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摘要  目的：建立HPLC法測(cè)定不同廠家不同制備工藝的氯雷他定口崩片的有關(guān)物質(zhì)及含量。方法：采用ZORBAXEclipse plus-C18 (4.6 mm×250 mm，5μm）色譜柱；以磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鉀2.28g，加水800mL使溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至6.0，再加水至1000mL）-甲醇（20:80）為流動(dòng)相；流速為1.0mL·min-1；檢測(cè)波長(zhǎng)為247nm；進(jìn)樣量20µL。結(jié)果：氯雷他定峰與其他雜質(zhì)峰均可達(dá)到完全分離，檢測(cè)限為39.2μg·g-1；氯雷他定濃度為0.4096～1024μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（r=1.0000）；平均回收率為99.9%，RSD為0.7%（n=9）；3根不同型號(hào)的色譜柱在3臺(tái)不同型號(hào)的高效液相色譜儀上測(cè)定7批樣品，含量測(cè)定結(jié)果分別為99.1%（RSD=0.5%）, 95.7%（RSD=0.4%）, 99.7%（RSD=0.4%）,102.4%（RSD=0.5%）, 101.0%（RSD=0.7%）, 99.9%（RSD=0.6%）, 101.0%（RSD=0.7%）。結(jié)論：建立的方法靈敏度高、專(zhuān)屬性強(qiáng)、簡(jiǎn)便快捷、適用性廣，可用于不同制備工藝的氯雷他定口崩片的有關(guān)物質(zhì)檢查及含量測(cè)定。

 

關(guān)鍵詞：氯雷他定口崩片；高效液相測(cè)定法；有關(guān)物質(zhì)；含量測(cè)定；質(zhì)量控制

 

中圖分類(lèi)號(hào)：921.2  文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A  文章編號(hào)：1009-3656（2019）

 

氯雷他定為抗組胺類(lèi)藥，用于治療季節(jié)性過(guò)敏性鼻炎及特發(fā)性蕁麻疹，還可用于治療慢性蕁麻疹等[1]?？诒榔侵冈诳谇粌?nèi)不需要用水即能迅速崩解或溶解的片劑，一般適合于小劑量原料藥物，常用于吞咽困難或不配合服藥的患者?？刹捎弥苯訅浩ê屠鋬龈稍锓ㄖ苽鋄2]。由于口崩片有兩種不同的制備工藝，多數(shù)品種都沒(méi)有統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，不同廠家使用不同的企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，《中華人民共和國(guó)藥典》2015年版首次收載口崩片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)且品種僅有2個(gè)，因此，口崩片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)亟待統(tǒng)一和提高。經(jīng)查閱文獻(xiàn)，報(bào)道較多的是氯雷他定原料藥及片劑[3-5]，氯雷他定口崩片的報(bào)道較少[6-7]，由于氯雷他定口崩片不同的制備工藝，各企業(yè)分別使用不同的國(guó)家注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn)，沒(méi)有統(tǒng)一的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，僅有一篇文獻(xiàn)對(duì)氯雷他定口崩片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行研究[8]，但制備工藝為直接壓片法。未查閱到關(guān)于冷凍干燥法制備的氯雷他定口崩片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)相關(guān)研究。冷凍干燥法的工藝是將配制好的藥液灌注在成型的泡罩中，灌注藥液的泡罩隨傳送帶通過(guò)液氮隧道迅速冷凍成型，與傳統(tǒng)的直接壓片法制備工藝不同，性狀也與普通片劑不同，為疏松的不規(guī)則圓形片。本實(shí)驗(yàn)收集了三個(gè)廠家包含了兩種制備工藝的氯雷他定口崩片進(jìn)行研究，建立了可用于不同制備工藝的氯雷他定口崩片的有關(guān)物質(zhì)檢查及含量測(cè)定的HPLC法，為統(tǒng)一該品種的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考。

 

1、 儀器與試劑

 

1.1 儀器

 

Thermo Scientific U3000 液相色譜儀，配備DAD檢測(cè)器；Mettler Toledo XS205DU 電子天平；梅特勒-托利多S40酸度計(jì)；Millipore 超純水儀；

 

1.2試藥

 

氯雷他定對(duì)照品（中國(guó)食品藥品檢定研究院，批號(hào)：100615-201404 純度：100.0%）、氯雷他定口崩片（規(guī)格為10mg）（由三個(gè)不同廠家提供。批號(hào)1807023、1807024、1807025為冷凍干燥法制備工藝；批號(hào)180802、171003、180602、180603為直接壓片法制備工藝）；甲醇為色譜純；水為超純水；其他試劑為分析純。

 

2、 方法與結(jié)果

 

2.1色譜條件

 

色譜柱：ZORBAXEclipse plus-C18 (4.6 mm×250 mm，5μm）；流動(dòng)相：磷酸鹽緩沖液（取磷酸氫二鉀2.28g，加水800mL使溶解，用磷酸調(diào)節(jié)pH值至6.0，再加水至1000mL）-甲醇（20:80）；流速1.0mL·min-1 ；檢測(cè)波長(zhǎng)247nm；進(jìn)樣量20µ0。

 

2.2溶液的制備

 

2.2.1含量測(cè)定用溶液  取本品10片，分別置50mL量瓶中，加水2mL分散崩解后，加流動(dòng)相40mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，以每12000r·min-1率離心5min，取上清液，作為供試品溶液；取氯雷他定對(duì)照品適量，精密稱(chēng)定，加流動(dòng)相溶解并稀釋制成每1mL中約含氯雷他定0.2mg的溶液，搖勻，作為對(duì)照品溶液。

 

2.2.2有關(guān)物質(zhì)檢查用溶液  取本品5片，置200mL量瓶中，加水10mL分散崩解后，加流動(dòng)相160mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，以12000 r·min-1速率離心5min，取上清液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液1mL，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為有關(guān)物質(zhì)對(duì)照溶液；精密量取對(duì)照溶液1mL，置20mL量瓶中，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，作為靈敏度溶液。

 

2.3系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

 

    取“2.2.2”項(xiàng)下的有關(guān)物質(zhì)供試品溶液20µ0，按“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，氯雷他定峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度良好，見(jiàn)圖1。

t/min

圖1 系統(tǒng)適用性色譜圖

 

2.4專(zhuān)屬性試驗(yàn)

 

取批號(hào)180602的氯雷他定口崩片5份（每份各5片），分別置200mL量瓶中。（1）酸破壞：加入1mol·L-1的鹽酸溶液10mL，放置5h，加入1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液10mL，加流動(dòng)相150mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，離心5min（12000 r·min-1），取上清液；（2）堿破壞：加水5mL分散崩解后（樣品在1mol·L-1的氫氧化鈉中不分散崩解），加入1 mol·L-1的氫氧化鈉溶液5mL，放置5h，加入1 mol·L-1的鹽酸溶液5mL，加流動(dòng)相150mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，離心5min（12000 r·min-1），取上清液；（3）光照破壞：加水10mL分散崩解后，紫外光照射5h，加流動(dòng)相150mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，離心5min（12000 r·min-1），取上清液；（4）熱破壞：加水10mL分散崩解后，80℃加熱5h，放冷，加流動(dòng)相150mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，離心5min（12000 r·min-1），取上清液；（5）氧化破壞：加水8mL，再加入過(guò)氧化氫溶液（15%）2mL，放置5h，加流動(dòng)相150mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，離心5min（12000 r·min-1），取上清液。取上述溶液，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)圖2。實(shí)驗(yàn)表明，氯雷他定峰與其相鄰雜質(zhì)峰均能達(dá)到完全分離，方法的專(zhuān)屬性良好。

 

酸破壞（destroyed by acid）

A/mAU

t/min

 

 

 

堿破壞（destroyed by aklaline）

A/mAU

光照破壞（destroyed by light）

A/mAU

  t/min                                     

 

熱破壞（destroyed by high temperature）

A/mAU

 t/min                                      

 

氧化破壞（destroyed by oxidation）

A/mAU

t/min

 

圖2 專(zhuān)屬性試驗(yàn)色譜圖

2.5線性范圍

 

精密稱(chēng)取氯雷他定對(duì)照品0.2048g，置20mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為氯雷他定線性儲(chǔ)備液；精密量取線性儲(chǔ)備液適量，用流動(dòng)相稀釋成含氯雷他定的濃度為0.4096，2.048，20.48，204.8，1024μ02mL-1的系列濃度溶液。按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，記錄峰面積。以峰面積（Y）為縱坐標(biāo)，以濃度（X，μg·mL-1）為橫坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸，線性方程為:

 

Y=0.3857X-0.4273 r=1.000 0

 

結(jié)果表明，氯雷他定在0.4096～1024μg/mL-1的濃度范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好。

 

2.6精密度試驗(yàn)

 

    取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品溶液按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件連續(xù)進(jìn)樣6次，記錄氯雷他定峰面積，RSD為0.3%（n=6），表明儀器精密度良好。

 

2.7重復(fù)性試驗(yàn)

 

    取批號(hào)180602的氯雷他定口崩片1片（6×10份），分別置50mL量瓶中，加水2mL分散后，加流動(dòng)相40mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，過(guò)濾，取續(xù)濾液，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果的RSD為0.8%，表明方法重復(fù)性良好。

 

2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

 

取氯雷他定對(duì)照品和三個(gè)廠家的樣品，按照“2.2.1”項(xiàng)下方法配制對(duì)照品溶液和供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件進(jìn)行測(cè)定，在室溫放置0、1、3、5、8、12、16、20、24h后峰面積的變化，計(jì)算RSD值，對(duì)照品溶液主峰面積的RSD值為0.5%，三個(gè)廠家的供試品溶液主峰面積的RSD分別為0.5%、0.6%和0.6%，結(jié)果表明對(duì)照品溶液和供試品溶液24h內(nèi)穩(wěn)定。

 

2.9回收率試驗(yàn)

 

取氯雷他定對(duì)照品約100mg，精密稱(chēng)定，置100mL量瓶中，加流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為加標(biāo)對(duì)照品溶液；取三個(gè)廠家批號(hào)分別為1807023、180802和180602樣品各1片（9份），分別置于100mL量瓶中，加水4mL分散后，各分別加入加標(biāo)對(duì)照品8、10和12mL，各3份，加流動(dòng)相70mL，超聲10min使溶解，放冷，加流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，以12000r·min-1速率離心5min，取上清液。按照“2.1”項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定，以外標(biāo)法計(jì)算平均回收率，上述三個(gè)廠家的平均回收率分別為99.8%（RSD=0.8%）、99.9（RSD=0.6%）和99.3（RSD=0.8%）。

 

2.10檢測(cè)限與定量限

 

    精密量取“2.2.1”項(xiàng)下的對(duì)照品適量，用流動(dòng)相逐級(jí)稀釋成系列濃度，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。以信噪比S/N=3:1計(jì)算檢測(cè)限，以信噪比S/N=10:1計(jì)算定量限。檢測(cè)限為0.02μg·mL-1，定量限為0.05μg·mL-1。

 

2.11耐用性

 

2.11.1色譜條件耐用性  取“2.2.2”項(xiàng)下的供試品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件，分別考察了流動(dòng)相比例，流速，柱溫，緩沖液pH值變化，氯雷他定峰的理論板數(shù)均符合規(guī)定，氯雷他定峰與相鄰雜質(zhì)峰的分離度均符合規(guī)定。

 

2.11.2色譜柱及儀器耐用性  取“2.2”項(xiàng)下的各溶液，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件，選用3根不同型號(hào)的色譜柱在3臺(tái)不同型號(hào)的高效液相色譜儀上測(cè)定7批樣品，含量測(cè)定結(jié)果及有關(guān)物質(zhì)檢查結(jié)果見(jiàn)表1，結(jié)果基本一致，方法耐用性良好。

 

表1 樣品測(cè)定結(jié)果

		含量測(cè)定		有關(guān)物質(zhì)
廠家	批號(hào)	儀器	含量/%	A+2.2S	單雜/%	總雜/%
1	1807023	1	98.7	4.7	0.04	0.04
		2	99.2	2.3	0.06	0.06
		3	99.6	2.1	0.04	0.05
	1807024	1	95.2	10	0.04	0.04
		2	95.8	9.7	0.06	0.06
		3	96	9.4	0.04	0.04
	1807025	1	99.4	5.1	0.06	0.06
		2	99.5	4.1	0.09	0.09
		3	100.1	4	0.07	0.07
2	180802	1	101.9	5.1	0.23	0.38
		2	102.6	7.4	0.28	0.35
		3	102.8	7.7	0.23	0.34
3	171003	1	101.7	5.3	0.13	0.26
		2	100.4	3.6	0.19	0.27
		3	100.8	3.9	0.15	0.25
	180602	1	100.6	8.6	0.18	0.27
		2	99.5	8.2	0.22	0.29
		3	99.7	8.3	0.17	0.27
	180603	1	101.6	8.8	0.19	0.25
		2	100.3	7.8	0.23	0.3
		3	101.1	8.9	0.2	0.26

 

注：

1:Waters 2695（Kromasil100-5C18）(4.6 mm×250 mm，5μm）（pH1.5-9.5）

2：Agilent 1260(ZORBAX Eclipse plus-C18 (4.6mm×250 mm，5μm）（pH2-9）

3：戴安U3000（X Bridge C18）(4.6mm×250 mm，5μm）（pH1-12）

 

2.12樣品的測(cè)定

 

2.12.1含量測(cè)定   精密量取“2.2.1”項(xiàng)下的供試品溶液和對(duì)照品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖。按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算每片含量，并求得10片的平均含量。結(jié)果見(jiàn)表1

 

2.12.2有關(guān)物質(zhì)檢查  精密量取“2.2.2”項(xiàng)下的供試品溶液和對(duì)照品溶液，按照“2.1”項(xiàng)下的色譜條件測(cè)定，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的3倍，除輔料峰外，計(jì)算單個(gè)雜質(zhì)和總雜質(zhì)，結(jié)果見(jiàn)表1。

 

3 、討論

 

3.1供試品溶液的配制

 

由于口崩片有直接壓片和冷凍干燥兩種制備工藝，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)，直接壓片法制備的氯雷他定口崩片在流動(dòng)相中可分散，冷凍干燥法制備的氯雷他定口崩片在流動(dòng)相中不可分散，在水中迅速分散，為使供試品溶液的配制方法適用于兩種制備工藝的提取，需先加少量的水進(jìn)行分散后再進(jìn)行提取，此方法同時(shí)適用于其他品種的口崩片。

 

3.2含量測(cè)定方法的選擇

 

口崩片一般適用于小劑量原料藥物，一般需要進(jìn)行含量均勻度考察，同時(shí)，冷凍干燥法制備的口崩片的性狀不同于壓片法制備的口崩片，無(wú)法研成粉末，因此一般的稱(chēng)取粉末后提取的方法不適用于冷凍干燥法制備的口崩片，無(wú)法同時(shí)適用于兩種制備工藝的口崩片的含量測(cè)定。本實(shí)驗(yàn)采取1片（10份）先加少量水分散后提取，計(jì)算每片的含量，并求得10片的平均含量作為含量測(cè)定結(jié)果，同時(shí)以每片的含量計(jì)算含量均勻度。此方法適用性廣，經(jīng)濟(jì)簡(jiǎn)便，可同時(shí)為其他品種的口崩片提供參考。

 

3.3 小結(jié)

 

本方法靈敏度高、專(zhuān)屬性強(qiáng)、簡(jiǎn)便快捷、適用性廣，可用于直接壓片法和冷凍干燥法制備的氯雷他定口崩片的有關(guān)物質(zhì)檢查和含量測(cè)定，可作為本品種的質(zhì)量控制方法。

 

參考文獻(xiàn)

[1] 馬堅(jiān)池，盧秀儀，唐增奇. 氯雷他定質(zhì)量慢性蕁麻疹的有效性分析與評(píng)定[J]. 現(xiàn)代診斷與治療，2017，28（14）：2567

[2]中華人民共和國(guó)藥典2015年版. 四部[S]. 2015:3

[3] 唐立超，郭偉斌，鄭淑鳳，等. HPLC測(cè)定氯雷他定的含量及其有關(guān)物質(zhì)[J].中國(guó)現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2014,31（8）：994

[4] 康軍，張鶴. HPLC法測(cè)定氯雷他定片的含量[J].中國(guó)醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2011,8（4）：56

[5] 崔京，黃健，霍立茹，等. 氯雷他定片含量及有關(guān)物質(zhì)的HPLC測(cè)定[J]. 中國(guó)醫(yī)藥工業(yè)雜志，2002,33（6）：294

[6] 官清，廉江平，扈本荃，等. 氯雷他定口崩片的人體生物等效性研究[J]. 西北藥學(xué)雜志，2012,27（5）:461

[7] 劉文玲，王學(xué)應(yīng)，黃桂華. 氯雷他定口崩片的制備及初步穩(wěn)定性考察[J]. 齊魯藥事，2010,29（2）：108

[8] 李寅，林岱，孫數(shù)周，等. 氯雷他定口崩片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J]. 現(xiàn)代食品與藥品雜志，2007,17（4）：68