中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

關(guān)于分析方法驗(yàn)證，各國(guó)藥典以及ICH Q2 定義基本相同，就是為了證明該分析方法與其預(yù)期目的相適應(yīng)［1］。此定義既包含了對(duì)分析方法的強(qiáng)制性要求，也包含了對(duì)分析方法的一定容忍。強(qiáng)制性要求一般容易理解，因?yàn)樾枰獙?duì)一系列評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行驗(yàn)證，并且這些評(píng)價(jià)指標(biāo)需要滿足一定的驗(yàn)證要求。一定容忍表現(xiàn)在評(píng)價(jià)指標(biāo)雖需要滿足特定的要求，但并不一定要做到極致，而且在大多數(shù)的情況，由于受到檢測(cè)樣品、樣品處理方法、檢測(cè)設(shè)備的限制以及系統(tǒng)誤差的存在，不可能做到極致。另外，在個(gè)別情況下，考慮到檢測(cè)成本問(wèn)題，在低成本檢測(cè)即可滿足檢測(cè)需求的情況下，也不再考慮開(kāi)發(fā)更高成本、更精確的檢測(cè)方法。但是值得提醒的是，即使某些分析方法經(jīng)驗(yàn)證已能滿足目前的檢測(cè)要求，但是與更加精確的檢測(cè)方法相比，其因?yàn)闄z測(cè)方法的誤差而造成檢驗(yàn)結(jié)果偏差( out of specification，OOS) 的概率會(huì)更高［2］。因此，對(duì)于藥物分析工作者來(lái)說(shuō)，追尋更加精確的檢測(cè)方法，始終是我們追逐的方向和目標(biāo)。

1 方法學(xué)驗(yàn)證的內(nèi)容

根據(jù)ICH Q2 以及各國(guó)藥典方法學(xué)驗(yàn)證內(nèi)容一般需要評(píng)價(jià)的典型驗(yàn)證項(xiàng)目有: 專屬性、準(zhǔn)確度、精密度( 重復(fù)性和中間精密度) 、檢測(cè)限、定量限、線性、范圍和耐用性等。根據(jù)分析方法的類型不同，需要驗(yàn)證的項(xiàng)目不同，見(jiàn)表1。

4 種最常見(jiàn)的分析方法類型中，鑒別實(shí)驗(yàn)僅需要驗(yàn)證專屬性和耐用性; 含量測(cè)定( 含量/效價(jià)) 需要驗(yàn)證專屬性、準(zhǔn)確度、重復(fù)性、中間精密度、線性、范圍和耐用性，上述2 種類型分析方法的驗(yàn)證內(nèi)容目前爭(zhēng)議較小。但對(duì)于雜質(zhì)檢查時(shí)，哪些雜質(zhì)需要進(jìn)行定量檢測(cè)，哪些雜質(zhì)需要進(jìn)行限度檢測(cè)，目前國(guó)內(nèi)研發(fā)工作中存在一定的爭(zhēng)議。部分企業(yè)為了保證研發(fā)資料的全面性，將雜質(zhì)譜分析所有雜質(zhì)檢查均歸類為定量檢測(cè)進(jìn)行驗(yàn)證; 部分企業(yè)則認(rèn)為所有雜質(zhì)既然均規(guī)定了限度，那么雜質(zhì)只要低于此限度就是安全的，所以所有雜質(zhì)只要做限度檢測(cè)即可。

筆者認(rèn)為以上觀點(diǎn)均存在一定的偏頗。將所有雜質(zhì)譜分析可能存在的雜質(zhì)均歸類為定量檢測(cè)進(jìn)行驗(yàn)證，從申報(bào)來(lái)說(shuō)，風(fēng)險(xiǎn)較低，但從研發(fā)成本以及時(shí)間來(lái)說(shuō)，卻造成浪費(fèi)，不值得推薦。但是不是所有雜質(zhì)只要做限度檢測(cè)就可以了，哪些雜質(zhì)需要做定量檢測(cè)，哪些雜質(zhì)只需做限度檢測(cè)，應(yīng)予以區(qū)分。

首先，回歸到方法學(xué)驗(yàn)證的定義: 證明該分析方法與其預(yù)期目的相適應(yīng)。我們需要了解做雜質(zhì)檢查的目的，是為了保證藥品質(zhì)量和臨床用藥安全，保證雜質(zhì)含量始終在界定限度以下。從雜質(zhì)檢查的目的可以看出，如果是保證雜質(zhì)含量某一次在界定限度以下，那么可以認(rèn)為只需做限度檢測(cè)即可。但這里強(qiáng)調(diào)的是始終，包括沒(méi)有被檢測(cè)到的樣品。這就要求我們結(jié)合風(fēng)險(xiǎn)管理和統(tǒng)計(jì)學(xué)來(lái)綜合評(píng)估。

我們需要了解ICH Q3A 和ICH Q3B 中的一個(gè)術(shù)語(yǔ)即報(bào)告限度( 或報(bào)告水平) ，其為一限度，高于此限度的雜質(zhì)需報(bào)告其含量。根據(jù)ICH Q3A 和ICH Q3B，低于報(bào)告限度的雜質(zhì)不需要報(bào)告其含量，由此可以確定，含量低于報(bào)告限度的雜質(zhì)只需要做限度檢查而沒(méi)有必要做定量檢測(cè)。按照?qǐng)?bào)告限度的定義來(lái)說(shuō)，高于此限度的雜質(zhì)需要報(bào)告其含量，也就是說(shuō)需要定量檢測(cè)。

高于報(bào)告限度的雜質(zhì)必須要做定量檢測(cè)的原因如下: 首先只有準(zhǔn)確檢測(cè)了某雜質(zhì)的含量，才能有良好的數(shù)據(jù)積累，對(duì)產(chǎn)品的批間穩(wěn)定性有更好了解，對(duì)工藝有更好把握; 其次只有準(zhǔn)確檢測(cè)了某雜質(zhì)，才能夠更加了解其超出限度的可能性的高低，從而制定相應(yīng)的控制策略; 另只有準(zhǔn)確檢測(cè)了某雜質(zhì)，才能了解關(guān)鍵臨床批次的質(zhì)量，為某些特定雜質(zhì)提供限度制定的依據(jù)。有觀點(diǎn)認(rèn)為把低于報(bào)告限度的雜質(zhì)也準(zhǔn)確檢測(cè)更好，但從風(fēng)險(xiǎn)管理角度來(lái)看，必要性不強(qiáng)，獲益性較低。

另外，上述提到的小于報(bào)告限度的雜質(zhì)是指穩(wěn)定性考察期間均小于報(bào)告限度的雜質(zhì)只需做限度檢查，如果穩(wěn)定性考察期間有超出報(bào)告限度的情況，建議仍做定量檢測(cè)。有的研發(fā)者可能提出，一般情況下，方法學(xué)驗(yàn)證均在穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)之前，所以在要進(jìn)行方法學(xué)驗(yàn)證時(shí)，并不能判斷其是否始終低于報(bào)告限度。筆者認(rèn)為確實(shí)如此。但在方法學(xué)驗(yàn)證時(shí)，根據(jù)前期研究數(shù)據(jù)、文獻(xiàn)資料等，可以提前預(yù)判。在開(kāi)展穩(wěn)定性研究后，如果發(fā)生了變化，那么驗(yàn)證類型也可以再做調(diào)整。

對(duì)于高毒性雜質(zhì)，由于其安全限度極低，已不能按照ICH Q3A 或ICH Q3B 來(lái)確定其報(bào)告限度。為了積累更多的數(shù)據(jù)，保證產(chǎn)品安全，如檢測(cè)條件允許，此類雜質(zhì)建議按定量檢測(cè)進(jìn)行控制。其實(shí)，所有提出的高要求，總是需要存在與之相適應(yīng)的外部條件的。檢測(cè)方法也是一樣，更加嚴(yán)格的檢測(cè)要求是為了滿足更高的安全性要求，也是與更加精密的檢測(cè)設(shè)備以及不斷推陳出新的新型檢測(cè)方法相關(guān)聯(lián)的。

2 方法學(xué)驗(yàn)證的可接受標(biāo)準(zhǔn)

2.1 專屬性

一些國(guó)際機(jī)構(gòu)傾向于使用“選擇性”一詞［3］，因?yàn)橐话阋环N分析方法不太可能對(duì)某一特定的被分析物具有專屬性( 完全識(shí)別) 。在考察一個(gè)分析方法的選擇性時(shí)，應(yīng)著重考慮雜質(zhì)、降解產(chǎn)物、相關(guān)化合物以及制劑輔料等其他組分對(duì)被測(cè)物的干擾。

2.2 線性

線性系指在分析方法范圍內(nèi)，檢測(cè)結(jié)果與供應(yīng)品中被測(cè)物的濃度( 量) 直接或間接呈線性關(guān)系的程度，是定量測(cè)定的基礎(chǔ)，涉及定量測(cè)定的項(xiàng)目，如雜質(zhì)定量試驗(yàn)和含量測(cè)定均需驗(yàn)證方法的線性。

2.3 范圍

特定的范圍一般是從線性研究中得到的，并取決于分析方法的預(yù)期應(yīng)用。確定范圍的方法是指樣品中含有被分析物的量，無(wú)論在范圍內(nèi)或在范圍末端，該分析方法均能獲得良好的線性、精密度和準(zhǔn)確性。

一般情況下，對(duì)原料藥或成品的含量測(cè)定應(yīng)在測(cè)試濃度的80% ～ 120%; 含量均勻度檢查應(yīng)在測(cè)試濃度的70% ～ 130%; 溶出度測(cè)試應(yīng)為規(guī)定范圍的± 20%; 雜質(zhì)檢查應(yīng)為雜質(zhì)報(bào)告水平至規(guī)定限度的120%。

2.4 準(zhǔn)確度

分析方法的準(zhǔn)確度是指真實(shí)值或認(rèn)可的參考值與測(cè)量值之間的接近程度。具有一定的準(zhǔn)確度是進(jìn)行定量測(cè)定的必要條件，因此，涉及定量測(cè)定的檢測(cè)項(xiàng)目均需要驗(yàn)證方法的準(zhǔn)確度。如含量測(cè)定、雜質(zhì)定量實(shí)驗(yàn)等。準(zhǔn)確度應(yīng)在規(guī)定的范圍內(nèi)建立。

2.5 精密度

分析方法的精密度指的是規(guī)定條件下對(duì)均質(zhì)樣品多次取樣進(jìn)行一系列檢測(cè)結(jié)果的接近程度( 離散程度) 。精密度可以從3 個(gè)層次考慮: 重復(fù)性、中間精密度、重現(xiàn)性。

2.6 檢測(cè)限

某一分析方法的檢測(cè)限度是樣品中的被分析物能夠被檢測(cè)到的最低量，但不一定要準(zhǔn)確定量。

2.7 定量限

某一分析方法的定量限度是指在合適的準(zhǔn)確性和精密度下，能夠定量測(cè)定樣品中被分析物的最低量。

2.8 耐用性

分析方法的耐用性是指在實(shí)驗(yàn)參數(shù)被故意地發(fā)生細(xì)小改變時(shí)，檢測(cè)不受影響的能力，用于說(shuō)明正常使用時(shí)的可靠性。

從目前國(guó)內(nèi)提交的申報(bào)資料來(lái)看，檢測(cè)限和定量限評(píng)價(jià)一般采用信噪比的方法來(lái)確定，存在問(wèn)題較小，專屬性研究也較為完善，線性和范圍報(bào)告也基本全面，存在問(wèn)題較大或者爭(zhēng)議較多的是準(zhǔn)確度和精密度的數(shù)據(jù)報(bào)告。

ICH Q2( Ｒ1) 要求準(zhǔn)確性應(yīng)通過(guò)在樣品中加入已知量的被分析物測(cè)得的百分回收率或平均值與實(shí)測(cè)值的差異及其置信區(qū)間來(lái)報(bào)告。從目前的申報(bào)資料來(lái)看，絕大多數(shù)申請(qǐng)人選擇報(bào)告平均百分回收率來(lái)說(shuō)明方法的準(zhǔn)確度，因?yàn)榇朔N方法較為直觀和方便統(tǒng)計(jì)，并且可以參考藥典要求對(duì)分析方法的準(zhǔn)確度進(jìn)行簡(jiǎn)單的評(píng)判。

經(jīng)查詢《中華人民共和國(guó)藥典》2020 年版四部通則9101［4］“分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則”項(xiàng)下，關(guān)于準(zhǔn)確度和精密度的數(shù)據(jù)要求的參考值見(jiàn)表2。部分申請(qǐng)人提出某些方法難以滿足上述要求。這里要說(shuō)明的是表2 中給出的回收率和精密度數(shù)據(jù)要求僅為參考值，建議一般的分析方法應(yīng)該滿足上述的準(zhǔn)確度和精密度要求。但對(duì)于達(dá)不到上述要求的分析方法，申請(qǐng)人只要能證明建立的分析方法的準(zhǔn)確度和精密度能夠滿足檢測(cè)目的要求，如果分析方法造成OOS 的概率可接受，那么該方法仍可用。

分析方法的誤差主要來(lái)自驗(yàn)證項(xiàng)目的準(zhǔn)確度和精密度，但某一分析方法可能造成OOS 的概率或總的誤差，從目前的方法學(xué)驗(yàn)證結(jié)果中很難得到結(jié)論。目前已經(jīng)有許多機(jī)構(gòu)及組織注意到這一點(diǎn)，在完成一種方法學(xué)驗(yàn)證后，期望得到該方法適用的結(jié)論，就需要給出其可能造成誤測(cè)的總概率，這樣能更好地運(yùn)用此方法。

目前USP-NF1210-2018 已經(jīng)提出對(duì)準(zhǔn)確度和精密度進(jìn)行合并驗(yàn)證［5］，從而得出分析方法的總誤差。ICH Q2( Ｒ2) 在修訂過(guò)程中也提出建議在方法學(xué)驗(yàn)證數(shù)據(jù)報(bào)告時(shí)需報(bào)告總的方法誤差。

總之，分析方法是為檢測(cè)目的而建立的，驗(yàn)證的目的就是為了證明分析方法的適用性，但適用性也是相對(duì)的。建立一個(gè)誤差為零的分析方法是每個(gè)分析工作者的終極目標(biāo)，但也是一個(gè)不可能完成的目標(biāo)。分析方法驗(yàn)證的真實(shí)目的就是了解該方法最終提供給我們的數(shù)據(jù)的真實(shí)程度。