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前言

 

隨著兩款CAR-T產(chǎn)品的獲批上市，國內(nèi)細胞治療行業(yè)也逐步進入了成熟期。而這個時期的重要標志之一就是政策明確、法規(guī)細化。事實上，從2009年細胞治療以“第三類醫(yī)療技術(shù)”方式監(jiān)管所代表的行業(yè)探索期、到2017年首個細胞治療政策《細胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》所代表的行業(yè)發(fā)展期，再到后來藥學、非臨床和臨床都有了各自的指導(dǎo)原則。

 

如今，法規(guī)更進一步細化到了細胞治療藥學板塊中的一個子內(nèi)容，這也就是2022年5月頒布的《體外基因修飾系統(tǒng)藥學研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》（下文以“基因載體指導(dǎo)原則”代稱）。這無疑是給細胞治療行業(yè)發(fā)展提供了更為細致清晰的指引。鑒于此，本文將以《基因載體指導(dǎo)原則》與前序政策法規(guī)的對比為線索，重點分析其中新增的八個重要內(nèi)容，并對政策變化趨勢進行說明和剖析，以供業(yè)內(nèi)同行參考與交流。

 

基因載體是CART的從屬性產(chǎn)品

 

《基因載體指導(dǎo)原則》的適用范圍是“體外基因修飾系統(tǒng)”（下文以“基因載體”指代），具體指用來生產(chǎn)CART類產(chǎn)品的慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等。基因載體在監(jiān)管角度如何定位一直存在諸多爭議。一方面，基因載體不是一般意義上的生物制品，而是CART的生產(chǎn)原材料之一；另一方面，基因載體又不同于普通的生產(chǎn)原材料。例如，諾華的Kymriah®在IND期間遞送FDA的審評材料中就清晰闡明，組成CART的兩個主要元素（major element）就是遞送CAR基因的慢病毒載體、以及承載CAR基因的T細胞。在這份IND材料中，慢病毒被稱為附屬產(chǎn)品（accessory product），定位與CART產(chǎn)品類似，且明顯區(qū)別于其他生產(chǎn)原材料。國內(nèi)之前的政策一直未明確基因載體的定位，如2017年《細胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》將其與磁珠、培養(yǎng)基等一起劃歸在“其他生產(chǎn)用材料”中，但又特別指出基因載體“可作為終產(chǎn)品的物質(zhì)組成”，就是這個問題的具體體現(xiàn)。另外，不得不提到，CART生產(chǎn)工藝中除了換液清洗這種常規(guī)操作之外，是沒有專門去除慢病毒的步驟的，因此慢病毒會隨CART一起進入人體的（雖然數(shù)量很少），而這無疑帶來了臨床風險。

 

本次《基因載體指導(dǎo)原則》首次提出了基因載體是從屬于CART的特殊產(chǎn)品這一理念，并點明基因載體“雖與體內(nèi)基因治療產(chǎn)品有相似之處，但又有別于體內(nèi)基因治療產(chǎn)品”。這是監(jiān)管上的一大突破。這種準確且細致的定位為一系列問題明確了解決思路。例如，作為細胞產(chǎn)品的從屬性產(chǎn)品，基因載體的風險評估就不必僅局限于自身的生產(chǎn)質(zhì)控流程，而可以“在細胞終產(chǎn)品生命周期內(nèi)進行分析”。質(zhì)量控制中，也因為基因載體“要經(jīng)過體外培養(yǎng)、換液清洗，以及細胞終產(chǎn)品放行檢測”，而使得RCL等風險點可以采用病毒階段與細胞階段聯(lián)合控制的方式完成。此外，基因載體的序列確認不必一定要依常規(guī)進行病毒測序，而可以將其轉(zhuǎn)導(dǎo)至細胞中后采用酶切、qPCR等方法檢測細胞獲得。這樣不僅更為合理，也利于企業(yè)明確工作重點和節(jié)約成本。

 

本條目為此次《基因載體指導(dǎo)原則》中最重要的新內(nèi)容，其影響力滲透在生產(chǎn)、質(zhì)控等多個方面。

 

細致入微的分類

 

《基因載體指導(dǎo)原則》的適用范圍是細胞治療類產(chǎn)品所使用的基因載體。這本身就是一個非常具體的類別。直接人體給藥的基因產(chǎn)品不在《基因載體指導(dǎo)原則》的范圍之內(nèi)，非基因編輯類細胞治療產(chǎn)品（例如CTL、CIK）也不涉及。因此，《基因載體指導(dǎo)原則》真正相關(guān)的，只有CART以及泛CART類產(chǎn)品，如CAR-NK、TCR-T、CAR-γδT等。

 

而《基因載體指導(dǎo)原則》的內(nèi)容也將“細致”兩個字落到了實處，整體按照不同條件又細分了多個子類別，例如逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒/非病毒載體的不同要求、IND/BLA/臨床期間變更對應(yīng)的不同風險點、直接制備細胞/建庫后制備細胞的不同情形等。并且在大多數(shù)子類別下面都還帶有針對性的解釋說明，可以說是非常細致了。

 

這份細致導(dǎo)致整個指導(dǎo)原則非常的長。如果不是專門研讀政策的話，根據(jù)需求看對應(yīng)章節(jié)就行了。

 

“原則上應(yīng)符合GMP”

 

這句話出現(xiàn)在《基因載體指導(dǎo)原則》的“一般原則”章節(jié)，原話是“基因修飾系統(tǒng)的制備全過程原則上應(yīng)符合藥品生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范（GMP）的要求，具體的要求根據(jù)其使用情形的不同可具體問題具體分析。”

 

“原則上應(yīng)符合GMP”的潛臺詞不言而喻。這句話比較容易讓人興奮，也容易被斷章取義。但是，如果結(jié)合《基因載體指導(dǎo)原則》的整體思路，以及聯(lián)系CDE對細胞治療“遵循一般規(guī)律，兼顧特殊性”的一貫態(tài)度，筆者傾向這句話是不適用慢病毒、逆轉(zhuǎn)錄病毒等常見情況的。因為慢病毒實在沒什么特殊性使其可以不遵循GMP。這句話反而更適合基因修飾后再建庫的細胞產(chǎn)品，例如GM-K562以及類似產(chǎn)品。但此類產(chǎn)品在國內(nèi)并不多見。

 

值得一提的是，這是第三次在細胞治療相關(guān)政策中出現(xiàn)類似的表述。其他兩次分別是在2017年《細胞治療產(chǎn)品研究與評價技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）政策解讀》中關(guān)于是否可以免除動物實驗、以及2019年《細胞治療產(chǎn)品申報臨床試驗藥學研究問題與解答（第一期）》中質(zhì)粒生產(chǎn)是否遵循GMP的章節(jié)。

 

基因載體與細胞產(chǎn)品的監(jiān)管差異

 

雖然是細胞產(chǎn)品的從屬性產(chǎn)品，基因載體與細胞產(chǎn)品在監(jiān)管思路上頗有不同之處。這種不同在《基因載體指導(dǎo)原則》的多個章節(jié)均有體現(xiàn)?？傮w來說，基因載體的要求往往高于細胞產(chǎn)品。例如，基因載體在IND階段就需要“建立相對穩(wěn)定的制備工藝”，質(zhì)量研究也不像細胞產(chǎn)品那樣只需要“完成安全性相關(guān)的質(zhì)量研究”即可。此外，基因載體的質(zhì)量標準制定依據(jù)包括“質(zhì)量設(shè)計、質(zhì)量研究、驗證研究、多批檢測和穩(wěn)定性結(jié)果”等多個項目，但卻沒有和細胞產(chǎn)品一樣的“依據(jù)臨床試驗批次的檢測數(shù)據(jù)制定標準限度”的提法。

 

從注冊角度來說，這種差異是符合預(yù)期的。因為基因載體更貼近傳統(tǒng)生物制品，也不具備個性化強、有效期短等特點，因此也就更少的享受“兼顧特殊性”所帶來的政策寬松。這是CART產(chǎn)品藥學板塊的特點之一，就是質(zhì)粒、病毒、細胞等各個環(huán)節(jié)的法規(guī)要求存在理念性差異。從業(yè)公司應(yīng)對這種差異予以重視，以避免在不同環(huán)節(jié)的工作中出現(xiàn)誤判。

 

不同時期的要求：IND、BLA和工藝變更

 

與免疫細胞指導(dǎo)原則類似，《基因載體指導(dǎo)原則》明確了在IND、BLA以及臨床期間工藝變更的不同要求。其中，IND階段的要求包括識別基因設(shè)計方面的風險、建庫并檢定、評估生產(chǎn)原材料安全性、相對穩(wěn)定的制備工藝、適當?shù)馁|(zhì)量標準。BLA階段主要就是充分的工藝開發(fā)和工藝驗證。如需進行工藝變更，則應(yīng)在確證性臨床前完成，主要工作內(nèi)容包括在多批次數(shù)據(jù)積累的基礎(chǔ)上，完成CQA、雜質(zhì)、風險的可比性研究，并且還要在新工藝基礎(chǔ)上完成穩(wěn)定性和包材相容性研究。

 

RCL：最重要的風險點

 

CDE對于RCL一貫予以高度重視。此次《基因載體指導(dǎo)原則》中，RCL更是唯一一個貫穿全文的風險點。具體包括：

 

設(shè)計上預(yù)防

 

在載體設(shè)計時就應(yīng)采取減低RCL風險的措施，例如將gag/pol和rev分拆到不同質(zhì)粒中。

過程中控制

 

主要是在生產(chǎn)上游階段選擇合適時間點檢測RCL。值得一提的是，在下游和病毒成品章節(jié)中沒有RCL的相關(guān)要求。

殘留需計算

 

RCL的質(zhì)量標準制定依據(jù)應(yīng)該結(jié)合CART給藥劑量和檢測下限來估算。

 

其他內(nèi)容還包括檢測點設(shè)置（病毒收獲液、EOPC、細胞成品）、檢測方法（細胞培養(yǎng)法、qPCR法）、檢測指標（p24, 逆轉(zhuǎn)錄酶、psi-gag、VSV-G）等內(nèi)容。

 

總體來說，RCL相關(guān)內(nèi)容看起來多而雜，但主要是增加了更多的細節(jié)要求，在檢測時間、方法等核心方面并沒有太大變化。

 

生產(chǎn)規(guī)模與細胞產(chǎn)品掛鉤

 

病毒載體作為CART的從屬性產(chǎn)品，其生產(chǎn)規(guī)模是與CART產(chǎn)品相關(guān)聯(lián)的。事實上，目前慢病毒工藝達到每批幾百人份甚至更多的批產(chǎn)量是完全可行的，但對應(yīng)時間內(nèi)往往不會有如此大數(shù)量的CART生產(chǎn)需求。例如，一期臨床如果采用3+3設(shè)計的話一年內(nèi)患者數(shù)量不會超過20例，需求的慢病毒量也就沒多少。因此，相比于細胞產(chǎn)品，慢病毒的產(chǎn)能大多數(shù)時候是溢出的。此次《基因載體指導(dǎo)原則》明確提出“病毒載體制備規(guī)模需與細胞終產(chǎn)品研究階段相適應(yīng)”正是針對這個問題，提醒企業(yè)在病毒生產(chǎn)規(guī)模方面不必過度投入。

 

另一方面，部分初創(chuàng)型企業(yè)仍處于實驗室工藝向規(guī)模工藝的轉(zhuǎn)變過程中，會存在病毒批產(chǎn)量較低的情況（一般來說，凈產(chǎn)量低于20人份/批算較低）?！痘蜉d體指導(dǎo)原則》專門提出 “對于較小的規(guī)模，建議關(guān)注批間一致性”，也是因為此類問題在IND審理過程中頻繁出現(xiàn)，而導(dǎo)致CDE特意在此予以提醒。

 

質(zhì)量研究要求整合特征分析

 

由于病毒載體是CART的從屬性產(chǎn)品，因此《基因載體指導(dǎo)原則》的質(zhì)量研究部分總體要求是不高的。其中唯一比較特殊的條目就是整合特性分析，具體研究內(nèi)容包括優(yōu)勢插入位點、插入拷貝數(shù)、優(yōu)勢克隆異常生長等項目。這部分其實并非新內(nèi)容，但之前一般是放在非臨床部分中，例如2021年頒布的《基因修飾細胞治療產(chǎn)品非臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則（試行）》就有專門章節(jié)進行闡述。因此，相關(guān)研究問題可以通過引用非臨床部分的結(jié)果來解決。但是，一般質(zhì)控人員可能不會留意到非臨床的工作內(nèi)容，這就會導(dǎo)致工作進度受阻或者資源重復(fù)投入。

 

此類問題并非孤立存在，而是廣泛滲透在細胞治療各個藥學板塊中的。例如，免疫細胞質(zhì)量研究中的信號通路研究一般也是需要非臨床部門協(xié)助，單采過程研究（優(yōu)化單采循環(huán)量、抗凝劑等參數(shù)）則需要臨床部門協(xié)助。鑒于此，注冊人員需要對此類問題予以針對性協(xié)調(diào)。

 

小結(jié)

 

細胞治療類產(chǎn)品的出現(xiàn)對監(jiān)管和被監(jiān)管方同時提出了挑戰(zhàn)。目前，我國監(jiān)管機構(gòu)已經(jīng)充分認識到了細胞治療產(chǎn)品的特殊性，并針對性的制定了多部政策或指導(dǎo)原則，以更好的適應(yīng)行業(yè)需求、促進行業(yè)發(fā)展。對業(yè)內(nèi)公司而言，對政策法規(guī)的系統(tǒng)性解讀可以快速捋清監(jiān)管要求，為自家產(chǎn)品制定清晰的開發(fā)計劃，并在注冊申報過程中做出正確的決定。