生物制品的一個(gè)共同特點(diǎn)就是存在病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)性。近年來，我國生物藥物產(chǎn)業(yè)發(fā)展迅猛，隨著新技術(shù)的發(fā)展以及越來越多的生物制品被批準(zhǔn)，使用人群不斷擴(kuò)大，對(duì)生物制品的安全性問題提出了更高要求。與此同時(shí)，國內(nèi)外關(guān)于生物制品病毒安全性控制，已經(jīng)出臺(tái)了一系列技術(shù)要求和指導(dǎo)原則。本文分析了國內(nèi)外生物制品病毒安全性控制的法規(guī)，歸納提煉了可能的生物制品病毒安全性控制核心理念，可為技術(shù)法規(guī)的建立和生物制品質(zhì)量控制提供參考。生物制品病毒污染的安全性只有通過貫徹病毒安全性控制理念，采取綜合措施，才能得到確切的保障。
生物制品多來源于活的生物體，如微生物、人和動(dòng)物源性組織、細(xì)胞、體液及重組細(xì)胞系等，且制備過程可能添加其他來源于動(dòng)物組織的原輔材料。此外，與化學(xué)藥物相比，生物制品的制備過程具有其特殊性，通常不能采用苛刻的終端理化處理，安全性控制也就成為生物制品質(zhì)量控制中面臨的挑戰(zhàn)，尤其是外源病毒因子的污染對(duì)生物制品帶來的潛在安全性風(fēng)險(xiǎn)，成為生物制品產(chǎn)品質(zhì)量控制的關(guān)鍵要素之一。隨著越來越多的生物制品被批準(zhǔn)，使用人群也不斷擴(kuò)大，原材料的病毒安全性控制及工藝驗(yàn)證還存在著較大改善空間［1－2］。另外，隨著新技術(shù)的發(fā)展，越來越多的生產(chǎn)系統(tǒng)被使用，越來越多的外源因子被識(shí)別，越來越多的新型生物制品不斷出現(xiàn)，對(duì)生物制品的病毒安全性問題提出了更高要求。目前，國際上歐美日藥典對(duì)生物制品病毒安全性均具有相關(guān)技術(shù)要求，我國藥典尚無專門針對(duì)病毒性安全控制的通則要求，起草相應(yīng)的技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)和要求也十分必要。伴隨著我國生物制藥自主創(chuàng)新能力的提高，以及《關(guān)于深化審評(píng)審批制度改革鼓勵(lì)藥品醫(yī)療器械創(chuàng)新的意見》等政策的出臺(tái)，生物制品注冊臨床、申請(qǐng)上市以及上市后病毒安全性控制評(píng)估的需求也日益增加［3］。生物制品的一個(gè)共同特點(diǎn)就是存在病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)性，歷史上有多起生物制品制備過程中病毒污染的報(bào)道［4－5］，主要為疫苗、血液和血漿制品［6］。這種污染不僅可能導(dǎo)致產(chǎn)品安全性風(fēng)險(xiǎn)，在臨床上產(chǎn)生嚴(yán)重后果，還可能對(duì)生物制品的生產(chǎn)過程、環(huán)境和操作者帶來安全風(fēng)險(xiǎn)。因此，建立生物制品病毒安全性控制的技術(shù)要求對(duì)于保證藥品的安全性和有效性具有重要的意義。近年來，基于生物技術(shù)領(lǐng)域的發(fā)展及上市后生物制品安全性實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)，在生物制品病毒安全性的認(rèn)知方面引入了一些新的技術(shù)和理念，包括風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估及全過程控制［7－11］、全生命周期管理及分階段要求［8，12］、質(zhì)量源于設(shè)計(jì)及其實(shí)施路線［9－13］、通用制備工藝病毒清除驗(yàn)證［14］、模塊化工藝步驟病毒驗(yàn)證［14－17］、病毒樣顆粒( VLP) 替代病毒［18－19］等。基于這些技術(shù)、經(jīng)驗(yàn)及理念，對(duì)于生物制品病毒安全性控制的認(rèn)識(shí)，包括病毒污染源控制、制備過程中的產(chǎn)品測試以及病毒清除驗(yàn)證評(píng)估有了進(jìn)一步的提升，并產(chǎn)生了一些更具優(yōu)勢的檢測/評(píng)估方法［20］。在風(fēng)險(xiǎn)減輕方面，包括從源頭上減少和避免病毒污染［21］、化學(xué)材料替代生物材料均體現(xiàn)了在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，最大限度地降低風(fēng)險(xiǎn)?；谝陨闲碌募夹g(shù)發(fā)展和認(rèn)識(shí)理念的更新，加快推動(dòng)了生物制品病毒安全性控制原則的研究和建立。此外，隨著原國家食品藥品監(jiān)督管理總局( CFDA)2017 年6 月19 日宣布正式加入ICH，意味著中國藥品監(jiān)管、技術(shù)規(guī)范等相關(guān)領(lǐng)域逐漸進(jìn)入全球化的協(xié)調(diào)統(tǒng)一過程中。在ICH 發(fā)布的70 多個(gè)指導(dǎo)原則中，包含生物制品病毒安全性相關(guān)內(nèi)容［22］。對(duì)于國際標(biāo)準(zhǔn)和技術(shù)要求的轉(zhuǎn)化及實(shí)施，以及積極參與規(guī)則的制定，從另一個(gè)角度促進(jìn)了生物制品病毒安全性控制技術(shù)要求的建立。基于以上背景，對(duì)于生物制品病毒安全性控制原則的建立首先需要探索和確定核心理念，隨后以核心理念科學(xué)地指導(dǎo)該原則的起草，同時(shí)，核心理念也有助于生物制品質(zhì)量控制策略的制定。1 國內(nèi)外生物制品病毒安全性法規(guī)現(xiàn)狀目前國際上關(guān)于生物制品病毒安全性控制已經(jīng)出臺(tái)了一系列技術(shù)要求和指導(dǎo)原則，主要包括ICHQ5A( 生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全性評(píng)價(jià)) 、日本藥典( JP17: 所列生物技術(shù)/生物制品病毒安全的基本要求) 、美國藥典( USP41 1050: 人源或動(dòng)物源細(xì)胞系制備的生物技術(shù)產(chǎn)品的病毒安全性評(píng)價(jià)，等同采用ICH Q5A) 、人用單克隆抗體制品制造和測試考慮要點(diǎn)( FDA) 、歐洲藥品管理局( EMEA，臨床試驗(yàn)用生物技術(shù)藥物病毒安全性評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則、除病毒工藝驗(yàn)證指導(dǎo)原則) 、歐洲藥典( EP 9． 0: 5． 1． 7 病毒安全性通則) 、世界衛(wèi)生組織( WHO，動(dòng)物細(xì)胞作為生物制品生產(chǎn)的基質(zhì)的建議及細(xì)胞庫的鑒定、上市疫苗中發(fā)現(xiàn)外源因子的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估指導(dǎo)原則) 等。各國技術(shù)要求或指導(dǎo)原則均具有其科學(xué)性、規(guī)范性及嚴(yán)謹(jǐn)性，但各自的適用范圍不完全一致，且均未涵蓋所有相關(guān)生物制品［22 － 23］。國內(nèi)方面，2002 年CFDA 發(fā)布的“血液制品去除/滅活病毒技術(shù)方法及驗(yàn)證指導(dǎo)原則”、2005 年CFDA 藥品審評(píng)中心( CDE) 頒布的“生物組織提取制品和真核細(xì)胞表達(dá)制品的病毒安全性評(píng)價(jià)技術(shù)審評(píng)一般原則”［2， 24］，現(xiàn)行版《中華人民共和國藥典》對(duì)于生物制品尚無系統(tǒng)、通用的病毒安全性控制技術(shù)要求和原則。目前，國際上ICH Q5A 對(duì)于細(xì)胞系來源的重組生物制品指導(dǎo)原則的理念具有一定的代表性，USP也采用一致的理念進(jìn)行相關(guān)制品的病毒安全性控制。JP 在其基礎(chǔ)上，將品種范圍拓展到源自哺乳動(dòng)物等的生物組織和體液( 尿、血液等) 的產(chǎn)品。由此可見，涉及不同類別的生物制品，在核心理念上可能具有相似性。以下將從ICHQ5A 和JP 以及其他技術(shù)要求法規(guī)和指導(dǎo)原則中，歸納提煉可能的生物制品病毒安全性控制核心理念。生物制品病毒污染的安全性控制，只有通過貫徹病毒安全性控制理念，采取綜合措施［27］，才能得到確切的保障。2.1 ICH Q5A/USP 1050 核心理念來源于人或動(dòng)物細(xì)胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品的一個(gè)共同特點(diǎn)是存在病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)性，這種污染在臨床上可產(chǎn)生嚴(yán)重的后果。污染可來自原細(xì)胞系( 細(xì)胞基質(zhì)) 本身，也可來自生產(chǎn)過程中偶然帶入的外源病毒。對(duì)于潛在的病毒污染源，首先應(yīng)根據(jù)可能的污染風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。通過風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，可以達(dá)到早期預(yù)防、早期發(fā)現(xiàn)及采取措施的目的。在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，控制生物技術(shù)產(chǎn)品的潛在病毒污染，主要依靠3 條互補(bǔ)的原則，即對(duì)于細(xì)胞系和其他原材料的來源控制、生產(chǎn)過程中適當(dāng)步驟產(chǎn)品的測試以及對(duì)病毒清除工藝的評(píng)估［22， 28］。總體來說， ICH Q5A/USP 1050 的核心理念主要體現(xiàn)如下。2.1.1風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估不同類型的生物制品在來源、潛在污染病毒的特性、制備工藝等方面的不同，導(dǎo)致其病毒安全性風(fēng)險(xiǎn)大小存在差異，對(duì)于潛在的病毒污染源和可能的污染途徑進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)剖析及評(píng)估，找出風(fēng)險(xiǎn)點(diǎn)，以便根據(jù)評(píng)估結(jié)果實(shí)施病毒安全性控制策略( 見圖1) 。通過風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)價(jià)以及相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)降低措施實(shí)施，呈現(xiàn)了風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的理念。
根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的結(jié)果，病毒污染的源頭控制是一個(gè)關(guān)鍵點(diǎn)，如何從源頭上進(jìn)行污染的把控事關(guān)病毒安全性控制的成敗。ICH Q5A 對(duì)于病毒污染的來源進(jìn)行了逐層把控，特別體現(xiàn)在細(xì)胞基質(zhì)的控制上( 見圖2) 。2.1.3 生產(chǎn)過程產(chǎn)品檢測在病毒污染的源頭控制上，已經(jīng)設(shè)置了一道防線。同時(shí)，為了進(jìn)一步確保病毒安全性，在生產(chǎn)過程中適當(dāng)階段進(jìn)行產(chǎn)品測試，能支撐起病毒安全性的第二道防線。病毒污染檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性與污染來源、污染病毒的特性、生產(chǎn)工藝步驟等密切相關(guān)，應(yīng)綜合各因素對(duì)生產(chǎn)過程中最適階段的產(chǎn)品( 未加工粗品或成品等) 進(jìn)行檢測( 見圖3) 。在病毒污染的源頭控制及早期發(fā)現(xiàn)上已經(jīng)架起了2 道防線，通過病毒清除工藝評(píng)估可以形成另一道確保病毒安全性的底線( 見圖4) 。雖然對(duì)于其他病毒( 廣泛的非特異模型病毒) 清除研究目的是確認(rèn)工藝清除病毒的可靠性，無特定的清除值的要求，病毒清除工藝驗(yàn)證目的仍然具有典型的2 層含義: 對(duì)于已存在/可能存在的病毒( 相關(guān)病毒、特異模型病毒) 可被清除( 達(dá)到一定的要求) ; 為未知病毒安全性提供一定程度的保證。
ICH Q5A/USP 病毒安全性控制的范圍僅限于來源于人或動(dòng)物細(xì)胞系的生物技術(shù)產(chǎn)品，對(duì)于其他分類的生物制品未有涉及，其核心理念是否滿足更廣泛的生物制品，可以從JP 的要求中窺見一斑［29］。JP 所列生物技術(shù)/生物制品包括源自哺乳動(dòng)物等的生物組織和體液( 尿、血液等) 的產(chǎn)品。源自人或動(dòng)物源細(xì)胞系的蛋白質(zhì)藥物( 如重組DNA 藥物、細(xì)胞培養(yǎng)藥物) 也包括在內(nèi)。適用范圍雖然擴(kuò)展到人/動(dòng)物組織體液制品，其控制理念仍舊可以歸納為: 在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，進(jìn)行原材料/基質(zhì)的來源控制、生產(chǎn)過程中適當(dāng)階段產(chǎn)品測試( 包括純化前、中間材料以及成品階段) 及病毒清除工藝評(píng)估。和ICH Q5A 相比，其在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、來源控制以及生產(chǎn)過程產(chǎn)品檢測方面進(jìn)行了拓展和豐富( 見圖5) 。
通過核心理念提取，重新對(duì)于ICH Q5A 及JP17 進(jìn)行框架比對(duì)，確認(rèn)整體理念具有一致性，法規(guī)要求框架也具有一定的相似性，具體見表1。ICH Q5A 提取歸納的核心理念，在JP 中擴(kuò)展到人/動(dòng)物組織體液制品中也具有其適用性。將初步歸納的核心理念拓展到多個(gè)技術(shù)要求指導(dǎo)原則，再次評(píng)估其適用性。結(jié)果顯示初步歸納的核心理念具有廣泛的適用性。評(píng)估結(jié)果見圖6。
綜合生物制品病毒安全性控制主要的法規(guī)要求，病毒安全性控制的核心理念可以歸納提煉為在風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，進(jìn)行來源控制、生產(chǎn)過程中產(chǎn)品檢測及病毒清除工藝評(píng)估。該理念具有廣泛的生物制品品種適用性。依據(jù)核心理念進(jìn)行生物制品病毒安全性控制，可以為制品的病毒安全性架起多道防線，最終確保生物制品的病毒安全性底線。另外，強(qiáng)調(diào)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的重要性，也是針對(duì)生物制品不同品種品類的病毒安全性，采取不同的具體措施來架設(shè)防線，做到安全和資源的平衡。在生物制品病毒安全性控制核心理念歸納提取的過程中，對(duì)國內(nèi)外生物制品病毒安全性控制的技術(shù)要求/指導(dǎo)原則進(jìn)行了比對(duì)，并對(duì)國內(nèi)生物制品病毒安全性控制的現(xiàn)狀進(jìn)行了調(diào)查。綜合分析，可以發(fā)現(xiàn)國內(nèi)外生物制品病毒安全性控制法規(guī)/指導(dǎo)原則以及國內(nèi)生物制品病毒安全性控制現(xiàn)狀呈現(xiàn)出一些特點(diǎn)。國外可參考的各技術(shù)要求和指導(dǎo)原則雖然具有較高的科學(xué)性、規(guī)范性及嚴(yán)謹(jǐn)性，但各個(gè)原則適用范圍不一，且一般范圍較小，即使相對(duì)范圍較寬的JP，也未將血液制品和疫苗納入其中，對(duì)層出不窮的新型生物制品品類更顯現(xiàn)出一定的局限。另外，在內(nèi)容編排上也未能很好地順應(yīng)指南性文件文風(fēng)改革方向: 開門見山、言簡意賅［25］，篇章略顯龐雜，核心理念不突出。對(duì)于擴(kuò)大范圍的生物制品，缺少明確統(tǒng)一的參考指南，也為我國制定全面的生物制品病毒安全性控制原則提出了挑戰(zhàn)。3.2 國內(nèi)指導(dǎo)原則相對(duì)不足國內(nèi)尚無生物制品病毒安全性控制藥典通則要求，國內(nèi)指導(dǎo)原則已經(jīng)漸漸不能滿足生物制品快速發(fā)展的需求，部分指導(dǎo)原則的理念和內(nèi)容的細(xì)節(jié)方面漸顯落后。對(duì)于疫苗、抗血清、基因治療產(chǎn)品等品種無相應(yīng)的品類特異性的病毒安全性控制原則。3.3 個(gè)別品種特定病毒清除工藝步驟相對(duì)落后國內(nèi)個(gè)別生物制品品種特定病毒清除工藝步驟相對(duì)落后，早期上市對(duì)于病毒安全性控制( 除病毒工藝驗(yàn)證) 重視不足，無滿足除病毒工藝驗(yàn)證相關(guān)的工藝步驟，提高標(biāo)準(zhǔn)后可能造成一定急需產(chǎn)品供應(yīng)問題。特別是對(duì)于經(jīng)長期臨床應(yīng)用安全性可控的急需品種，如抗血清制品、疫苗產(chǎn)品等。3.4 病毒檢測和驗(yàn)證的行業(yè)經(jīng)驗(yàn)及基礎(chǔ)相對(duì)薄弱，且國內(nèi)外標(biāo)準(zhǔn)不一
由于國內(nèi)在病毒安全性控制方面的指導(dǎo)原則相對(duì)較少，我國藥典也沒有明確的要求，所以相關(guān)的技術(shù)方法、手段等的普及程度、成熟度較低，鑒于藥典在我國醫(yī)藥行業(yè)的法定權(quán)威地位，如何利用生物制品病毒安全性核心理念，結(jié)合我國現(xiàn)狀，做到既能夠推動(dòng)行業(yè)發(fā)展，保持相應(yīng)的水準(zhǔn)，又能夠保證控制要求具有可行性，保證生效后各項(xiàng)規(guī)定落地，是一個(gè)難點(diǎn)。
另外，關(guān)于清除病毒驗(yàn)證的相關(guān)具體要求，國內(nèi)和國外主流要求在個(gè)別方面不統(tǒng)一，如驗(yàn)證的批次要求、實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性要求等［1，22，24，26］。
雖然國內(nèi)法規(guī)之間以及各國家/地區(qū)法規(guī)之間存在細(xì)節(jié)要求的不統(tǒng)一情況，但在核心理念上，經(jīng)過系統(tǒng)分析，各法規(guī)/指導(dǎo)原則具有一致性。另外，ICH 也已經(jīng)成立非正式質(zhì)量討論組( IQDG) ，評(píng)估對(duì)ICH 質(zhì)量指南的補(bǔ)充和修訂，并討論將ICH 理念擴(kuò)展到新的治療方式，1999 年9 月實(shí)施的ICH Q5A( Ｒ1) 就作為優(yōu)先修訂的指南，不但涉及ICH Q5A中相關(guān)的方法技術(shù)類更新( 病毒檢測/定量技術(shù)以驗(yàn)證方法等) ，還將考慮擴(kuò)大指南理念應(yīng)用范圍，覆蓋新的生物技術(shù)產(chǎn)品，包括病毒樣顆粒和病毒載體顆粒。這也說明了不同品類的生物制品應(yīng)具有病毒安全性控制理念的一致性，為我國制定生物制品病毒安全性控制原則的統(tǒng)一理念要求提供了理論和現(xiàn)實(shí)基礎(chǔ)。最終，本文分析了國內(nèi)外生物制品病毒安全性控制的法規(guī)，歸納提煉了生物制品病毒安全性控制核心理念，以期為業(yè)界提供參考，并為技術(shù)法規(guī)的建立和生物制品的質(zhì)量控制提供支持。生物制品病毒污染的安全性，只有通過貫徹病毒安全性控制理念，采取綜合措施，才能得到確切的保障。
內(nèi)容來源｜中國新藥雜志 2020.12
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