吸取供試品溶液和對照試劑溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。
結(jié)果判斷供試品色譜中，在與松香酸對照試劑溶液色譜峰保留時間相應(yīng)的位置上不得出現(xiàn)相同的色譜峰。若出現(xiàn)保留時間相同的色譜峰，則采用二極管陣列檢測器比較相應(yīng)色譜峰的紫外-可見吸收光譜，吸收光譜應(yīng)不相同（松香酸對照試劑色譜峰在241nm顯示最大吸收）；若吸收光譜相同，則視為陽性檢出。
備注：必要時，可采用高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用方法進行驗證。
附件10
歸脾丸（濃縮丸）中酸棗仁植物組織檢查項補充檢驗方法（BJY 201910）
【檢查】酸棗仁植物組織 本品為部分浸膏濃縮丸，除黨參、當歸、甘草、木香植物組織特征外，不得檢出酸棗仁植物組織。
取本品5丸，研細，稱取0.1g，加水10ml超聲使溶解，離心（轉(zhuǎn)速為每分鐘2000轉(zhuǎn)）10分鐘，棄去上清液，沉淀加水2ml使混懸，吸取混懸液1滴于載玻片上，加水合氯醛試液適量，加熱透化，蓋上蓋玻片，置顯微鏡100倍下，參照下圖位置，選取9個檢查點檢視，視野中不得檢出以下任一植物組織: 種皮柵狀細胞棕紅色，表面觀多角形，直徑約15μm，壁厚，木化，胞腔小，側(cè)面觀呈長條形，外壁增厚，側(cè)壁上中部甚厚，下部漸薄，底面觀類多角形或圓多角形；種皮內(nèi)表皮細胞棕黃色，表面觀長方形或類方形，垂周壁連珠狀增厚，木化。
如僅有1個檢查點視野中檢出上述植物組織，應(yīng)依法制片復(fù)試，復(fù)試不得檢出。
圖：蓋玻片上檢查點示意圖
附件11
膽香鼻炎片中蒼耳子、金銀花及甘草植物組織檢查項補充檢驗方法（BJY 201911）
【檢查】蒼耳子、金銀花及甘草植物組織 本品為部分浸膏片，除鵝不食草植物組織特征外,不得檢出蒼耳子、金銀花及甘草植物組織。
取本品2片，研細，稱取0.1g，加水10ml超聲使溶解，離心（轉(zhuǎn)速為每分鐘2000轉(zhuǎn)）10分鐘，棄去上清液，沉淀加水2ml使混懸，取混懸液1滴置載玻片上，加水合氯醛試液適量，加熱透化，蓋上蓋玻片，置顯微鏡100倍下，參照下圖位置，選取9個檢查點檢視，視野中不得檢出以下任一植物組織：總苞纖維成束，常呈縱橫交叉排列。果皮表皮細胞棕色，類長方形，常與下層纖維相連（蒼耳子）?；ǚ哿ｎ悎A形或三角形，表面具細密短刺及細顆粒狀雕紋，具3孔溝。草酸鈣簇晶直徑6～45μm，存在于薄壁細胞中（金銀花）。纖維成束，直徑8～14μm，壁厚，微木化，周圍薄壁細胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維。具緣紋孔導(dǎo)管較大（甘草）。
如僅有1個檢查點視野中檢出上述植物組織，應(yīng)依法制片復(fù)試，復(fù)試不得檢出。
圖：蓋玻片上檢查區(qū)域示意圖
附件12
阿膠顆粒中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY 201912）
【檢查】牛皮源成分照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑2.1mm）；以乙腈為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；流速為每分鐘0.3ml；采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇m/z 641.3（雙電荷）→726.2和m/z 641.3（雙電荷）→783.3作為檢測離子對。取牛皮源成分參比溶液，進樣5μl，按上述離子對測定的MRM色譜峰的信噪比均應(yīng)大于10:1。
牛皮源成分參比溶液的制備取黃明膠對照藥材0.12g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5ml，置100ml量瓶中，并加入阿膠對照藥材粉末0.24g，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理30分鐘，再加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液100μl，置微量進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析級胰蛋白酶，加1%碳酸氫銨溶液制成每1μl中含1μg的溶液，臨用前現(xiàn)配）10μl，搖勻，37℃恒溫酶解12小時，即得。
供試品溶液的制備取阿膠顆粒粉末0.20g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，自“用0.22μm微孔濾膜濾過”起，照牛皮源成分參比溶液的制備方法同法操作，即得。
測定法分別吸取牛皮源成分參比溶液與供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，即得。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值不大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
附件13
阿膠黃芪口服液中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY 201913）
【檢查】牛皮源成分高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑2.1mm）；以乙腈為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫；流速為每分鐘0.3ml；采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇m/z 641.3（雙電荷）→726.2和m/z 641.3（雙電荷）→783.3作為檢測離子對。取牛皮源成分參比溶液，進樣5μl，按上述離子對測定的MRM色譜峰的信噪比均應(yīng)大于10:1。
牛皮源成分參比溶液的制備取黃明膠對照藥材0.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5ml，置100ml量瓶中，并加入阿膠對照藥材粉末0.20g，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理30分鐘，再加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液100μl，置微量進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析級胰蛋白酶，加1%碳酸氫銨溶液制成每1μl中含1μg的溶液，臨用前現(xiàn)配）10μl，搖勻，37℃恒溫酶解12小時，即得。
供試品溶液的制備精密量取阿膠黃芪口服液1ml，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，自“用0.22μm微孔濾膜濾過”起，照牛皮源成分參比溶液的制備方法同法操作，即得。
測定法分別吸取牛皮源成分參比溶液與供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，即得。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值不大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
附件14
婦科止帶片中牛皮源成分檢查項補充檢驗方法
（BJY 201914）
【檢查】牛皮源成分 照高效液相色譜法（中國藥典2015年版通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑為2.1mm）；以乙腈為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫，流速為每分鐘0.3ml；采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇m/z 641.3（雙電荷）→726.2和m/z 641.3（雙電荷）→783.3作為檢測離子對。取牛皮源成分參比溶液，進樣5μl，按上述離子對測定的MRM色譜峰的信噪比均應(yīng)大于10∶1。
牛皮源成分參比溶液的制備 取黃明膠對照藥材0.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理60分鐘，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5ml，置100ml量瓶中，加入阿膠對照藥材粉末0.20g，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理30分鐘，再加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液100 μl，置微量進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析級胰蛋白酶，加1%碳酸氫銨溶液制成每1μl中含1μg的溶液，臨用前現(xiàn)配）10μl，搖勻，37℃恒溫酶解20小時，即得。
供試品溶液的制備 取婦科止帶片10片（包衣片除去包衣），精密稱定，研細，混勻，取約1片的重量（約相當于含膠類藥材0.2g），精密稱定，置100ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理60分鐘，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，自“用0.22μm微孔濾膜濾過”起，照牛皮源成分參比溶液的制備方法同法操作，即得。
測定法 分別吸取牛皮源成分參比溶液與供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，即得。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值不大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時出現(xiàn)與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 641.3（雙電荷）→726.2的色譜峰面積值大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
備注：建議采用固定相粒徑不大于3μm規(guī)格的色譜柱。
附件15
鹿角膠中豬皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY 201915）
【檢查】豬皮源成分照高效液相色譜法（中國藥典2015年版四部通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版四部通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑2.1mm）；以乙腈為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫，流速為每分鐘0.3ml；采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇m/z 774.5（雙電荷）→977.8和m/z 774.5（雙電荷）→1034.6作為檢測離子對。取豬皮源成分參比溶液，進樣5μl，按上述離子對測定的MRM色譜峰的信噪比均應(yīng)大于10：1。
豬皮源成分參比溶液的制備取新阿膠對照藥材0.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5ml置100ml量瓶中，并加入鹿角膠對照藥材粉末0.20g，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，再加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液100μl，置微量進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析級胰蛋白酶，加1%碳酸氫銨溶液制成每1μl中含1μg的溶液，臨用前現(xiàn)配）10μl，搖勻，37℃恒溫酶解12小時，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末0.10g，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，自“用0.22μm微孔濾膜濾過”起，照豬皮源成分參比溶液的制備方法同法操作，即得。
測定法分別吸取豬皮源成分參比溶液與供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，即得。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 774.5（雙電荷）→977.8的色譜峰面積值不大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 774.5（雙電荷）→977.8的色譜峰面積值大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
附件16
龜甲膠中豬皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY 201916）
【檢查】豬皮源成分照高效液相色譜法（中國藥典2015年版四部通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版四部通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑2.1mm）；以乙腈為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫，流速為每分鐘0.3ml；采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇m/z 774.5（雙電荷）→977.8和m/z 774.5（雙電荷）→1034.6作為檢測離子對。取豬皮源成分參比溶液，進樣5μl，按上述離子對測定的MRM色譜峰的信噪比均應(yīng)大于10：1。
豬皮源成分參比溶液的制備取新阿膠對照藥材0.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取取上述溶液5ml，置100ml量瓶中，加入龜甲膠對照藥材粉末0.20g，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，再加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液100μl，置微量進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析級胰蛋白酶，加1%碳酸氫銨溶液制成每1μl中含1μg的溶液，臨用前現(xiàn)配）10μl，搖勻，37℃恒溫酶解12小時，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末0.10g，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，自“用0.22μm微孔濾膜濾過”起，照豬皮源成分參比溶液的制備方法同法操作，即得。
測定法分別吸取豬皮源成分參比溶液與供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，即得。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 774.5（雙電荷）→977.8的色譜峰面積值不大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 774.5（雙電荷）→977.8的色譜峰面積值大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
附件17
阿膠中豬皮源成分檢查項補充檢驗方法（BJY 201917）
【檢查】豬皮源成分照高效液相色譜法（中國藥典2015年版四部通則0512）和質(zhì)譜法（中國藥典2015年版四部通則0431）測定。
色譜、質(zhì)譜條件與系統(tǒng)適用性試驗以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑（色譜柱內(nèi)徑2.1mm）；以乙腈為流動相A，以0.1%甲酸溶液為流動相B，按下表中的規(guī)定進行梯度洗脫，流速為每分鐘0.3ml；采用質(zhì)譜檢測器，電噴霧正離子模式（ESI+），多反應(yīng)監(jiān)測（MRM），選擇m/z 774.5（雙電荷）→977.8和m/z 774.5（雙電荷）→1034.6作為檢測離子對。取豬皮源成分參比溶液，進樣5μl，按上述離子對測定的MRM色譜峰的信噪比均應(yīng)大于10：1。
豬皮源成分參比溶液的制備取新阿膠對照藥材0.10g，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述溶液5ml置100ml量瓶中，加入阿膠對照藥材粉末0.20g，加1%碳酸氫銨溶液80ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，再加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，用0.22μm微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液100μl，置微量進樣瓶中，加胰蛋白酶溶液（取序列分析級胰蛋白酶，加1%碳酸氫銨溶液制成每1μl中含1μg的溶液，臨用前現(xiàn)配）10μl，搖勻，37℃恒溫酶解12小時，即得。
供試品溶液的制備取本品粉末0.10g，置50ml量瓶中，加1%碳酸氫銨溶液40ml，超聲處理30分鐘，使樣品完全溶解，加1%碳酸氫銨溶液稀釋至刻度，搖勻，自“用0.22μm微孔濾膜濾過”起，照豬皮源成分參比溶液的制備方法同法操作，即得。
測定法分別吸取豬皮源成分參比溶液與供試品溶液各5μl，注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀，測定，即得。
判定原則（1）供試品的提取離子流色譜中，未同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，視為未檢出；（2）供試品的提取離子流色譜中，同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 774.5（雙電荷）→977.8的色譜峰面積值不大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為未檢出；（3）供試品的提取離子流色譜中，同時檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰，且供試品色譜中m/z 774.5（雙電荷）→977.8的色譜峰面積值大于參比溶液中相應(yīng)的峰面積值者，視為檢出。
結(jié)果判定供試品的提取離子流色譜中，應(yīng)不得檢出與參比溶液色譜相應(yīng)的色譜峰。
來源：國家藥監(jiān)局
關(guān)于我們 聯(lián)系我們 營業(yè)執(zhí)照 全國服務(wù)電話：400-818-0021 嘉峪檢測版權(quán)所有 備案號：京ICP備14047019號-2 
京公網(wǎng)安備11010802046783號
