中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

【導(dǎo)讀】藥物中的雜質(zhì)是否能被全面準(zhǔn)確地控制，直接關(guān)系到藥品的質(zhì)量可控與安全性?！吨袊?guó)藥典》多采用主成分自身對(duì)照法規(guī)定有關(guān)物質(zhì)的限度，而國(guó)外藥典中多用到雜質(zhì)對(duì)照品進(jìn)行檢測(cè)，這也就要求雜質(zhì)對(duì)照品符合一定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)后方可使用。對(duì)照品的標(biāo)定中常涉及的項(xiàng)目包括純度測(cè)定、結(jié)構(gòu)確證、含量測(cè)定等，考慮到雜質(zhì)對(duì)照品的微量性，標(biāo)定時(shí)選擇合適的分析方法十分重要，如進(jìn)行純度測(cè)定可使用高效液相色譜法、差示掃描量熱法等試樣用量少的分析儀器。

一  概述

    藥物雜質(zhì)的控制是藥品質(zhì)量控制的關(guān)鍵，因?yàn)樗幤分械碾s質(zhì)可能降低藥物的療效，甚至對(duì)人體健康產(chǎn)生危害。因此，對(duì)來(lái)源于原材料、藥品貯藏與運(yùn)輸過(guò)程中產(chǎn)生的雜質(zhì)，要進(jìn)行科學(xué)、嚴(yán)謹(jǐn)?shù)姆治雠c研究，特別注意對(duì)臨床有毒理作用的雜質(zhì)進(jìn)行控制，如對(duì)可能引起基因毒性雜質(zhì)的量必須控制到1×10⁻⁶水平。

      在雜質(zhì)研究中，使用雜質(zhì)對(duì)照品進(jìn)行檢測(cè)是科學(xué)有效的方法。雜質(zhì)對(duì)照品除具有一般對(duì)照品的特點(diǎn)外，還具有自身特點(diǎn)：制備困難，樣品量少且價(jià)格昂貴。如歐洲藥典委員會(huì)提供的雜質(zhì)對(duì)照品的量一般在10 mg 左右或更少。所以標(biāo)定雜質(zhì)對(duì)照品時(shí)，要選擇專屬性強(qiáng)、靈敏度高、進(jìn)樣量需求少的檢測(cè)方法，如高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、核磁共振法等。本文對(duì)雜質(zhì)對(duì)照品及其來(lái)源進(jìn)行介紹，并簡(jiǎn)要總結(jié)了雜質(zhì)對(duì)照品的標(biāo)定項(xiàng)目和標(biāo)定方法，希望對(duì)雜質(zhì)對(duì)照品的研究工作提供幫助，進(jìn)而推動(dòng)藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立。

二  雜質(zhì)對(duì)照品簡(jiǎn)介

     雜質(zhì)對(duì)照品屬于對(duì)照品的一種?！吨袊?guó)藥典中沒有專門提到雜質(zhì)對(duì)照品，但對(duì)對(duì)照品有明確定義：“對(duì)照品系指用于鑒別、檢查、含量測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)”?；瘜W(xué)對(duì)照品（包括雜質(zhì)對(duì)照品）還可稱為化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、化學(xué)對(duì)照物質(zhì)

?！睹绹?guó)藥典》34 版中將化學(xué)對(duì)照品定義為用于相應(yīng)原料藥或制劑的鑒別、檢測(cè)以及性能驗(yàn)證試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，當(dāng)對(duì)照品未給出量值時(shí)，其量按100.0%

計(jì)?！稓W洲藥典》與《英國(guó)藥典》中也僅提到化學(xué)對(duì)照品?！稓W洲藥典》化學(xué)對(duì)照品即滿足藥典各論或附錄中規(guī)定用途的物質(zhì)或混合物，除以國(guó)際單位定值的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)外，藥典化學(xué)對(duì)照品是基準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)?！队?guó)藥典》中除少量使用本國(guó)的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)外，主要使用《歐洲藥典》的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（包括化學(xué)對(duì)照品）。

     雜質(zhì)對(duì)照品的來(lái)源途徑包括制備液相富集及定向合成兩種。世界衛(wèi)生組織規(guī)定用于已知雜質(zhì)測(cè)定的雜質(zhì)對(duì)照品，其純度應(yīng)不低于95%；如果雜質(zhì)對(duì)照品的純度低于 95%時(shí)，要注明其純度。如定向合成利洛司酮中兩個(gè)微量雜質(zhì)單去甲基利洛司酮、氫化利洛司酮，經(jīng)多次柱色譜分離，含量均可達(dá)到97%。當(dāng)某個(gè)雜質(zhì)對(duì)照品的量不能滿足標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備需要時(shí)，可以有其他幾種替代方法：（1）將雜質(zhì)（單個(gè)或多個(gè)雜質(zhì)）和其他化合物（一般是主成分或中間體）混合；（2）將多個(gè)已知雜質(zhì)混合；（3）改變分裝方式，由以往常規(guī)的用戶精密稱取，定量稀釋使用改為定量分裝后用戶定量稀釋、直接使用。

三  雜質(zhì)對(duì)照品的標(biāo)定項(xiàng)目

     參照對(duì)照品的標(biāo)定項(xiàng)目，雜質(zhì)對(duì)照品的標(biāo)定項(xiàng)目一般包括：采用有效方法確定其純度，并用其他方法進(jìn)行驗(yàn)證；確定水分含量，包括表面水和結(jié)晶水；確定殘留溶劑；確定無(wú)機(jī)雜質(zhì)總量；確定有關(guān)物質(zhì)。首批雜質(zhì)對(duì)照品還須做相應(yīng)的化學(xué)、理化鑒定試驗(yàn)，如質(zhì)譜、核磁共振譜等。

     標(biāo)定方法的選擇直接關(guān)系到測(cè)定結(jié)果的專屬性與準(zhǔn)確性，標(biāo)定時(shí)應(yīng)重點(diǎn)關(guān)注檢測(cè)方法的選擇與驗(yàn)證等方面。

1 純度測(cè)定

    常用方法有高效液相色譜（HPLC）法、薄層色譜（TLC）法等。使用HPLC 法進(jìn)行測(cè)定，需用 3 種不同流動(dòng)相或檢測(cè)波長(zhǎng)，應(yīng)盡可能做到主峰為平頭峰，扣除溶劑峰后，以歸一法計(jì)算含量。使用 TLC法時(shí)，同樣需使用3 種不同展開劑對(duì)雜質(zhì)對(duì)照品進(jìn)行鑒別，并且至少在一種條件下的斑點(diǎn)足夠大到稍有拖尾，如果 3 次都只得到一個(gè)斑點(diǎn)，說(shuō)明其基本為純物質(zhì)。

2 結(jié)構(gòu)確證

     雜質(zhì)對(duì)照品需要進(jìn)行鑒別分析，可采用紅外分光光度（IR）法、核磁共振（NMR）法、質(zhì)譜（必要時(shí)采用高分辨質(zhì)譜）法、差示掃描量熱（DSC）法等確證雜質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，X粉末衍射（XRD）法可用于測(cè)定手性構(gòu)型。

     多種結(jié)構(gòu)檢測(cè)方法的聯(lián)用也是很好的選擇。采用收集餾分的方法，收集到愈創(chuàng)木酚甘油醚中的微量雜質(zhì)，再使用液–質(zhì)聯(lián)用法確定了雜質(zhì)相對(duì)分子質(zhì)量，試驗(yàn)結(jié)果與實(shí)驗(yàn)室標(biāo)樣結(jié)果一致。在研究微量雜質(zhì)時(shí)還可使用大氣壓化學(xué)電離飛行時(shí)間質(zhì)譜儀，此法對(duì)分子中含極性基團(tuán)但整個(gè)分子無(wú)較大極性的化合物響應(yīng)較強(qiáng)，如甾體類藥物氫化可的松；而電噴霧離子化的方式對(duì)極性大的物質(zhì)響應(yīng)效果較好。

3  含量測(cè)定

     要求用兩種方法測(cè)定含量，一般為容量法和色譜法。容量法要求兩人分別測(cè)定3～5份，每人的平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果以及兩人的實(shí)驗(yàn)結(jié)果的相對(duì)偏差均應(yīng)小于0.3%。色譜法如 HPLC 法需用 3 種濃度作校正因子，精密度要求小于1.5%，一般用面積歸一法計(jì)算含量。

    氣相色譜（GC）法用于定量微量樣品時(shí)，對(duì)色譜柱的篩選也很重要，如檢測(cè)丙烯腈中可能存在的微量有機(jī)物丙烯醛、乙腈、丙酮、唑、丙腈時(shí)，比對(duì)填充柱與毛細(xì)管柱的區(qū)別，結(jié)果毛細(xì)管柱可檢測(cè)到含量低于1×10⁻⁶的組分，比填充柱的精確度要高。

     此外NMR 法也可用于樣品的定量。Jenny等[20]在研究泊洛沙姆中的醛類雜質(zhì)時(shí)使用NMR 法進(jìn)行定量，試驗(yàn)結(jié)果靈敏、準(zhǔn)確，證明此法可在微量樣品定量中進(jìn)行應(yīng)用。NMR法特別適用于對(duì)新物質(zhì)的含量確定，測(cè)定時(shí)無(wú)需專用的樣品基準(zhǔn)物質(zhì)，而僅以含量已知的普通化學(xué)物質(zhì)為參比。確定好溶劑和內(nèi)標(biāo)，選擇合適的定量峰用于計(jì)算，就可測(cè)得樣品的絕對(duì)含量，方法專屬、快速、簡(jiǎn)便。但應(yīng)注意使用此方法的前提是圖譜不能過(guò)于復(fù)雜而難以解析，各吸收峰歸屬清楚，用于定量的共振峰應(yīng)無(wú)其他峰影響其積分值的測(cè)定。

4  水分測(cè)定

      雜質(zhì)對(duì)照品可用庫(kù)侖滴定法或干燥失重法測(cè)定水分。另外必須指出，《中國(guó)藥典》通常在干燥失重測(cè)定時(shí)規(guī)定了干燥至恒重，而由于雜質(zhì)對(duì)照品量少，使用干燥失重法測(cè)定水分時(shí)標(biāo)準(zhǔn)可適當(dāng)放寬，由對(duì)照品的研制者通過(guò)實(shí)驗(yàn)探索，確定干燥至恒重的最短的具體時(shí)間，并在對(duì)照品說(shuō)明書中注明即可。

5  重金屬測(cè)定

     微量重金屬元素可采用原子吸收分光光度（AAS）法、原子熒光（AFS）法、電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜（ICP-MS）法測(cè)定。

6 溶劑殘留測(cè)定

     樣品中的有機(jī)溶劑殘留量一般使用 GC 法檢測(cè)，但所配制的供試品溶液的濃度應(yīng)滿足定量測(cè)定的需要，一般供試品取樣量在 0.1～1 g，當(dāng)樣品量較少且主成分對(duì)熱穩(wěn)定時(shí)可考慮做干燥失重，對(duì)可能由少量水分帶來(lái)的誤差再輔助庫(kù)侖滴定法確定水分的量。

四、純度測(cè)定方法      

      純度測(cè)定的方法按照用途可分為 3 類：（1）需用外標(biāo)對(duì)照品的方法（如色譜法）；（2）依據(jù)固有的動(dòng)力學(xué)特性建立的方法（相溶解度法或差熱掃描法），適用于首批對(duì)照品的標(biāo)定；（3）其他方法。

     用第一類方法測(cè)定純度時(shí)必須用系統(tǒng)適用性試驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證，色譜法常用于雜質(zhì)的鑒別及定量。其中 HPLC 法是應(yīng)用最廣泛的色譜方法，此外TLC法、GC 法、毛細(xì)管電泳（CE）法也得到越來(lái)越多的應(yīng)用。第二類方法可用來(lái)測(cè)定總雜質(zhì)的含量。如 DSC 法正越來(lái)越多的用于檢測(cè)具有多晶型結(jié)構(gòu)且構(gòu)型不同的化合物，同時(shí)測(cè)定全部固體雜質(zhì)的總量。第三類方法包括紫外分光光度（UV）法、IR法、NMR 法、滴定法、比旋法等。通過(guò)熔程也可判斷純度（樣品量在 1 mg 以上），純化合物熔程很短1～2 ℃；混合物熔點(diǎn)下降，熔程變長(zhǎng)。

1 HPLC 法

      一般使用二極管陣列檢測(cè)峰純度，它可提供痕量水平測(cè)定所需的靈敏度。如使用 HPLC法對(duì)強(qiáng)心藥氨力農(nóng)對(duì)照品的純度進(jìn)行測(cè)定，檢測(cè)量為 0.5 mg，最小檢出 0.049 μg，達(dá)到檢測(cè)量的 0.01%，試驗(yàn)中更換色譜柱作為方法耐用性考察，用不加校正因子的自身對(duì)照法計(jì)算雜質(zhì)純度，進(jìn)而得到氨力農(nóng)的純度，說(shuō)明 HPLC 法適合氨力農(nóng)對(duì)照品純度的檢測(cè)，具有靈敏度高、快速、準(zhǔn)確等優(yōu)點(diǎn)。此法的缺點(diǎn)在于可能會(huì)出現(xiàn)雜質(zhì)漏檢，所以在使用 HPLC法時(shí)應(yīng)充分重視梯度洗脫及波長(zhǎng)選擇。

2 TLC 法

     TLC 法屬于半定量方法，所用儀器簡(jiǎn)單且價(jià)格較低。試驗(yàn)時(shí)要求 3 個(gè)展開系統(tǒng)，顯色靈敏度要達(dá)到檢測(cè)量的 0.1%～0.2%。此項(xiàng)技術(shù)易于操作并且可方便地在微克水平進(jìn)行試驗(yàn)。該方法可分離立體異構(gòu)體或者同系物等結(jié)構(gòu)相似的有關(guān)物質(zhì)。但TLC 法影響因素較多，檢驗(yàn)對(duì)照品時(shí)需有所注意，建議作為輔助測(cè)定方法。

3 DSC 法

     DSC 法是一種簡(jiǎn)便、快速、可靠且試樣用量少的方法，尤其適合雜質(zhì)對(duì)照品純度的測(cè)定，如用改良過(guò)的熱分析法對(duì)病毒唑的已知雜質(zhì)進(jìn)行定性分析，結(jié)果雜質(zhì)的檢測(cè)限可以到 0.04 mg。《美國(guó)藥典》從 16 版開始至今一直將 DSC 法用于對(duì)照品的純度檢查，目前各國(guó)藥典均已收載。如用 DSC 法和熱失重法對(duì)雌二醇化學(xué)對(duì)照品的純度進(jìn)行了測(cè)定，得到兩個(gè)吸熱峰，經(jīng)計(jì)算熱失重為 3.3%，顯示分子中含有半分子結(jié)晶水并進(jìn)一步通過(guò)計(jì)算得出雌二醇對(duì)照品純度。

4  軟電離質(zhì)譜法

     軟電離質(zhì)譜的特點(diǎn)是只給出化合物的準(zhǔn)分子離子峰。如果樣品不純，就會(huì)檢出多個(gè)準(zhǔn)分子離子峰，不但確定了純度，還能明確混雜物的相對(duì)分子質(zhì)量。

5 NMR 法            

    在氫譜中如果發(fā)現(xiàn)有很多面積積分值不到 1 的小峰，就有可能是樣品中的雜質(zhì)。利用門控去偶的技術(shù)通過(guò)對(duì)碳譜的定量也能實(shí)現(xiàn)純度鑒定。此外還可以將上述多種純度測(cè)定方法相結(jié)合對(duì)結(jié)果進(jìn)行驗(yàn)證。如采用測(cè)定熔點(diǎn)、TLC 法和 HPLC 法對(duì)阿苯達(dá)唑亞砜鹽酸鹽進(jìn)行了純度測(cè)定。使用 HPLC 法時(shí)用面積歸一法計(jì)算雜質(zhì)含量，3 種方法均驗(yàn)證阿苯達(dá)唑亞砜鹽酸鹽可作為對(duì)照品使用。

五、總結(jié)
    對(duì)于組份單一、純度較高的藥物，對(duì)照品(標(biāo)準(zhǔn)品)標(biāo)定方法宜可進(jìn)行等當(dāng)量換算、精密度高、操作簡(jiǎn)便快速的容量法?？筛鶕?jù)藥物分子中所具有的官能團(tuán)及其化學(xué)性質(zhì)，選用不同的容量分析方法，但應(yīng)符合如下條件：(1)反應(yīng)按一個(gè)方向進(jìn)行完全;(2)反應(yīng)迅速，必要時(shí)可通過(guò)加熱或加入催化劑等方法提高反應(yīng)速度;(3)共存物不得干擾主藥反應(yīng)，或能用適當(dāng)方法消除;(4)確定等當(dāng)點(diǎn)的方法要簡(jiǎn)單、靈敏;(5)標(biāo)化滴定液所用基準(zhǔn)物質(zhì)易得，并符合純度高、組成恒定且與化學(xué)式符合、性質(zhì)穩(wěn)定(標(biāo)定時(shí)不發(fā)生副反應(yīng))等要求。

      如該藥物沒有可進(jìn)行等當(dāng)量換算并符合要求的容量法時(shí)，可采用反復(fù)純化的原料，色譜法確定純度后扣除有關(guān)物質(zhì)、熾灼殘?jiān)⑺趾蛽]發(fā)溶劑等后的理論含量確定為標(biāo)準(zhǔn)品含量，以此為基準(zhǔn)進(jìn)行對(duì)照品(標(biāo)準(zhǔn)品)的換代和量值傳遞。

　 用于抗生素微生物檢定法的代基準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品可參照上述方法標(biāo)定，如為多組份抗生素，其組份比例應(yīng)與擬上市產(chǎn)品組份比例一致或接近，或以其中某一組份純品為基準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品，但要注意標(biāo)準(zhǔn)品換代時(shí)量值傳遞的恒定。

　 僅用于鑒別定性的化學(xué)對(duì)照品，注重其結(jié)構(gòu)確證的研究資料，純度和含量的要求一般可適當(dāng)降低。

　 雜質(zhì)對(duì)照品，用作限度要求時(shí)，應(yīng)提供其來(lái)源(合成路線)、結(jié)構(gòu)確證的研究資料，應(yīng)具備較高的純度和含量，并提供純度和含量的的測(cè)定結(jié)果，提供質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)。