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嘉峪檢測網 2022-08-08 14:18
FDA關于ANDA強制降解試驗的觀點。
強制降解試驗
強制降解試驗也稱破壞性試驗，試驗目的明確。預測原料藥的穩(wěn)定性或影響制劑的純度、有效性和安全性的因素。
了解不同破壞條件下藥物的降解產物和降解途徑。強制降解試驗可以為分析方法的建立、說明書的制定和處方設計的確定等提供有益的參考。
強制降解試驗存在的問題
仿制藥申請時提供的強制降解試驗研究數據不完整是申報的一大缺陷。美國仿制藥申報常見缺陷解讀（CMC部分）。
原料藥在各破壞條件下均不產生降解。請重復破壞試驗以獲得足夠的降解產物，若沒有產生降解，請?zhí)峁┮罁?/span>
如果破壞條件過于劇烈，導致大部分藥物均被降解。請用溫和的破壞條件或減少樣品暴露時間以產生相關的降解產物。
請注意：即使已經用含量測定的方法對破壞的樣品進行了檢測，為了驗證有關物質的檢測方法具有穩(wěn)定性指示功能，破壞的樣品也要應用有關物質的方法進行測定。
請?zhí)峁┧龅尿炞C試驗數據，以證明用以檢測未破壞樣品和破壞樣品的方法能夠檢測出所有的降解雜質。
請對破壞樣品中已知和未知的降解產物進行列表總結。
請確定檢測軟件對峰純度檢測的峰高要求。
請說明破壞樣品質量不守衡的理由。
請鑒別原料藥與輔料相互作用產生的降解產物。
光穩(wěn)定性研究表明藥品對光敏感，請解釋這一點是如何在分析方法，生產工藝以及藥品運輸過程反映出來的。
如何進行強制降解試驗
降解條件
典型的強制降解主要包括四種機制：高溫、水解、氧化和光降解。
選擇適當的破壞條件，如酸堿和氧化劑的濃度、破壞溫度、適宜的破壞時間，以實現(xiàn)樣品最佳降解程度。
樣品破壞過度，會產生二次降解產物，這不是降解試驗的目的。因此，控制樣品降解達到預期水平是十分必要的。
通常認為樣品降解量應在5~20%之間。對于含量限度為標示量的90%~110%的小分子藥物，即使在文獻中有更廣泛的推薦范圍作為參考（例如10~30%），通常允許10%的降解量。
光穩(wěn)定性
光穩(wěn)定性試驗是強制降解試驗的重要組成部分，對光敏感藥物尤為重要。ICH Q1B指導原則提出了新原料藥和制劑的光穩(wěn)定性試驗條件。
原料藥、固體/液體制劑，應暴露在總照度不低于1.2×106 Lux •hr，近紫外能量不低于200w•hr/ m2的條件下，相同樣品應同時暴露在日光燈和近紫外燈下?？煽刂坪线m的溫度以減少局部溫度變化效應。
熱穩(wěn)定性
熱破壞試驗條件（例如：干熱破壞和濕熱破壞），應比ICH Q1A中推薦的加速試驗條件劇烈。
固體原料藥和制劑應同時暴露于干熱和濕熱條件下，而液體制劑可以暴露于干熱條件下。
建議破壞溫度應高于加速試驗溫度的10℃，相對濕度為75%或者更高。破壞試驗也可以在更高溫度條件下進行短時間破壞。對破壞樣品進行多個時間點檢測，能夠充分提供降解速率、一級與二級降解產物的信息。
酸堿水解
原料藥與制劑應在常溫或更高溫度條件下，以溶液狀態(tài)進行酸堿水解破壞試驗，酸堿種類和濃度的選擇取決于藥物本身的特點。
其中一種酸堿破壞試驗方案為樣品于室溫條件下放置，在不同pH條件下破壞兩周，并且破壞程度建議應不高于15%。
酸降解一般采用0.1mol/L-1.0mol/ L的鹽酸或硫酸，堿降解采用0.1mol/L-1.0mol/ L的氫氧化鈉或氫氧化鉀溶液。
了解化合物相關性質對于選擇破壞條件是有用的，例如，一個化合物含有酯基，對堿是不穩(wěn)定的，則可選擇較低濃度的堿進行破壞，不同時間點對樣品進行檢驗，了解降解速率和區(qū)分一級、二級降解產物。
氧化破壞
氧化破壞試驗相對較復雜，過氧化氫應用較廣泛。
氧化劑種類和濃度的選擇取決于藥物本身的性質。原料藥在溶液狀態(tài)下，制劑在溶液或固體狀態(tài)下進行氧化破壞。
在不同時間點對樣品進行檢驗，選擇所需的降解水平，不同的降解條件會產生相同或不同的降解產物，降解的途徑和程度取決于樣品的官能團和降解條件。
分析方法
試驗方法
首選反相高效液相色譜法：與水和有機溶劑具體良好的相容性，準確度好，靈敏度高，能夠檢測極性化合物。選擇合適的色譜柱、柱溫，調節(jié)流動相的pH值，達到各雜質峰的分離。
低保留，極性較大的雜質會在溶劑峰前出峰。梯度洗脫，流動相中有機相比例由低到高過度，能夠檢測出低保留極性大的化合物和高保留的非極性化合物。
也可以用梯度方法對破壞樣品進行檢測，評估目前的洗脫方法是否能夠對樣品進行有效的檢測，選擇的樣品溶液和流動相應能充分反映和檢測出藥物本身、潛在雜質和降解產物。
破壞樣品的制備方法應盡可能地模擬分析過程中所用的樣品制備方法。對酸堿破壞樣品溶液進行酸堿中和稀釋是必要的。破壞樣品的圖譜應與空白溶液和未破壞樣品的圖譜進行對比，從而確定各降解產物的降解途徑。
分析方法應有足夠的靈敏度以檢測出較低水平的雜質，并且峰響應值應在線性范圍內的峰響應值以下。
分析方法應能檢測到穩(wěn)定性研究過程中產生的所有雜質(濃度為報告限度濃度或更低)，依據ICH的要求和穩(wěn)定性研究結果，來決定降解產物是否應該被鑒定和界定。（小編，強制降解產生雜質不一定要鑒定結構，能鑒定最好，長期，加速中產生的降解雜質需要研究結構）
常規(guī)檢測方法或聯(lián)用技術(LC–MS，LC–NMR)均可應用于降解產物的鑒別和界定。了解各雜質是否存在基因毒性警示結構。
當主峰和雜質峰紫外吸收圖譜相似或者系統(tǒng)噪音水平過高從而掩蓋了雜質或降解產物時，可進行多波長檢測。
具有相同分子量和官能團的化合物會呈現(xiàn)出相似的紫外吸收圖譜。這種情況下，需要改變色譜參數以實現(xiàn)色譜峰的分離。
如果被分析物、雜質和降解產物紫外吸收沒有重疊，則應對樣品進行多波長檢測。
峰純度檢測
峰純度是分析方法開發(fā)的輔助工具，當不同化合物共同洗脫時，依據化合物的光譜特性來反映峰純度指標。
未破壞樣品和破壞樣品的峰純度或峰均勻性是根據二極管陣列檢測器的光譜信息確立的。
質量守衡
通過樣品測量值、所有雜質和降解產物的測量值之和與未破壞樣品初始值接近100%的程度來確定，在計算時適當考慮產生的分析誤差。
盡量使所有的破壞樣品均達到質量守衡。若樣品質量不守衡，應進行深入研究，給出說明。揮發(fā)性雜質的潛在損失、非紫外吸收化合物的形成，不保留雜質，強保留雜質等情況都應被考慮在內。
研究終點
一些穩(wěn)定藥物在任意降解條件下均不會產生降解，可以通過在藥物中加入已知雜質來建立分析方法，同時應保證各峰能夠達到基線分離。
來源：Internet
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