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摘要

 

目的 了解我國病原菌多重核酸檢測試劑盒的分析性能的現(xiàn)狀，特別是檢出限性能的基本情況，為相關(guān)研發(fā)企業(yè)和醫(yī)療機構(gòu)使用者提供參考。

 

方法 根據(jù)體外診斷試劑行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑盒（標(biāo)準(zhǔn)號YY∕T 1725-2020）》，使用“34種細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑國家參考品（批號370026-201801）”對10種不同檢測技術(shù)原理的病原菌多重核酸檢測試劑盒的分析性能做了評估，包括陽性符合率、陰性符合率、重復(fù)性及檢出限等進(jìn)行質(zhì)量評價，并按照國家參考品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)對評價結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計分析。 

 

結(jié)果 10款試劑盒中包括4款呼吸道感染、3款中樞神經(jīng)感染及3款血流感染試劑盒，檢測范圍或病原譜覆蓋8種革蘭陽性細(xì)菌、14種革蘭陰性細(xì)菌及10種真菌和非典型病原體。各試劑盒的陽性符合率、陰性符合率、重復(fù)性及檢出限等分析性能均符合國家參考品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。呼吸道、中樞神經(jīng)及血流感染類試劑盒病原菌譜及檢出限性能差異較大，檢出限的中位值分別為5×103 CFU/ml、1×103 CFU/ml及1×106 CFU/ml；各試劑盒病原菌譜中分布和出現(xiàn)頻率較高的6種病原菌分別為肺炎鏈球菌（檢出限的中位值為5×102 CFU/ml）、金黃色葡萄球菌（3×103 CFU/ml）、流感嗜血桿菌（1×103 CFU/ml）、銅綠假單胞菌（5×104 CFU/ml）、鮑曼不動桿菌（3×106 CFU/ml）及大腸埃希氏菌（5×104 CFU/ml）。結(jié)論 我國已經(jīng)進(jìn)入體外診斷試劑注冊階段的病原菌多重核酸檢測試劑盒均具有較好的準(zhǔn)確性、特異性及重復(fù)性；同時，研發(fā)企業(yè)應(yīng)注意結(jié)合臨床具體的需求，設(shè)計合理的試劑盒病原菌譜，并持續(xù)優(yōu)化檢出限性能。

 

[關(guān)鍵詞] 病原菌；多重核酸檢測；參考品；檢出限

 

病原菌引起的呼吸道、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、血流、胃腸道及生殖道等感染性疾病具有發(fā)病急、進(jìn)展快等特點，且臨床發(fā)病率和病死率較高，對人類健康構(gòu)成嚴(yán)重威脅。近年新型冠狀病毒肺炎（coronavirus disease 2019, COVID-19）疫情發(fā)生以來，臨床繼發(fā)性病原菌合并感染更是會嚴(yán)重威脅COVID-19患者的生命[1-2]。迅速地確定感染病原體對于患者的治療及預(yù)后十分關(guān)鍵。盡管目前臨床傳統(tǒng)的病原菌檢測方法仍以培養(yǎng)及表型鑒定為主，分離培養(yǎng)雖然是病原學(xué)診斷的“金標(biāo)準(zhǔn)”，但檢測周期長、操作繁瑣、敏感性低等已無法滿足臨床診治的需求。與之相比，分子診斷技術(shù)的速度發(fā)展，在突發(fā)性感染的評估、感染早期的發(fā)現(xiàn)、監(jiān)測及病原菌耐藥基因分析等領(lǐng)域發(fā)揮了越來越重要的作用[3-7]。

 

近年來逐漸發(fā)展的病原菌多重核酸檢測技術(shù)，即在一個核酸反應(yīng)體系中同時對多個靶標(biāo)病原菌進(jìn)行檢測，更具有操作簡便、覆蓋病原菌譜廣、能夠分辨混合感染等優(yōu)勢，正受到越來越多的關(guān)注和應(yīng)用。目前，美國FDA已經(jīng)批準(zhǔn)了10余款病原菌多重核酸檢測試劑盒，覆蓋PCR、熔解曲線、恒溫擴增及微陣列核酸芯片等技術(shù)原理；我國藥監(jiān)部門批準(zhǔn)了3款試劑盒[8-9]。然而，多重核酸檢測技術(shù)仍存在一些局限和挑戰(zhàn)。例如，多重反應(yīng)體系研發(fā)難度較大、試劑盒特異性和靈敏度可能會低于單一靶向反應(yīng)體系、試驗操作較為繁瑣及檢測成本較高等；另外，相關(guān)試劑盒在檢測技術(shù)的選擇、檢測范圍或病原譜的設(shè)計及檢出限性能的優(yōu)化等方面也面臨諸多挑戰(zhàn)。因此，為保證病原菌多重核酸檢測試劑盒的質(zhì)量，應(yīng)特別重視相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量控制及評價研究[10]。

 

2018年至今，僅在中國食品藥品檢定研究院完成注冊檢驗的病原菌多重核酸檢測試劑盒就有將近20款，行業(yè)爆發(fā)式發(fā)展的態(tài)勢已然初現(xiàn)。為全面了解我國相關(guān)產(chǎn)品分析性能的基本現(xiàn)狀，針對10款進(jìn)入體外診斷試劑注冊階段的病原菌多重核酸檢測試劑盒的部分分析性能，包括陽性符合率、陰性符合率、重復(fù)性及檢出限性能進(jìn)行了質(zhì)量評價研究。

 

01、材料與方法

 

1.1 評價方案 評價用體外診斷試劑行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑盒（標(biāo)準(zhǔn)號YY∕T 1725-2020）》由項目組牽頭制定并發(fā)布，標(biāo)準(zhǔn)基于“34種細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑國家參考品（批號370026-201801）”，對相關(guān)試劑盒的要求、試驗方法及標(biāo)簽和使用說明書等內(nèi)容進(jìn)行了規(guī)定[10-12]。

 

上述評價用國家參考品由項目組研制并提供，參考品由34種具有特定濃度（CFU/ml）的病原菌組成，包括12株革蘭陽性細(xì)菌（肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、單核細(xì)胞增多性李斯特菌、屎腸球菌、糞腸球菌、表皮葡萄球菌、化膿鏈球菌、滕黃微球菌、馬紅球菌、格氏李斯特菌、緩癥鏈球菌）、16株革蘭陰性細(xì)菌（腦膜炎奈瑟菌、感嗜血桿菌、嗜肺軍團菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌、大腸埃希氏菌、產(chǎn)酸克雷伯菌、陰溝腸桿菌、奇異變形桿菌、粘質(zhì)沙雷氏菌、干燥奈瑟氏菌、熒光假單胞菌、嗜水氣單胞菌、瓊氏不動桿菌、副流感嗜血桿菌）及6株念珠菌（熱帶念珠菌、光滑念珠菌、白色念珠菌、近平滑念珠菌、克柔念珠菌、葡萄牙念珠菌）[10]。

 

1.2 病原菌多重核酸檢測試劑盒 進(jìn)行分析性能質(zhì)量評價研究的10款病原菌多重核酸檢測試劑盒由7家企業(yè)（廣州萬孚生物技術(shù)股份有限公司、蘇州創(chuàng)瀾生物科技有限公司、華大生物科技（武漢）有限公司、梅里埃診斷產(chǎn)品（上海）有限公司、湖南圣湘生物科技有限公司、百康芯（天津）生物科技有限公司、上海捷諾生物科技有限公司）提供，見表1。

 

表1 病原菌多重核酸檢測試劑盒?

注：*. 試劑盒A、E、F和G同時檢測病原菌和病毒；POCT. 即時檢驗。

 

1.3 分析性能質(zhì)量評價 根據(jù)《細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑盒》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)和“34種細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑國家參考品”，按照試劑盒A～J說明書進(jìn)行實驗操作：稀釋參考品至病原菌濃度≥1×105 CFU/ml后，對稀釋樣本檢測1次，評價試劑盒的陽性和陰性符合率進(jìn)行評價；稀釋參考品至病原菌濃度≤檢出限濃度的5倍后，對稀釋樣本重復(fù)檢測10次，評價試劑盒的重復(fù)性；按10倍梯度稀釋參考品至病原菌濃度＜企業(yè)宣稱的檢出限濃度，對各梯度稀釋樣本檢測1次，評價試劑盒的檢出限。

 

1.4 評價標(biāo)準(zhǔn)及結(jié)果分析的評價標(biāo)準(zhǔn) 對于陽性和陰性符合率，試劑盒檢測范圍內(nèi)的病原菌均應(yīng)檢出且與已知種屬相符，不在檢測范圍內(nèi)的均不應(yīng)檢出；對于重復(fù)性，10次重復(fù)檢測結(jié)果，試劑盒檢測范圍內(nèi)的病原菌均應(yīng)檢出且與已知種屬相符；檢出限，檢測經(jīng)10倍梯度稀釋的參考品，試劑盒檢測范圍內(nèi)的病原菌，在檢出限濃度以上時均應(yīng)檢出且與已知種屬相符。對檢出限評價結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計及分類分析。

 

1.5 病原菌多重核酸檢測試劑盒基本情況 進(jìn)行質(zhì)量評價的10款試劑盒A～J，包括4款呼吸道感染試劑盒、3款中樞神經(jīng)感染試劑盒及3款血流感染試劑盒。其中，6款試劑盒僅檢測病原菌，4款（1款呼吸道感染、3款中樞神經(jīng)感染）試劑盒同時檢測病原菌和病毒；4款為全自動核酸即時檢驗（point-of-care testing, POCT），2款為半自動核酸POCT。上述試劑盒的技術(shù)原理，覆蓋目前常見的8種核酸檢測原理，包括熒光定量PCR、巢式PCR、擴增子拯救多重PCR、熔解曲線、恒溫擴增、微流控芯片、微陣列芯片及宏基因組高通量測序技術(shù)。各試劑盒具體信息見表1。

 

對于文中分析的10款試劑盒，其檢測范圍或病原菌譜既有重疊又各不相同。例如，呼吸道試劑盒、中樞神經(jīng)試劑盒及血流試劑盒的病原譜均包含肺炎鏈球菌、金黃色葡萄球菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、鮑曼不動桿菌及大腸埃希氏菌等6種細(xì)菌；百日咳桿菌、嗜肺軍團菌、嗜麥芽窄食單胞菌、卡他莫拉菌、肺炎支原體、肺炎衣原體及煙曲霉等7種細(xì)菌和真菌僅出現(xiàn)在呼吸道感染試劑盒病原譜中；新生和格特隱球菌僅出現(xiàn)在中樞神經(jīng)感染試劑盒病原譜中；化膿鏈球菌、近平滑念珠菌及克柔念珠菌等3種細(xì)菌和真菌僅出現(xiàn)在血流感染試劑盒病原譜中。各試劑盒具體病原菌譜見表2。

 

表2 多重核酸檢測試劑盒的病原菌譜?

注：*. 國家參考品中未覆蓋的病原菌；G+. 革蘭陽性細(xì)菌；G-. 革蘭陰性細(xì)菌；F. 真菌；MP. 肺炎支原體；CP. 肺炎衣原體；√. 該菌在病原菌譜中

 

02、結(jié)  果

 

使用參考品評價陽性和陰性符合率即重復(fù)性，結(jié)果表明病原菌濃度≥1×105 CFU/ml時，在試劑盒檢測范圍內(nèi)的病原菌均能檢出并鑒定為正確的種屬，檢測范圍外病原菌均未檢出，表明試劑盒A～J具有較好的準(zhǔn)確性和特異性；病原菌濃度≤檢出限濃度的5倍時，在試劑盒檢測范圍內(nèi)的病原菌10次重復(fù)檢測均能檢出并鑒定為正確的種屬，表明試劑盒A～J具有較好的重復(fù)性。

 

使用參考品評價檢出限，試劑盒A～J檢測范圍內(nèi)的病原菌的檢出限性能差異較大，從1 CFU/ml～8.5×105 CFU/ml，以下按照4種不同因素進(jìn)行分類分析。

 

① 按呼吸道、中樞神經(jīng)及血流3種感染類型分析試劑盒的病原菌譜檢出限性能，中位值（最小值，最大值）分別為5×103 CFU/ml（15 CFU/ml，5×104 CFU/ml）、1×103 CFU/ml（1 CFU/ml，6×103 CFU/ml）及1×106 CFU/ml（2×103 CFU/ml，8.5×107 CFU/ml）。

 

② 按革蘭陽性和陰性細(xì)菌及真菌3種病原菌種類分析，檢出限的中位值均為5×104 CFU/ml。

 

③ 分析病原菌譜中分布和出現(xiàn)頻率較高的6種菌的檢出限，肺炎鏈球菌為5×102 CFU/ml（15 CFU/ml，5×105 CFU/ml）、金黃色葡萄球菌為3×103 CFU/ml（5×102 CFU/ml，2.5×106 CFU/ml）、流感嗜血桿菌為1×103 CFU/ml（6×102 CFU/ml，1×106 CFU/ml）、銅綠假單胞菌為5×104 CFU/ml（1×102 CFU/ml，1×106 CFU/ml）、鮑曼不動桿菌為3×106 CFU/ml（5×102 CFU/ml，1×107 CFU/ml）及大腸埃希氏菌為5×104 CFU/ml（1 CFU/ml，3×107 CFU/ml）。

 

④按不同檢測原理分析，熒光定量PCR為1×103 CFU/ml（1 CFU/ml，6×103 CFU/ml）、巢式PCR為1×105 CFU/ml（1×102 CFU/ml，8.5×107 CFU/ml）、擴增子拯救多重PCR為2×106 CFU/ml（5×105 CFU/ml，5×106 CFU/ml）、恒溫擴增為5×104 CFU/ml（5×102 CFU/ml，5×104 CFU/ml）、高通量測序為5×102 CFU/ml（1×102 CFU/ml，5×102 CFU/ml）。試劑盒檢出限性能分析情況見圖1。

 

圖1 病原菌多重核酸檢測試劑盒檢出限性能的分析?

 

注：柱狀圖中間的短橫線表示檢出限的中位值，柱狀圖兩端分別表示檢出限的最大值和最小值。各試劑盒病的檢出限性能取log10值進(jìn)行統(tǒng)計分析

 

03、討  論

 

自COVID-19疫情以來，分子診斷技術(shù)在臨床感染的診斷、療效及預(yù)后評估等領(lǐng)域得到越來越多的重視。病原菌引起的感染性疾病，特別是不明原因感染，給人類生命健康帶來嚴(yán)重威脅[17]。隨著分子診斷技術(shù)的發(fā)展及檢測成本的下降，特別是多重核酸檢測技術(shù)的應(yīng)用日益廣泛，相比傳統(tǒng)病原菌檢測技術(shù)具有更好的時效性、準(zhǔn)確性以及靈敏度，使得病原菌的快速精準(zhǔn)診斷不斷的創(chuàng)新和發(fā)展。近年來，美國食品藥品監(jiān)督管理局不僅批準(zhǔn)了10余個病原菌多重核酸檢測試劑盒，更是先后制定并公布了4個相關(guān)指導(dǎo)原則用于規(guī)范此類試劑盒的質(zhì)量[13-16]。本項目組于2018年，先后研制了“34種細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑國家參考品（批號370026-201801）”，并牽頭起草了《細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑盒（標(biāo)準(zhǔn)號YY∕T 1725-2020）》體外診斷試劑行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，從實物標(biāo)準(zhǔn)和文字標(biāo)準(zhǔn)兩方面建立了較為全面的質(zhì)量控制與評價體系，有助于促進(jìn)我國相關(guān)行業(yè)的健康快速發(fā)展，以及保證相關(guān)試劑盒的質(zhì)量[10-12]。

 

病原菌多重核酸檢測試劑盒的檢測原理及技術(shù)組合繁多。本研究中的10款試劑盒涵蓋了8種核酸檢測原理及7種技術(shù)組合（見表1），因此在產(chǎn)品設(shè)計開發(fā)、性能驗證及確認(rèn)過程中需要嚴(yán)格的優(yōu)化及測試，才能使各種技術(shù)的組合達(dá)到性能最優(yōu)配置。一般而言，核酸擴增反應(yīng)體系中引物和探針的數(shù)量越多，即檢測的病原菌數(shù)量越多，以及使用的技術(shù)組合越復(fù)雜，產(chǎn)品研發(fā)的難度越高[18]。例如，試劑盒F、G和J分別為單管檢測12種、14種和22種病原體，其產(chǎn)品研發(fā)的難度遠(yuǎn)高于單管檢測10種以下病原體；試劑盒B為單管檢測7種病原體，但在一個熒光通道中分別使用熒光定量PCR和熔解曲線2種技術(shù)分別檢測2種病原體，因此其產(chǎn)品研發(fā)的難度也高于普通熒光定量PCR試劑盒；試劑盒C和D應(yīng)用微流控技術(shù)，將多個單重反應(yīng)體系疊加從而實現(xiàn)多重核酸檢測，但其使用的環(huán)介導(dǎo)恒溫擴增技術(shù)仍需注意檢出限和穩(wěn)定性的優(yōu)化，同時微流控芯片的大規(guī)模制造也需注意嚴(yán)格控制不良品率[19]。

 

病原菌多重核酸檢測試劑盒的操作復(fù)雜程度、檢測時間及成本控制各有不同，檢測的操作步驟一般分為樣本前處理、核酸提取純化或裂解、靶標(biāo)基因核酸序列擴增、擴增子檢測及結(jié)果報告，不同試劑盒檢測流程的自動化、時間及成本也各不相同，是影響其臨床普及應(yīng)用的重要因素。例如，為提高靈敏度和特異性所選擇的巢式PCR技術(shù)，不僅需要2輪PCR操作，更容易因其擴增子濃度極高而造成實驗室氣溶膠污染及假陽性結(jié)果；而基于微流控技術(shù)“樣本進(jìn)、結(jié)果出”的全自動POCT試劑盒（試劑盒G～J），則能很好地避免污染（見表1），還具有操作容易、檢測時間較短等優(yōu)勢，但其檢測成本要高于手工操作的PCR試劑盒。核酸提取過程較易實現(xiàn)自動化，但由于不同種類病原體（病毒和病原菌）的核酸提取難易程度不同，仍需進(jìn)行優(yōu)化及驗證，本研究中同時檢測病毒和病原菌的4款試劑盒（試劑盒A、E、F及G）中有2款未選擇自動化核酸提取流程（見表1）。試劑盒F的結(jié)果判讀過程為非自動化，需要檢測人員將陽性結(jié)果的Tm值與18個病原體的熔解曲線Tm值范圍逐一比對后進(jìn)行判讀，不僅影響檢測時間，還容易導(dǎo)致檢測效率較低且易出錯。基于宏基因組高通量測序技術(shù)原理的試劑盒E，操作步驟繁瑣、所需測序時間較長且自動化程度低，相比PCR和恒溫擴增等試劑盒不僅有較長的檢測時間和較高的檢測成本，還可能由于復(fù)雜的手工操作導(dǎo)致檢測系統(tǒng)整體的穩(wěn)定性受影響。

 

病原菌多重核酸檢測試劑盒的病原譜及檢出限性能與應(yīng)用場景密切相關(guān)。呼吸道感染檢測試劑盒的病原菌譜，革蘭陰性菌占大多數(shù)，而中樞神經(jīng)感染和血流感染檢測試劑盒的病原菌譜中，革蘭陰性和革蘭陽性菌的占比則差別不大（見表2）。由于病原菌在不同臨床感染樣本中的濃度不同，相應(yīng)試劑盒的檢出限性能也不同。例如，腦脊液樣本一般比較干凈，因此中樞神經(jīng)感染檢測試劑盒（試劑盒E～G）的檢出限較低，有助于更靈敏地檢測到病原菌；血培養(yǎng)陽性樣本中病原菌的濃度一般均較高，對試劑盒（試劑盒H～J）的檢出限要求不高，因此試劑盒在優(yōu)化時可能會更側(cè)重提高特異性，即在反應(yīng)體系中存在極高濃度核酸的情況下應(yīng)避免發(fā)生非特異性擴增；呼吸道樣本中雜質(zhì)較多且存在定植菌，因此相應(yīng)試劑盒（試劑盒A～D）的檢出限處于前兩類試劑盒之間，通過設(shè)計較為均衡的檢出限，既能實現(xiàn)較好的檢測靈敏度，又有助于區(qū)分致病菌和定植菌。

 

本研究使用國家參考品在實驗室內(nèi)對10款適用于呼吸道感染、中樞神經(jīng)感染及血流感染臨床診斷且已經(jīng)進(jìn)入體外診斷試劑注冊階段的病原菌多重核酸檢測試劑盒的分析性能進(jìn)行評價，并重點按照不同影響因素對其檢出限性能進(jìn)行了深入分析。后續(xù)，相關(guān)試劑盒還將通過開展嚴(yán)格的臨床試驗來評價其臨床性能，從而最終驗證其性能能否滿足臨床使用需求。本研究提示，不同病原菌多重核酸檢測試劑盒的技術(shù)原理、靶標(biāo)病原菌數(shù)量、自動化程度及操作復(fù)雜程度等各不相同；此外，適用于不同臨床應(yīng)用場景的試劑盒，其病原菌譜的設(shè)計和檢出限性能的優(yōu)化也各不相同。上述質(zhì)量評價結(jié)果及分析有助于相關(guān)研發(fā)企業(yè)和醫(yī)療機構(gòu)使用者深入了解我國病原菌多重核酸檢測試劑盒分析性能的現(xiàn)狀。

 

參考文獻(xiàn)：

 

[1] 胡明，李緒言，邱海波，等. 新型冠狀病毒肺炎患者繼發(fā)細(xì)菌感染防治的體會與建議[J]. 中華重癥醫(yī)學(xué)電子雜志，2020，6(2):230-232. DOI: 10.3877/cma.j.issn.2096-1537.2020.02.026.

[2] 劉偉，李若瑜. 對新型冠狀病毒肺炎繼發(fā)真菌感染的思考[J]. 微生物與感染，2020，67(1):58-61. DOI: 10.3969/j.issn.1673-6184.2020.01.011.

[3] 曹清. 分子診斷檢測在兒童感染性疾病的臨床應(yīng)用價值及衛(wèi)生經(jīng)濟學(xué)分析[J]. 中華醫(yī)學(xué)信息導(dǎo)報，2021，36(1):21-21. DOI: 10.3760/cma.j.issn.1000-8039.2021.01.134.

[4] 呂晶南，余方友. 分子生物學(xué)技術(shù)在感染性疾病診斷中的應(yīng)用進(jìn)展[J]. 臨床檢驗雜志，2021，39(2):81-85. DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2021.02.01.

[5] 干馳，莫茜，陶悅. PCR技術(shù)在病原菌診斷中的研究進(jìn)展[J]. 中國實驗診斷學(xué)，2020，24(4):149-153. DOI: 10.3969/j.issn.1007-4287.2020.04.047.

[6] 金君，孫仁華，呼邦傳. 血流感染的分子診斷研究進(jìn)展[J]. 中國現(xiàn)代醫(yī)生，2020，58(36):182-187.

[7] 張培金，唐麗玲，錢麗華，等. 碳青酶烯類耐藥肺炎克雷伯菌臨床分布及其耐藥特征[J]. 傳染病信息，2021，34(2):165-168. DOI: 10.3969/j.issn.1007-8134.2021.02.017.

[8] Food and Drug Administration. Nucleic Acid Based Tests-Multiplex Panel[EB/OL]. [2021-08-20]. https://www.fda.gov/MedicalDevices/ProductsandMedicalProcedures/InVitroDiagnostics/ucm330711.htm.

[9] 國家藥品監(jiān)督管理局. 醫(yī)療器械查詢[EB/OL]. [2021-08-20]. https://www.nmpa.gov.cn/ylqx/index.html.

[10] 劉東來，周海衛(wèi)，石大偉，等. 細(xì)菌感染多重核酸檢測試劑參考品的建立[J]. 傳染病信息，2018，31(3):23-28. DOI: 10.3969/j.issn.1007-8134.2021.02.017.

[11] YY/T 1725-2020，細(xì)菌和真菌感染多重核酸檢測試劑盒[S].

[12] 中國食品藥品檢定研究院. 注冊檢驗用體外診斷試劑國家標(biāo)準(zhǔn)品和參考品目錄（第五期）[EB/OL]. [2019-04-10]. https://www.nifdc.org.cn//nifdc/bshff/bzhwzh/bzwztzgg/20190410150800480.html.

[13] Food and Drug Administration. Class II Special Controls Guidance Document Respiratory Viral Panel Multiplex Nucleic Acid Assay[EB/OL]. [2009-10-09]. https://www.fda.gov/downloads/medicaldevices/deviceregulationandguidance/guidancedocuments/ucm180324.pdf.

[14] Food and Drug Administration. Highly Multiplexed Microbiological Medical Countermeasure In Vitro Nucleic Acid Based Diagnostic Devices[EB/OL]. [2014-08-27]. https://www.fda.gov/downloads/MedicalDevices/DeviceRegulationandGuidance/GuidanceDocuments/UCM327294.pdf.

[15] Food and Drug Administration. Class II Special Controls Guideline: Gastrointestinal Microorganism Multiplex Nucleic Acid-Based Assays for Detection and Identification of Microorganisms and Toxin Genes from Human Stool Specimens[EB/OL]. [2015-11-02]. https://www.fda.gov/downloads/MedicalDevices/DeviceRegulationandGuidance/GuidanceDocuments/UCM470559.pdf.

[16] Food and Drug Administration. Class II Special Controls Guideline: Multiplex Nucleic Acid Assay for Identification of Microorganisms and Resistance Markers from Positive Blood Cultures[EB/OL]. [2015-05-27]. https://www.fda.gov/ucm/groups/fdagov-public/@fdagov-meddev-gen/documents/document/ucm448520.pdf.

[17] 焦艷梅, 揣征然, 趙雅琳,等. 2020年全球傳染病重要疫情事件回顧[J]. 傳染病信息, 2021, 34(1):14. DOI: 10.3969/j.issn.1007-8134.2021.01.002.

[18] 劉東來，周海衛(wèi)，王佑春，等. 新型冠狀病毒核酸檢測試劑的發(fā)展現(xiàn)狀[J]. 中華實驗和臨床病毒學(xué)雜志，2020，34(6):582-587. DOI: 10.3760/cma.j.cn112866-20200630-00202.

[19] Reyes DR, Heeren HV, Guha S, et al. Accelerating innovation and commercialization through standardization of microfluidic-based medical devices[J]. Lab on a Chip, 2021, 21(1):9-21. DOI: 10.1039/D0LC00963F.