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1，什么是攜帶污染

 

根據(jù)《YY/T0654-2017全自動(dòng)生化分析儀》標(biāo)準(zhǔn)中的3.3條所述：

 

攜帶污染（carry over）:由測(cè)量系統(tǒng)將一個(gè)檢測(cè)樣品反應(yīng)攜帶到另一個(gè)檢測(cè)樣品反應(yīng)的分析物不連續(xù)量，由此錯(cuò)誤地影響了另一個(gè)檢測(cè)樣品的表現(xiàn)量。

 

標(biāo)準(zhǔn)的定義總是嚴(yán)謹(jǐn)而又晦澀的，讓我們用大白話來(lái)翻譯翻譯，什么是攜帶污染。

 

因?yàn)槊恳淮螠y(cè)試后都可能存在殘留物，這個(gè)殘留物可能影響下一次的測(cè)試結(jié)果，就導(dǎo)致了攜帶污染的產(chǎn)生。

 

2，攜帶污染如何產(chǎn)生

 

攜帶污染中有兩個(gè)關(guān)鍵詞，一個(gè)是“殘留物”，另一個(gè)是“有影響”。

 

在每一個(gè)測(cè)試的過(guò)程中，殘留物是必定存在的。法證之父艾德蒙·羅卡曾經(jīng)說(shuō)過(guò)，凡走過(guò)必留下痕跡。

 

有殘留物未必有影響，就像人與細(xì)菌共存的幾百萬(wàn)年，都可能相安無(wú)事。有殘留物，也未必能被探測(cè)到。

 

IVD攜帶污染的產(chǎn)生，本質(zhì)上是由于共用零部件所產(chǎn)生的，包括但不限于樣本針、試劑針、反應(yīng)杯、攪拌棒等。

 

盡管我們對(duì)樣本針、試劑針、比色杯、攪拌棒等零部件進(jìn)行清洗的動(dòng)作，但清洗的本質(zhì)是對(duì)殘留物的沖洗和稀釋，這導(dǎo)致我們沒有辦法從1到0，而只能無(wú)限接近于0。

 

3，攜帶污染如何測(cè)試

 

既然攜帶污染無(wú)法避免，那我們就需要對(duì)攜帶污染進(jìn)行測(cè)試，以確定當(dāng)前的攜帶污染水平是否讓上一次測(cè)試影響了下一次測(cè)試的結(jié)果。不同類型的儀器的攜帶污染測(cè)試方案略有不同，但大體的思路上都是一致的。以下是化學(xué)發(fā)光、生化、流式的測(cè)試方法。

 

《YY/T 1155-2019全自動(dòng)化學(xué)發(fā)光免疫分析儀》標(biāo)準(zhǔn)5.5條：

 

 

《YY/T0654-2017全自動(dòng)生化分析儀》標(biāo)準(zhǔn)6.7條：

 

 

《YY/T 0588-2005流式細(xì)胞儀》標(biāo)準(zhǔn)5.10條：

 

 

以上三種方式公式各異，粗看起來(lái)測(cè)試方案有所不同，本質(zhì)上都是一樣的。合并最簡(jiǎn)單的公式如下：

 

 

其中，H代表高濃度樣本，L代表低濃度樣本，的含義為高濃度原液，L1為低濃度樣本第1次測(cè)試，L3為低濃度樣本第3次測(cè)試?？蓙?lái)源于前置的測(cè)試結(jié)果，亦可來(lái)源于當(dāng)次實(shí)驗(yàn)測(cè)試的結(jié)果。

 

測(cè)試的順序?yàn)榈?次高濃度—第2次高濃度-第3次高濃度-第1次低濃度-第2次低濃度-第3次低濃度.

 

4，Q&A

 

由于研sir不是制定標(biāo)準(zhǔn)的專家，在這里只能是妄加猜測(cè)，有說(shuō)的不對(duì)的地方，你也不能拿我怎么樣。

 

Q1為什么低濃度的樣本要測(cè)3次？

 

答：第1次低濃度測(cè)試為最直接影響的樣本,經(jīng)過(guò)3次低濃度測(cè)試后，理論上認(rèn)為，系統(tǒng)的攜帶污染已接近于零。例如，即使每次的攜帶污染為10-2，那么3次測(cè)試之后，攜帶污染率為10-6，除了特濃樣本和超敏項(xiàng)目，基本上沒有影響。所以L3可以認(rèn)為是系統(tǒng)本身的空白樣本，但不為零；L1為被污染的樣本；L2只是作為一個(gè)過(guò)渡測(cè)試的樣本，在計(jì)算中不列入。

 

Q2為什么高濃度的樣本要測(cè)3次？

 

答：可能性1：由于很多項(xiàng)目前沒有進(jìn)行前置的濃度測(cè)定，希望通過(guò)3次高濃度測(cè)試，來(lái)確定高濃度樣本的濃度H原。只測(cè)1次太不嚴(yán)謹(jǐn)，有一定的隨機(jī)性，測(cè)3次取個(gè)平均值，更可靠一點(diǎn)。從這個(gè)角度看，生化分析儀和化學(xué)發(fā)光分析儀都沒有重復(fù)測(cè)3次的必要，因?yàn)橐呀?jīng)通過(guò)前置測(cè)試測(cè)得了原液的濃度，在公式中也沒有體現(xiàn)3次高濃度樣本結(jié)果的使用。但在流式細(xì)胞中，由于測(cè)的是球的個(gè)數(shù)，一般來(lái)說(shuō)，是沒有辦法去前置標(biāo)定的，除非微球廠家明確給定微球數(shù)量。

 

可能性2：1次高濃度測(cè)試不足以污染整個(gè)系統(tǒng)，需要3次高濃度測(cè)試以保證污染的程度。如果從這個(gè)角度去看，所有的儀器都需要通過(guò)3次高濃度的樣本測(cè)試。

 

Q3公式中分子與分母同時(shí)減去L3的意義？

 

答：去除空白樣本測(cè)試的本底，由于在分母中H原>>L3,這個(gè)減法的意義不是很大，但為了嚴(yán)謹(jǐn)起見，還是保留。分子中L1和L3的量級(jí)不是差很多，可能對(duì)結(jié)果造成很大的影響，這個(gè)是必須要減的。

 

Q4從設(shè)計(jì)上如何降低攜帶污染？

 

答：1、清洗量=清洗速度X清洗時(shí)間；2、清洗方式（角度、速度、超聲波等）；3、清洗液成分；4、被污染物的材質(zhì)；5、項(xiàng)目測(cè)試順序安排等；6、定期維護(hù)等。