中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

1. 介紹

 

雜質(zhì)根據(jù)其來(lái)源可分為加工、降解或外來(lái)雜質(zhì)（污染或外來(lái)雜 質(zhì)）。外來(lái)雜質(zhì)是有機(jī)或無(wú)機(jī)的化學(xué)實(shí)體，在加工、儲(chǔ)存或交付 過(guò)程中被引入原料藥或制劑中[1]。 與合成的、降解的或賦形劑相 關(guān)的雜質(zhì)相比，外來(lái)雜質(zhì)可以代表多種化學(xué)結(jié)構(gòu)和化合物類別， 并且可以以廣泛變化的濃度存在[2–5]。在更廣泛的外來(lái)雜質(zhì)類別 中，有一部分雜質(zhì)會(huì)在接觸容器密閉或包裝系統(tǒng)中使用的材料、 臨床使用或預(yù)裝注射器中的儲(chǔ)存材料時(shí)遷移到藥品中[1,6]。這些 可萃取物/可浸出物可能會(huì)影響產(chǎn)品質(zhì)量和/或安全性，從而對(duì)患者造成風(fēng)險(xiǎn)[7,8]。這些可萃取物/浸出物的表征和控制仍然是產(chǎn)品開(kāi)發(fā) 團(tuán)隊(duì)面臨的重大挑戰(zhàn) [1,9]。要記錄所有可提取物和可浸出雜質(zhì)的報(bào)告，可提取物和可浸出物安全信息交換 (ELSIE) 成立于 2007 年，該數(shù)據(jù)庫(kù)包含迄今為止報(bào)告的 477 種此 類可提取物/可浸出物的信息[10]. 國(guó)際人用藥物技術(shù)要求協(xié)調(diào)委員 會(huì) (ICH) 還發(fā)布了題為“雜質(zhì)：藥物和生物制品可提取物和可浸出物 的評(píng)估和控制”的 Q3E 指南[11] 用于跟蹤此類雜質(zhì)。

 

有幾項(xiàng)研究詳細(xì)說(shuō)明了從容器密閉/輸送系統(tǒng)、醫(yī)療器械和其他組件（例如用于加工、儲(chǔ)存和/或輸送藥物的預(yù)裝注射器、墊圈、塞子 和塑料儲(chǔ)存袋）中提取和可浸出雜質(zhì)的結(jié)果 [1–5,12–14]. 最近，預(yù)充式注射器作為藥物輸送系統(tǒng)獲得了廣泛的認(rèn)可，據(jù)報(bào)道，這些預(yù)充式注射器中的許多潛在可萃取物/可浸出物[1,12,13]。一次性塑 料注射器正被廣泛用于藥物分析實(shí)驗(yàn)室，目前的研究是為了鑒定來(lái)自內(nèi)部發(fā)現(xiàn)化合物的藥物產(chǎn)品方法開(kāi)發(fā)過(guò)程中用于樣品過(guò)濾的注射器的雜質(zhì)。據(jù)觀察，相對(duì)保留時(shí)間 (RRT) 0.96 處的雜質(zhì)峰面積百分比是與 100 mg 片劑相比，12.5 mg 強(qiáng)度片劑的含量顯著更高（表 S1）。

 

 

這兩種制劑的樣品制備（提取、超聲和過(guò)濾后）的主要區(qū)別在于稀釋，即 100 mg 規(guī)格的片劑包括 10 倍稀釋，而 12.5 mg 規(guī)格的片劑溶液直接注入高效液相色譜 (HPLC)無(wú)需稀釋。因此， 進(jìn)行了詳細(xì)調(diào)查以確定該雜質(zhì)的來(lái)源。在稀釋劑中制備的樣品、 安慰劑通過(guò) 0.45 µm 聚四氟乙烯 (PTFE) 濾膜過(guò)濾、離心安慰劑和從注射器沖洗的稀釋劑（圖 S1）證實(shí)一次性注射器是外來(lái)雜質(zhì)的來(lái)源。在有關(guān)一次性注射器可提取物/可浸出物的已發(fā)表報(bào)告中 [6,15–17], 艾奧多等人[16] 和 Salmona 等人 [17] 報(bào)道了使用蒸餾水作為提取溶劑的一次性注射器中苯并噻唑基可提取物/可浸出物的結(jié)構(gòu)。據(jù)作者所知，目前缺乏關(guān)于在水和有機(jī)溶劑混合物存在下從一次性注射器中提取的可提取物的報(bào)告，這些溶劑通常在藥物開(kāi)發(fā)過(guò)程中的原料藥和藥品分析過(guò)程中用作樣品稀釋劑。在當(dāng)前的研究中使用不同的臨床級(jí)一次性注射器對(duì)此進(jìn)行了探索。進(jìn)行注射器組件提取以了解注射器不同部分的貢獻(xiàn)。在此，我們報(bào)告了使用液相色譜-高分辨質(zhì)譜 (LC-HRMS) , 核磁共振 (NMR) 和/或 紅外 (IR) 光譜鑒定的塑料一次性注射器中的八種可提取物[18]。在八個(gè)提議的結(jié)構(gòu)中，四個(gè)以前沒(méi)有被報(bào)告為可提 取/可浸出，三個(gè)被發(fā)現(xiàn)是新的化學(xué)結(jié)構(gòu)。

 

2. 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

 

2.1. 化學(xué)品和試劑

 

不同品牌的一次性注射器（品牌 A-D）購(gòu)自當(dāng)?shù)厮幍辏ㄓ《劝嗉恿_爾）。甲醇 (MeOH)、乙腈 (MeCN)、鹽酸 (HCl) 和氫氧化鈉 (NaOH) 購(gòu)自 Merck KGaA（德國(guó)達(dá)姆施塔特）。環(huán)氧乙烷 (EtO)、 二氯甲烷 (DCM)、 氘代氯仿 (CDCl3) 和甲酸銨購(gòu)自 Sigma- Aldrich（美國(guó)密蘇里州圣路易斯）。甲酸購(gòu)自 Biosolve Chimie (Dieuze, France)。純化的 Milli-Q 水（MQW，本文中稱為水）由 Millipore（Bradford，PA，美國(guó)）的 Milli-Q plus 純化系統(tǒng)獲 得，注射用水（WFI，Baxter，Gurgaon，India）購(gòu)自當(dāng)?shù)厮幏俊?/span>

 

2.2. 設(shè)備

 

液相色譜在 Waters Alliance®-HPLC 光電二極管陣列系統(tǒng) (Waters Corporation, Milford, MA, USA) 上進(jìn)行。Empower 3 軟 件用于數(shù)據(jù)采集和處理。X-Bridge Shield®RP18 柱，150 mm ×4.6 mm，3.5 µm (Waters Corporation) 用于樣品的色譜分析。

 

高分辨率質(zhì)譜 (HRMS) 分析在 LTQ Orbitrap Velos 質(zhì)譜儀上進(jìn)行，該質(zhì)譜儀與 Accela Ultra HPLC 系統(tǒng)（均來(lái)自美國(guó)加 利福尼亞州圣何塞 Thermo Scientific）和 Agilent 1200 使用布魯克提供的TOPSPIN 3.2 軟件。IR 分析是在 PerkinElmer (Shelton, CT, USA) 的 Spectrum 100 FT-IR 儀器上進(jìn)行的。

 

2.3. 樣品制備和 HPLC 分析

 

對(duì)于注射器可萃取研究，(1) 注射器用選定的溶劑填充大約一 半，并在墊圈和針筒就位的情況下?lián)u動(dòng)大約 20 秒，(2) 然后將注 射器的內(nèi)容物連續(xù)轉(zhuǎn)移到另外四個(gè)注射器中，然后搖動(dòng)約每個(gè)注 射器 20 秒，最終內(nèi)容物被注入 HPLC。在針筒可提取研究的情況 下，采用了類似的程序，注射器中沒(méi)有墊圈和柱塞。使用乙腈和 水的 1:1 v/v 混合物作為溶劑對(duì)品牌 A、B、D（5 mL）和品牌 C（2 mL，因?yàn)楫?dāng)?shù)厥袌?chǎng)上沒(méi)有該品牌的 5 mL 注射器）進(jìn)行評(píng)估. 還使用相同的乙腈和水混合物 (1:1 v/v) 評(píng)估了 A 品牌的 1、2、 5 和 10 mL 容量注射器。使用注射用水、水、甲醇、 乙腈和等體 積的水與乙腈和甲醇的混合物，采用與上述類似的程序。為了從 墊圈中富集可提取物，將 A 品牌注射器的 5 mL 容量注射器的 5 個(gè)墊圈在 10 mL 乙腈和水 (1:1 v/v) 混合物中超聲處理 2 分鐘， 將液體內(nèi)容物離心 5以每分鐘 4000 轉(zhuǎn) (rpm) 的轉(zhuǎn)速旋轉(zhuǎn)， 上清液用于 HPLC 分析。HPLC 流動(dòng)相由 10 mM 甲酸銨和 0.05 % v/v 甲酸水溶液組成(A) 和甲醇 (B) 在梯度模式下 (T min/%A: T0/90; T3/90; T18/10; T28/10; T31/90; T35/90)。在分析過(guò)程中，柱溫箱溫度保持在 40?C。檢測(cè)波長(zhǎng)，流速和進(jìn)樣體積分別為 254 nm、1 mL/min 和 10 µL。

 

2.4. LC-HRMS 研究

 

部分列出的 HPLC 方法2.3 也用于 LC-HRMS 研究。HRMS 儀器 使用正離子模式的電噴霧電離源進(jìn)行操作，源電流為 100.0 µA， 毛細(xì)管溫度為 250?C、300?C 和 350? C 代表品牌 A 可提取物全掃描，品牌 B 可提取物全掃描和品牌 A 可提取物 MS/MS，分別。氮?dú)夂秃夥謩e用作鞘氣和輔助氣。MS/MS 數(shù)據(jù)是使用更高能量的 C-trap 解離 (HCD) 在數(shù)據(jù) 依賴模式下采集的，其中所需的最小信號(hào)、隔離寬度、歸一化碰 撞能量、默認(rèn)電荷狀態(tài)和激活時(shí)間設(shè)置為 500.0、2.00、35.0 ， 分別為 1 和 0.100。

 

2.5. 用于 NMR 和 IR 研究的可提取 E3 的富集和分離

 

為了獲得足夠的 NMR 研究樣品，將大約 100 個(gè) 2 mL 品牌 A 注射器的墊圈在 100 mL 1 N NaOH 溶液中超聲處理 10 分鐘，并 在 60?C 下儲(chǔ)存 2 小時(shí)。所得提取物用 5 N HCl 中和，并用 0.45µm 聚偏二氟乙烯 (PVDF) 過(guò)濾器過(guò)濾。然后用50mL DCM萃取濾液。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上干燥DCM層。然后將干燥的殘留物溶解在 0.6 mL相色譜系統(tǒng)（ Agilent Technologies, Waldbronn, Germany) 連CDCl3中以收集1H、13C、通過(guò)偏振轉(zhuǎn)移-135 (DEPT-135)、異核單接到 LTQ OrbitrapTM值質(zhì)譜儀 (Thermo Scientific)。Thermo Xcalibur 軟件 2.1、2.2 和 3.0 用于數(shù)據(jù)采集和處理。

 

在 Bruker 400 MHz（Bruker BioSpin Corporation，F(xiàn)ällanden， Switzerland）儀器上進(jìn)行一維（一維）和二維（二維）核磁共振 實(shí)驗(yàn)。所有數(shù)據(jù)都已獲取使用與上面列出的類似程序進(jìn)行提取以獲得更高的樣品量。使用 衰減全反射 (ATR) 采樣技術(shù)從 4000 cm−1到 400 cm−1掃描樣品。

 

3. 結(jié)果和討論

 

進(jìn)行了詳細(xì)調(diào)查，以確定來(lái)自不同品牌一次性注射器的潛在可浸出物（可提取物）。為此，對(duì)四個(gè)品牌 (A-D) 的一次性注射器 進(jìn)行了評(píng)估。其中，顯示出大量可萃取物（A 和 B）的品牌使用 不同的溶劑進(jìn)行評(píng)估，即水性、有機(jī)及其混合物。還評(píng)估了不同容量注射器的可提取物最大量的品牌 A，以了解提取傾向。最后， 對(duì)品牌 A 和 B 進(jìn)行評(píng)估，以找出注射器不同部位的可提取物的確 切來(lái)源，并使用主要可提取物來(lái)源的富集樣品進(jìn)行識(shí)別。下面詳 細(xì)討論同樣的問(wèn)題。

 

3.1. 四種不同品牌一次性注射器的 HPLC 分析

 

比較了 A、B、C 和 D 品牌注射器的色譜數(shù)據(jù)在乙腈:水 (1:1 v/v) 中的可提取物，這是 HPLC 方法中最常見(jiàn)的稀釋劑之一，在 分析方法開(kāi)發(fā)和藥品的驗(yàn)證。代表性色譜圖在圖 S2a 中給出。對(duì) 四個(gè)品牌的總可萃取物的面積計(jì)數(shù)（表 S2）進(jìn)行了比較，并在圖 1a。不同注射器品牌的提取傾向各不相同，品牌 A 的可提取物含 量最高，其次是品牌 B，即品牌 A 的約 42%。兩個(gè)品牌的可提取 物特征不同，品牌 B 中不存在品牌 A 的主要可提取物反之亦然（圖 S2a），這表明不同品牌的一次性注射器可能會(huì)產(chǎn)生不同類 型的可提取物。從品牌 B 和 C 中提取的主要成分相似，但是，在 品牌 C 的情況下，其強(qiáng)度明顯較低（圖 S2a）。在品牌 D 注射器 中未觀察到可提取物，因此品牌 C（與品牌 B 相似）和品牌 D 未 進(jìn)一步評(píng)估。我們還想在此提及，各種可萃取物的響應(yīng)因子可能 不同。這里的目的只是為了證明不同品牌的一次性注射器對(duì)浸出 的敏感性，考慮到不同可提取物的幾乎相似的響應(yīng)因子。

 

3.2. A牌不同容量一次性注射器的可提取物傾向

 

由于在品牌 A 注射器中觀察到最大可提取物，因此還使用等體積 的乙腈和水混合物進(jìn)一步評(píng)估了注射器體積（1、2、5 和 10 mL）的 影響（圖 S2b）。在所有體積中都觀察到了類似的可提取曲線，而 5 和 10 mL 注射器的總面積計(jì)數(shù)相對(duì)較低（圖。1b)。該結(jié)果表明，A 牌不同容量一次性注射器的各個(gè)部件的原材料很可能來(lái)自共同的來(lái)源。

 

3.3. 不同溶劑對(duì)可萃取物的影響

 

使用不同溶劑對(duì)品牌 A 和 B (5 mL) 注射器評(píng)估不同可萃取物 的萃取傾向，因?yàn)閮烧咴诔跏佳芯恐卸硷@示出顯著的可萃取物

 

（部分3.1). 注射用水、水、甲醇、乙腈和等體積水與乙腈和甲醇 的混合物用作溶劑，所得色譜圖分別顯示在圖 S2c 和 S2d 中，分 別用于品牌 A 和 B。最高含量在純有機(jī)溶劑（即乙腈和甲醇）存在下觀察到可提取物的數(shù)量， 然后是它們與水的混合物（乙腈：水和甲醇：水，均為 1：1 v/v）。僅使用水性溶劑（注射用水和水）觀察到極少量的可萃取物（圖。1C）。在品牌 A 的情況下，當(dāng)溶劑從水溶劑和有機(jī)溶劑 的混合物變?yōu)?100% 有機(jī)溶劑（有機(jī)溶劑比混合物更高）時(shí)，只有提取程度（每種可提取物的數(shù)量）發(fā)生變化，而在在品牌 B 的情況下，當(dāng)使用純乙腈和甲醇時(shí)，觀察到兩種新的可萃取物（圖 S2d，26-27 分鐘 RT）。結(jié)果強(qiáng)調(diào)，使用不同的溶劑和/或溶劑極性的變化可能會(huì)導(dǎo)致在可提取物的數(shù)量和類型方面的不同提取傾向。因此，使用一種溶劑的可萃取性研究可能無(wú)法預(yù)測(cè)使用另一種溶劑的結(jié)果，需要使用包括任何酸性或堿性改性劑在內(nèi)的精確溶劑組合進(jìn)行。

 

圖1.不同品牌一次性注射器(a)、品牌A不同容量注射器(b)和品牌A和B的5mL注射器使用各種溶劑(c)的總可萃取物的比較面積計(jì)數(shù)柱狀圖。注意：提供了總面積計(jì)數(shù)作為一種手段，以證明哪個(gè)品牌/溶劑導(dǎo)致最大量的可提取物，假設(shè)它們的響應(yīng)因子幾乎相等。

關(guān)鍵詞：MeCN，乙腈；甲醇，甲醇；  MQW，Milli-Q 水和WFI，注射用水。

 

3.4. 評(píng)估注射器組件以確認(rèn)可提取物的確切來(lái)源

 

在評(píng)估的一次性注射器品牌（品牌 A–D）中，品牌 A 和 B 注射 器顯示出兩種不同的可提取特征（部分3.1). 因此，對(duì)這兩個(gè)品牌的 注射器進(jìn)行了進(jìn)一步審查，以破譯可提取物的確切來(lái)源。為此， 使用水和乙腈 (1:1 v/v) 的混合物作為溶劑分別提取了桶、墊圈和整個(gè)注射器，所得色譜圖顯示在圖2a和 2b。未評(píng)估柱塞，因?yàn)?它沒(méi)有與溶劑直接接觸。來(lái)自注射器、針筒和墊圈的比較數(shù)據(jù)表明，從注射器沖洗液中觀察到的可萃取物都存在于墊圈中。桶沖洗顯示可提取物的存在可忽略不計(jì)，這些可提取物在移除墊圈期間可能已從墊圈轉(zhuǎn)移到桶。盡管在品牌 B 中，在桶沖洗中出現(xiàn)了一個(gè)額外的小峰，這不是墊圈可萃取物的一部分。除此之外，幾 乎所有的可萃取物都是墊片提取物的一部分，因此使用富集的墊片提取物來(lái)鑒定主要雜質(zhì)。

 

圖2.品牌A(a)和品牌B(b)注射器(5mL)不同部分的比較色譜圖顯示出可提取物的趨勢(shì)。

 

3.5. 可萃取物的表征

 

七種可萃取物，A 品牌注射器墊圈萃取物的 E1-E7 在 RRT 0.74、 0.81、0.83、0.94、1.00（RT 13.19 min 處的主峰被視為 RRT 的參考）、1.04 和 1.04（圖 3a) 借助質(zhì)量和/或 NMR 數(shù)據(jù)以及B 品牌注射器墊圈的主要可提取物之一進(jìn)行表征（E8，RT 15.65 分鐘，圖 3b)。ESI + ve 模式下所有可萃取物的 HRMS 線譜如圖 所示圖 4和數(shù)據(jù)被編譯在表格1。E1-E3、E5 和 E6 是 35 歸一化 碰撞能量下的 MS/MS 譜圖，而在 E4、E7 和 E8 碰撞誘導(dǎo)解離導(dǎo) 致分子離子完全消失的情況下，顯示了全掃描的譜圖。E4、E7 和 E8 的這些全掃描譜圖顯示存在與 MS/MS 譜圖相同的碎片。分子離子和碎片的最佳可能分子式和精確質(zhì)量是使用元素組成計(jì)算器計(jì) 算的，并包含在表格1 以及毫質(zhì)量單位 (mmu) 中的誤差。同表中 的數(shù)據(jù)用于建立這些可萃取物的碎裂途徑。通過(guò)比較理論和觀察 到的相對(duì)同位素豐度值，也證實(shí)了通過(guò)精確質(zhì)量提出的化學(xué)式（圖 S3 和表 2)。觀察到的所有可提取物的 M + 1 和 M + 2 相 對(duì)同位素豐度值均在理論相對(duì)豐度值的 ±5% 以內(nèi)。

 

表2. 來(lái)自品牌 A 和 B   注射器的可提取物的相對(duì)同位素豐度數(shù)據(jù)

圖片*M+ 2  未包括在內(nèi)，因?yàn)槠淅碚撓鄬?duì)豐度百分比小于 1

 

圖3.代表性色譜圖顯示了來(lái)自品牌A(a)的可提取物E1-E7和來(lái)自品牌(b)的E8，它們用于鑒定。

 

3.5.1. E1 -E3 的識(shí)別

 

E1 的分子離子的精確質(zhì)量數(shù)為 196.0413 Da，這可能對(duì)應(yīng)于分 子式 C9H10NO2S+，根據(jù)元素計(jì)算器的精確質(zhì)量數(shù)為 196.0427 Da。m/z 196 的 MS/MS 解離顯示 m/z 178、168 和 150 的三個(gè)突出碎片（圖 4一種）。m/z 178 和 168 的產(chǎn)物離子分別由 H2O 和 CO 的損失產(chǎn)生 (圖 5a) 來(lái)自分子離子。從 m/z 168 的片段中進(jìn)一步 丟失 H2O 或從 178 的片段中丟失 CO 導(dǎo)致 m/z 150 的片段。這 個(gè)后來(lái)的關(guān)鍵片段表明在氮上添加了羥乙基部分。它的紫外線解析（圖S4）幾乎與E3（核磁共振確認(rèn)的結(jié)構(gòu)）相似，這表明其基本 骨架與E3相似?；谶@些觀察和可能的分子式的最小誤差 (-1.4 mmu)，該可萃取物的結(jié)構(gòu)可以建議為 3-(2-羥乙基)-2-苯并噻 唑啉酮。

 

圖 4. 來(lái)自品牌 A 和 B 注射器的可提取物的 LC-HRMS 線譜（分別為 E1-E8 的    a-h）。

 

E2 的質(zhì)量為 240.0672 Da，比 E1 (圖 4b) 并指出在 E1 的結(jié)構(gòu) 中可能存在額外的羥乙基部分。它還在失去 C2H6O2時(shí)顯示出 m/z 178（與 E1 相同）的碎片，在失去 CO 時(shí)進(jìn)一步分解為 m/z 150 的離子。此外， E2 的 UV解析（圖 S4）表明它的基本骨架類似于E1 和 E3，支持其提出的結(jié)構(gòu)，即 3-(2-(2-羥基乙氧基)乙基)-2- 苯并噻唑啉酮 (圖 5a).

 

圖5. E1和E2(a)、E3(b)、E4和E7(c)、E5和E6(d)和E8(e)的結(jié)構(gòu)和質(zhì)量碎裂行為

 

E3 顯示 m/z 152.0154 (圖 4C）。精確質(zhì)量表明分子離子式為C7H6NOS+，精確質(zhì)量為 152.0165。詳細(xì)的 HRMS 數(shù)據(jù)以及 mmu 中 的質(zhì)量誤差包含在表格1。其分子離子表現(xiàn)出 CO 和 COS 的損失， 并分別產(chǎn)生 m/z 124 和 92 的產(chǎn)物離子（圖 5b)?；谶@些觀察， E3 的結(jié)構(gòu)被提議為 2-(3H)-苯并噻唑酮。

 

表格1. 來(lái)自品牌 A 和 B 注射器的可提取物的LC-HRMS數(shù)據(jù)。

 

為了確認(rèn)確切的結(jié)構(gòu)，通過(guò) LC-UV-MS（圖 S5）對(duì) E3 進(jìn)行富集、分離和確認(rèn)，以獲得1H、13C 和 DEPT-135、COSY、HSQC 和 HMBC（圖 S5）。S6-S10 分別和表(3） 核磁共振數(shù)據(jù)。1H NMR 譜（圖 S6）顯示化學(xué)位移值（δ ppm）處的信號(hào)：9.726 (s)、7.322-7.342 (d)、7.078-7.091 (m)、7.188-7.223 (m)和7.078-7.091 (m)的質(zhì)子位置為3和6-9。δ9.726ppm 的化學(xué)位移值表明存在 NH 質(zhì)子，而介于 δ7.0 至 δ7.4 ppm 之間的值證實(shí)了四個(gè)芳香族質(zhì)子。13C NMR 光 譜顯示在δ 172.670 、 δ135.305 、 δ123.953 、 δ122.567 、 δ123.256 、δ126.496 和δ 111.659 ppm 處的信號(hào)，對(duì)應(yīng)于結(jié)構(gòu)中的總共 7 個(gè)碳（圖 S7）。DEPT-135 證實(shí)存在四個(gè)次甲基芳烴碳（圖 S7）。位 于 δ135.305 和 δ123.953 ppm 的其余兩個(gè)碳被指定為芳環(huán)的季 碳，它們?cè)谙┐夹问街锌赡芨停@表明 δ172.670 ppm 的信號(hào)可 能是羰基碳。IR數(shù)據(jù)（圖S11）進(jìn)一步支持了這一點(diǎn)，它清楚地顯示 了1665.62 cm−1處的信號(hào)。2D 數(shù)據(jù)，即 COSY、HSQC 和 HMBC（分 別為圖 S8-S10）進(jìn)一步確定了所提出結(jié)構(gòu)中的質(zhì)子-質(zhì)子和質(zhì)子- 碳關(guān)系?；谝陨蠑?shù)據(jù)，E3的結(jié)構(gòu)被確認(rèn)為2-(3H)-苯并噻唑酮。通過(guò)比較最近報(bào)道的同一化合物的 NMR 和 IR 數(shù)據(jù)進(jìn)一步支持了 這種結(jié)構(gòu)[19].

 

表3. E3 在 CD3 Cl 中的1H、COSY、13C、DEPT-135、HSQC 和 HMBC數(shù)據(jù)

 

對(duì)于與 E1 和 E3 相同的質(zhì)量，Airaudo 等人 [16] 和Salmona 等人[17], 報(bào)道的結(jié)構(gòu)為 2-(2-羥基乙氧基) 苯并噻唑 和 2-羥基苯并噻唑。雖然，我們的數(shù)據(jù)表明結(jié)構(gòu)略有不同。在 E3 的情況下，酮不是烯醇形式，而是通過(guò)核磁共振、紅外光譜和與 報(bào)告數(shù)據(jù)的比較來(lái)證明 [19] 而在 E1 中，基于 m/z 150 的關(guān)鍵 MS/MS 碎片以及 E1 和 E3 的紫外光譜之間的相似性，證明在 N 上添加羥乙基而不是 O 是合理的。

 

3.5.2. E4 和 E7 的識(shí)別

 

E4 和 E7 的準(zhǔn)確質(zhì)量數(shù)為 m/z 239.0284 (圖 4d) 和 m/z 255.0056 (圖 4g)，分別具有與 E3 和 E5 幾乎相似的紫外光譜（圖 S4 ） 。它 們 的 分 子 式 被 鑒 定 為 C10H11N2OS2+(E4) 和 C10H11N2S3+(E7)， 精確質(zhì)量為分別為 m/z 239.0307 和 m/z 255.0079。從兩個(gè)分子離子中看到的 m/z 88 的共同碎片表明存在 二甲基甲硫代酰胺陽(yáng)離子（圖 5c).

 

此提取物的形成已在下一節(jié)中解釋。根據(jù)分子式，紫外光譜的相 似性和二甲基甲硫酰胺陽(yáng)離子的常見(jiàn)碎片離子，E4和E7的結(jié)構(gòu)被 提出為N,N-二甲基-2-氧代苯并[d]噻唑-3(2H)-碳硫酰胺和苯并[d] 噻唑2-基二甲基氨基二硫代酸酯，分別。最近，E7 的合成過(guò)程和 完整的表征數(shù)據(jù)已被報(bào)道[20].

 

3.5.3. E5 和 E6 的識(shí)別

 

E5 分子離子的準(zhǔn)確質(zhì)量為 212.0185 Da (圖 4e)?？捎纱朔肿?量推導(dǎo)出的最接近的分子離子式確定為 C9H10NOS2+，精確質(zhì)量為 212.0198 Da（誤差 -1.3 mmu，對(duì)于所有其他可提取物遵循相同的 模式）。這顯示了 m/z 194（H2O 丟失）和 168（C2H2丟失）的突 出片段，如圖所示圖 5d.根據(jù) MS 數(shù)據(jù)和現(xiàn)有報(bào)告，它被鑒定為 2-(2-羥乙基巰基) 苯并噻唑 (HMBT)，一種已知的可提取/可浸出 [16,17,21].

 

E6 的分子量為 m/z 256.0444 (圖 4f)，比 E5 的質(zhì)量高 44Da。這種差異與在 E1 和 E2 之間觀察到的相似。44 Da 的差異 表明 E5 中存在額外的羥乙基。m/z 194 和 168 的產(chǎn)物離子在 C2H6O2（如 E2 的情況）和 C2H2碎裂時(shí)的后續(xù)損失加強(qiáng)了其提出 的結(jié)構(gòu)為 2- (2-(2-羥基乙氧基)乙基巰基)苯并噻唑(圖 5d).

 

3.5.4. E8的識(shí)別

 

發(fā)現(xiàn) E8 分子離子的準(zhǔn)確質(zhì)量為 195.1008 Da (圖 4h)，與最 近的分子式 C11H15O3+和精確質(zhì)量 195.1016 Da（誤差 -0.8mmu)。根據(jù)質(zhì)量和分子式，可以將其鑒定為 4-乙氧基苯甲酸乙酯， 據(jù)報(bào)道該物質(zhì)可從預(yù)裝注射器中浸出[12].其 HRMS 譜顯示 m/z 167、 149、121 和 95 的碎片，這些碎片可以在 C2H4、H2O、C2H4的亞 序列損失中產(chǎn)生和 CO (+H2) 來(lái)自分子離子 (圖 5e)，這進(jìn)一步支 持了提議的結(jié)構(gòu)。

 

3.6. 可提取物的建議途徑

 

生成品牌 A 可提取物的暫定途徑如圖所示圖 6。苯并噻唑衍生 物在橡膠生產(chǎn)中一般用作硫化促進(jìn)劑[5,22,23]. 據(jù)報(bào)道，2-巰基苯并噻唑 (MBT) 在制造一次性注射器的墊圈時(shí)被用作促進(jìn)劑或苯并噻唑衍生物，在硫化過(guò)程中會(huì)轉(zhuǎn)化為它[6,15–17,21]。已知其 與殺菌劑即環(huán)氧乙烷反應(yīng)生成HMBT即E5[21,24]. MBT 和 HMBT 對(duì)苯 并噻唑 2 位羥基離子的攻擊可生成 E3，即 2(3H)-苯并噻唑酮 [24]. 環(huán)氧乙烷與 E3 的 NH 質(zhì)子反應(yīng)可能導(dǎo)致形成 E1，即 3-(2- 羥乙基)-2-苯并噻唑啉酮 [24]. 在 E1 和 E5 的游離羥基上進(jìn)一步 加成環(huán)氧乙烷可分別導(dǎo)致 E2 和 E6 的形成。E4 和 E7 可以通過(guò) 二級(jí)促進(jìn)劑如四甲基秋蘭姆單硫化物 (TMTM) 和四甲基秋蘭姆二硫 化物 (TMTD) 的 N, N-二甲基甲硫代酰胺部分的反應(yīng)生成。20,25,26] 分別使用 E3 和 MBT/HMBT。已知 E8，即 4-乙氧基苯甲 酸乙酯可從聚乙烯或聚丙烯制成的塑料中提取出來(lái)，可用作聚合 催化劑[12,27–29]. 在這種情況下，大部分從橡膠墊圈中流出（盡管在塑料桶的情況下檢測(cè)到少量，但在 溫和的提取條件下），它可以用作聚合催化劑。所有八種確定的可提 取物的摘要提供在表 4。

 

4. 結(jié)論

 

該研究涉及在研究藥物產(chǎn)品的 LC 方法開(kāi)發(fā)過(guò)程中觀察到與已知 雜質(zhì)共流出的可浸出物后，對(duì)一次性臨床級(jí)塑料注射器的可提取物進(jìn) 行全面調(diào)查。觀察到的可提取物數(shù)量和類型的差異強(qiáng)調(diào)了來(lái)自不同品 牌注射器的潛在可浸出物含量的差異。在 LC-HRMS 和/或 NMR/IR 的 幫助下，鑒定了塑料一次性注射器中的八種可提取物，并提出了其形成的合理途徑。據(jù)我們所知，四個(gè)提議的可提取物尚未報(bào)告為可提取/可浸出物，而三個(gè)被發(fā)現(xiàn)具有化學(xué)新穎性。這些發(fā)現(xiàn)在常規(guī)藥品分析中特別重要，其中分析方法可能對(duì)這些可提取物沒(méi)有選擇性，因此在純度/雜質(zhì)測(cè)定過(guò)程中構(gòu)成風(fēng)險(xiǎn)。這項(xiàng)工作還證明了僅用注射用水提取臨床級(jí)注射器中的可浸出物， 這可能是一個(gè)潛在的安全問(wèn)題，值得進(jìn)一步調(diào)查。