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嘉峪檢測網(wǎng) 2021-07-28 19:46
聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）技術(shù)是一種對特定的靶核酸片段在體外進(jìn)行快速擴(kuò)增的方法，通常由變性—退火—延伸三個基本反應(yīng)步驟構(gòu)成，通過不同溫度的循環(huán)實現(xiàn)靶核酸的擴(kuò)增。
實時熒光PCR技術(shù)是在PCR技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的核酸/基因檢測技術(shù)，是一種在PCR反應(yīng)體系中加入熒光標(biāo)記探針或熒光染料，利用對熒光信號的實時檢測來監(jiān)測整個PCR進(jìn)程，最后通過特異的熒光信號/標(biāo)準(zhǔn)曲線/內(nèi)標(biāo)對核酸或基因進(jìn)行定性或定量分析的方法。
一、實時熒光PCR分析儀的結(jié)構(gòu)與工作原理
1.實時熒光PCR分析儀的結(jié)構(gòu)
實時熒光PCR分析儀通常由控制模塊、溫控模塊、光電模塊、機(jī)械模塊、電源模塊和軟件（控制與數(shù)據(jù)處理軟件）等組成。
2.實時熒光PCR分析儀的工作原理
實時熒光PCR分析儀工作原理一般為與適配試劑配合使用，根據(jù)設(shè)定的運(yùn)行參數(shù)，在控制系統(tǒng)的作用下通過溫控模塊為核酸在體外進(jìn)行RNA逆轉(zhuǎn)錄以及變性、退火、延伸循環(huán)擴(kuò)增及熔解出具所需的溫度環(huán)境，利用光電模塊實時采集擴(kuò)增過程中產(chǎn)生的熒光信號，應(yīng)用軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，用于對樣本中特定靶基因或核酸序列進(jìn)行擴(kuò)增和分析。
二、實時熒光PCR分析儀的研發(fā)實驗要求
1.產(chǎn)品性能研究
性能研究資料應(yīng)為申請人自行完成的對產(chǎn)品功能性指標(biāo)、安全性指標(biāo)、質(zhì)量控制指標(biāo)設(shè)計研究的資料，不僅包含各性能指標(biāo)的確定和驗證，還應(yīng)體現(xiàn)設(shè)計開發(fā)過程中對申報產(chǎn)品進(jìn)行設(shè)計改進(jìn)的研究內(nèi)容。
1.1性能指標(biāo)研究
應(yīng)進(jìn)行申請人設(shè)計開發(fā)過程中對各模塊/部件設(shè)計輸入輸出的研究，如：溫控模塊中，加熱器件電流/功率的要求及其能達(dá)到的升降溫速度，溫度傳感器的靈敏度要求，加熱邊緣效應(yīng)的研究和解決；光電模塊中光源的選擇及其強(qiáng)度要求，濾光片的選擇及其過濾波長范圍的要求，不同通道的實現(xiàn)方式，不同熒光通道干擾的研究和解決方法；熒光檢測器件的檢測速度、分辨率、靈敏度；機(jī)械模塊中步進(jìn)電機(jī)的步幅要求等。
整機(jī)性能研究：應(yīng)針對產(chǎn)品設(shè)計要求，研究申報產(chǎn)品的各項性能指標(biāo)的最優(yōu)性能以驗證各項性能指標(biāo)能否達(dá)到設(shè)計預(yù)期。如：升降溫速度、溫度均勻性/準(zhǔn)確性/穩(wěn)定性、熒光強(qiáng)度準(zhǔn)確性/重復(fù)性、熒光線性、不同熒光通道的干擾、樣品容量和反應(yīng)體積、傳動位置準(zhǔn)確度等。
1.2安全性指標(biāo)的驗證
安全性指標(biāo)包括電氣安全指標(biāo)和電磁兼容指標(biāo)兩大類。電氣安全指標(biāo)應(yīng)當(dāng)包括GB 4793.1（IEC 61010-1）、GB 4793.6（IEC 61010-2-010）、GB 4793.9（IEC 61010-2-081）、YY 0648（IEC61010-2-101）及其他適用的國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的指標(biāo)，電磁兼容指標(biāo)應(yīng)當(dāng)包括GB/T 18268.1（IEC 61326-1）和GB/T 18268.26（IEC 61326-2-6）及其他適用的國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的指標(biāo)。申請人應(yīng)對上述項目進(jìn)行研究，按照法規(guī)要求給出檢測報告。
1.3環(huán)境條件對產(chǎn)品性能指標(biāo)無顯著影響的研究
主要包括氣候環(huán)境條件、機(jī)械環(huán)境條件、運(yùn)輸條件等，可參考GB/T 14710及其他適用的國家標(biāo)準(zhǔn)和行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)中的相關(guān)指標(biāo)，申請人應(yīng)對上述項目進(jìn)行研究，或按照法規(guī)要求給出檢測報告。
2.清潔/消毒工藝研究
明確采取的污染控制措施，包括儀器清潔與消毒工藝等，給出推薦清潔/消毒方法確定的依據(jù)，并評價其對儀器的影響。
3.有效期和包裝研究
應(yīng)當(dāng)給出產(chǎn)品使用期限的分析評價報告，報告中應(yīng)綜合分析申報產(chǎn)品使用期限的影響因素，明確使用期限評價時所采用的具體評估分析方法，得出產(chǎn)品的使用期限。并依據(jù)具體的評估方法，進(jìn)行同類產(chǎn)品的類比分析報告、產(chǎn)品/關(guān)鍵部件的加速/實時老化試驗報告或可靠性分析報告等相關(guān)驗證。
包裝研究給出在宣稱的有效期內(nèi)以及運(yùn)輸儲存條件下，保持包裝完整性的依據(jù)。
有關(guān)產(chǎn)品有效期研究資料的詳細(xì)內(nèi)容，建議按照《有源醫(yī)療器械使用期限注冊申報資料指導(dǎo)原則》的要求進(jìn)行編寫。
3.軟件研究
3.1出具軟件描述文檔，根據(jù)YY/T 0664的要求及產(chǎn)品預(yù)期的臨床檢測項目可能對患者造成的風(fēng)險，確定申報產(chǎn)品隨機(jī)軟件的安全性級別，并按照確定的安全性級別出具隨機(jī)軟件描述文檔?？紤]到實時熒光PCR儀在臨床檢驗中具有廣泛的用途，其軟件功能決定了對擴(kuò)增結(jié)果判讀的準(zhǔn)確與否，如因軟件問題造成結(jié)果錯誤，可能會導(dǎo)致臨床使用錯誤結(jié)果對患者進(jìn)行后續(xù)治療，進(jìn)而對患者造成傷害。
申報產(chǎn)品的軟件組件一般包含嵌入式軟件和控制軟件。當(dāng)申報產(chǎn)品涉及多個軟件時，申報軟件應(yīng)主要包含與臨床檢測用途相關(guān)的軟件，而作為輔助功能的軟件（如售后維護(hù)軟件）可不包含在申報產(chǎn)品中。
嵌入式隨機(jī)軟件和控制軟件命名規(guī)則不同時，應(yīng)分別給出軟件版本的命名規(guī)則，應(yīng)明確寫明軟件版本的全部字段及字段含義，確定軟件的完整版本和發(fā)布版本。
在核心算法部分，應(yīng)對PCR擴(kuò)增曲線擬合、Ct值計算、定性判讀依據(jù)、定量計算、熔解曲線分析等數(shù)學(xué)模型作詳細(xì)描述。
3.2出具網(wǎng)絡(luò)安全描述文檔，明確申報產(chǎn)品相關(guān)的數(shù)據(jù)類型、數(shù)據(jù)交換方式、數(shù)據(jù)導(dǎo)出格式、功能/用途、運(yùn)行環(huán)境等，從保密性、完整性、可得性等方面對申報產(chǎn)品的網(wǎng)絡(luò)安全性進(jìn)行風(fēng)險管理和測試驗證，明確網(wǎng)絡(luò)安全的維護(hù)方式等以保證產(chǎn)品安全有效。
有關(guān)軟件研究資料的詳細(xì)內(nèi)容，建議按照《醫(yī)療器械軟件注冊申報資料指導(dǎo)原則》、《醫(yī)療器械網(wǎng)絡(luò)安全注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》的要求進(jìn)行編寫。
4.產(chǎn)品技術(shù)要求
4.1 產(chǎn)品名稱、產(chǎn)品型號/規(guī)格及其劃分說明的內(nèi)容應(yīng)與綜述資料的相應(yīng)內(nèi)容保持一致；當(dāng)申報產(chǎn)品有多個型號時，應(yīng)明確各型號及各規(guī)格之間的所有區(qū)別（必要時可附相應(yīng)圖示進(jìn)行說明）；同時應(yīng)明確軟件的名稱、發(fā)布版本、版本命名規(guī)則、運(yùn)行環(huán)境（包括硬件配置、軟件環(huán)境和網(wǎng)絡(luò)條件）。
4.2 性能指標(biāo)、檢驗方法的內(nèi)容可參考YY/T 1173設(shè)置。如申報產(chǎn)品除實時熒光擴(kuò)增分析功能外還具有熔解曲線分析功能，應(yīng)對熔解曲線相關(guān)的性能指標(biāo)（熔解溫度、溫度分辨率等）提出相應(yīng)的要求。如申報產(chǎn)品的樣本載體為芯片或毛細(xì)管等非常規(guī)載體，應(yīng)對與載體相關(guān)的性能指標(biāo)提出要求（芯片通道、毛細(xì)管內(nèi)徑等）；該部分應(yīng)結(jié)合產(chǎn)品相關(guān)特性，其具體要求應(yīng)與性能研究資料保持一致。
4.3 性能指標(biāo)、檢驗方法中明確寫明軟件組件全部臨床功能的要求和檢驗方法。軟件組件的功能可包含如樣本信息設(shè)置、反應(yīng)條件設(shè)置、熒光通道選擇、數(shù)據(jù)處理分析、擴(kuò)增結(jié)果顯示、用戶管理等功能。該部分內(nèi)容應(yīng)與軟件描述文檔保持一致。
4.4 性能指標(biāo)、檢驗方法中應(yīng)包含網(wǎng)絡(luò)安全相關(guān)要求，該部分內(nèi)容應(yīng)符合《醫(yī)療器械網(wǎng)絡(luò)安全注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》的要求。
4.5 電氣安全性能應(yīng)符合GB 4793.1、GB 4793.6、GB 4793.9、YY 0648的要求。
4.6 電磁兼容性能應(yīng)符合GB/T 18268.1、GB/T 18268.26的要求。
4.7 如通過檢驗報告方式進(jìn)行環(huán)境條件的驗證，環(huán)境試驗應(yīng)符合GB/T 14710中適用條款的要求。
4.8 附錄為體外診斷及實驗室設(shè)備基本安全特征，包括環(huán)境條件、設(shè)備的類別、電源、絕緣。
三、相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)
（一）《醫(yī)療器械注冊管理辦法》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第4號）
（二）《醫(yī)療器械說明書和標(biāo)簽管理規(guī)定》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局令第6號）
（三）《醫(yī)療器械軟件注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2015年第50號）
（四）《醫(yī)療器械網(wǎng)絡(luò)安全注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2017年第13號）
（五）《有源醫(yī)療器械使用期限注冊技術(shù)審查指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2019年 第23號）
（六）《醫(yī)療器械臨床評價技術(shù)審查指導(dǎo)原則》（國家食品藥品監(jiān)督管理總局通告2015第14號）
四、主要風(fēng)險
申請人應(yīng)主要參考YY/T 0316-2016《醫(yī)療器械風(fēng)險管理對醫(yī)療器械的應(yīng)用》和YY/T 1406.1-2016《醫(yī)療器械軟件 第1部分：YY/T 0316應(yīng)用于醫(yī)療器械軟件的指南》規(guī)定的過程和方法，包括風(fēng)險分析、風(fēng)險評價、風(fēng)險控制措施的實施和驗證、剩余風(fēng)險的可接受性評定，形成風(fēng)險管理報告，充分保證產(chǎn)品的安全性和有效性。
1.產(chǎn)品的主要危險（源）
實時熒光PCR分析儀的主要危險（源）大致可包括五個方面，即：能量危險（源）、生物學(xué)和化學(xué)危險（源）、操作危險（源）、信息危險（源）、軟件危險（源）。
2.可參考的附錄
與產(chǎn)品有關(guān)的安全性特征判定可參考YY/T 0316附錄C。
危險（源）、可預(yù)見的事件序列和危險情況判斷可參考YY/T 0316的附錄E、I。
風(fēng)險控制的方案與實施、綜合剩余風(fēng)險的可接受性評價及生產(chǎn)和生產(chǎn)后監(jiān)視相關(guān)方法可參考YY/T 0316的附錄F、G、J。
針對體外診斷設(shè)備的附加風(fēng)險管理內(nèi)容，可參考YY/T 0316的附錄H。
軟件相關(guān)的潛在隱患可參考YY/T1406.1的附錄C。
來源：嘉峪檢測網(wǎng)
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