中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

膠乳試劑研發(fā)流程及要點(diǎn)

膠乳免疫比濁法是目前非常主流的一種免疫檢測(cè)方法，它的基本測(cè)定原理是：抗原抗體在緩沖液中快速形成抗原抗體復(fù)合物，使反應(yīng)液出現(xiàn)濁度，透光率下降。在一定的比例范圍內(nèi)，反應(yīng)液的濁度和抗原抗體的量呈線性相關(guān)關(guān)系。

實(shí)際使用中，一般保持反應(yīng)液中抗體過(guò)量，形成的復(fù)合物會(huì)隨著樣本中抗原量增加而增加，反應(yīng)液的濁度亦隨之增加，與一系列的標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，即可計(jì)算出受檢物質(zhì)的含量。

膠乳比濁試劑研發(fā)周期長(zhǎng)，步驟復(fù)雜，需要關(guān)注的因素較多。今天小編就為大家梳理一下膠乳免疫比濁試劑的研發(fā)流程，希望對(duì)各位老師的研發(fā)工作有所幫助。

01 項(xiàng)目立項(xiàng)

這一步一般是公司的市場(chǎng)部或者研發(fā)主管根據(jù)公司的規(guī)劃或者市場(chǎng)情況，選擇做某個(gè)系列的某些項(xiàng)目，在此不過(guò)多介紹。

02 選擇抗原、抗體、膠乳微球

膠乳比濁試劑研發(fā)最重要的步驟就是抗原抗體和膠乳微球的選擇。常規(guī)生物原料方面，國(guó)內(nèi)的原料廠家已經(jīng)做得相當(dāng)不錯(cuò)，性價(jià)比高，且貨期、售后都更有保證。但遇到特殊項(xiàng)目，就需要在全球范圍內(nèi)尋找了。

抗原抗體的選擇主要是對(duì)比其特異性。我們需要特異性強(qiáng)的抗體，但并非越強(qiáng)越好?？贵w特異性強(qiáng)，靈敏度高。但過(guò)高的特異性會(huì)導(dǎo)致試劑的信號(hào)過(guò)高，在高濃度時(shí)容易超出儀器的檢測(cè)限，出現(xiàn)陰陽(yáng)性區(qū)分不開(kāi)的問(wèn)題。

在膠乳微球的廠商中，雖然近幾年國(guó)內(nèi)外都有不少新廠商涌現(xiàn)，但JSR仍然是全球最主要的膠乳微球生產(chǎn)供應(yīng)商。在時(shí)間成本高昂的生化試劑研發(fā)中，選擇一家可信賴的廠商，可以節(jié)省下很多研發(fā)時(shí)間。選擇膠乳微球，主要是對(duì)比粒徑：粒徑越大，靈敏度越高；粒徑越小，線性越長(zhǎng)。一般情況下，靈敏度大于100ng/mL的，可以試用200nm以下的微球，靈敏度小于100ng/mL的可以先試用200nm以上的微球。當(dāng)一個(gè)微球沒(méi)辦法同時(shí)滿足靈敏度和線性要求時(shí)，可以大球和小球混用，多為小球中混入大球。（注意：相同粒徑的微球，也有可能因?yàn)楸砻骠然康牟煌憩F(xiàn)不一樣。）。

常見(jiàn)膠乳比濁法檢測(cè)項(xiàng)目

03 確定反應(yīng)流程

膠乳比濁試劑不同項(xiàng)目的反應(yīng)流程大致是一樣的，一般分為1步法和2步法。2步法會(huì)比1步法多出1-2步離心、重懸的步驟（具體步驟與磁珠包被抗體的1步法和2步法類似，詳情可點(diǎn)擊如下鏈接查看→技術(shù)丨化學(xué)發(fā)光免疫分析中羧基與Tosyl磁珠包被抗體方法及注意事項(xiàng)）。微球粒徑越小，越難離心。所以一般情況下，使用大粒徑微球，試劑性能要求高的項(xiàng)目?jī)A向使用2步法，使用小粒徑的項(xiàng)目?jī)A向使用1步法。

04 調(diào)整反應(yīng)條件

影響試劑性能的除了前面提到的抗原、抗體和膠乳微球外，還有各步反應(yīng)的條件，比如PH，活化劑用量，溫度，反應(yīng)時(shí)間，溶液的離子強(qiáng)度，抗體用量，封閉緩沖液或者封閉劑的選擇等等（封閉劑如何選擇的相關(guān)內(nèi)容可點(diǎn)擊如下鏈接查看→頭條丨天然VS合成：封閉劑如何選？）。每個(gè)條件都需要優(yōu)化到較好的狀態(tài)且達(dá)到平衡，才能長(zhǎng)時(shí)間的保持試劑性能的穩(wěn)定。

05 驗(yàn)證試劑性能

試劑性能的驗(yàn)證包括包被結(jié)束時(shí)和對(duì)照試劑的對(duì)比以及長(zhǎng)期穩(wěn)定性的監(jiān)測(cè)。一般長(zhǎng)期穩(wěn)定性檢測(cè)至少要在1年以上。經(jīng)過(guò)1年的低溫保存，性能和初始時(shí)相差在要求范圍內(nèi)則可認(rèn)定合格。在化學(xué)領(lǐng)域，化學(xué)物質(zhì)在37℃保存1周可以近似于在2-8℃保存1年。但生化試劑中包含各種蛋白質(zhì)，沒(méi)有辦法簡(jiǎn)單地將37℃保存1周和2-8℃保存1年劃上等號(hào)。所以雖然很多廠家會(huì)通過(guò)37℃-1周的加速實(shí)驗(yàn)來(lái)快速驗(yàn)證試劑的穩(wěn)定性，但是提交注冊(cè)，必須要拿到1年以上的實(shí)時(shí)穩(wěn)定性數(shù)據(jù)。