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嘉峪檢測網(wǎng) 2022-10-01 07:53
摘 要 / Abstract
目的：對近年來雞內(nèi)金質(zhì)量評價研究進展進行總結(jié)，為完善雞內(nèi)金質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、提高質(zhì)量控制技術(shù)水平、保障其臨床效果提供參考。方法：查閱雞內(nèi)金國家標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)及國內(nèi)外相關(guān)研究文獻，對其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)量控制等研究現(xiàn)狀進行整理歸納與分析，剖析存在的問題。結(jié)果和結(jié)論：雞內(nèi)金質(zhì)量評價研究雖取得了一些進展，但質(zhì)控指標(biāo)仍需完善、采收加工標(biāo)準(zhǔn)待具體化、成份與臨床療效關(guān)聯(lián)研究待加強。
Objective:To summarize the research progress on quality evaluation of Galli Gigerii Endothelium Corneum (GGEC) in recent years,and to provide insights for improving the quality standards and quality control techniques for GGEC and guaranteeing its clinical effect.Methods:We summarized and analyzed the relevant literatures on quality standards and processing specifications at home and abroad,and analyzed the existing problems.Results:Although some progress has been made with quality evaluation of GGEC,the quality control index needs to be improved,the harvesting and processing standards need to be specified,and research on the correlation between ingredients and clinical efficacy needs to be strengthened.Conclusion:Some progress has been made in quality evaluation of GGEC,but there are still problems to be solved to ensure the safety and effectiveness of drug use.
關(guān) 鍵 詞 / Key words 雞內(nèi)金 ；質(zhì)量 ；問題
GGEC; quality; problems
雞內(nèi)金又名雞食皮、雞合子、化石膽，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，是雉科動物家雞Gallus gallus domesticus Brisson的干燥沙囊內(nèi)壁。具有健胃消食、澀精止遺、通淋化石的功效，常用于食積不消、嘔吐瀉痢、小兒疳積、遺尿、遺精、石淋澀痛、膽脹脅痛[1]。雞內(nèi)金全國各地均產(chǎn)、來源復(fù)雜、用途廣泛、炮制品多樣，是我國傳統(tǒng)消導(dǎo)藥之一，可藥食兼用，市場需求逐年上升。
據(jù)統(tǒng)計，269 882張內(nèi)科處方中雞內(nèi)金使用頻率達9.68%，排在內(nèi)科用藥頻率的第35位[2]。藥智網(wǎng)數(shù)據(jù)顯示，雞內(nèi)金為山楂麥芽口服液、太子參葡萄糖酸鋅口服液、山楂麥芽片等62種保健品主要原料；是蠶蛹雞內(nèi)金固體飲料、山楂雞內(nèi)金固體飲料和梨果仙人掌雞內(nèi)金壓片糖果的主料。雞內(nèi)金在醫(yī)藥、保健食品、食品等領(lǐng)域應(yīng)用不斷拓展，其質(zhì)量也越來越受到大眾的關(guān)注。由中國食品藥品檢定研究院中藥民族藥檢定所牽頭，安徽省食品藥品檢驗研究院承擔(dān)的“2018年全國中藥飲片專項抽驗——雞內(nèi)金質(zhì)量研究”發(fā)現(xiàn)，市場上存在用鴨內(nèi)金或鵝內(nèi)金冒充雞內(nèi)金的現(xiàn)象[3]。在2019年全國各省中藥材及飲片、中成藥質(zhì)量檢驗督查中還發(fā)現(xiàn)，采用混入泥沙等增重雞內(nèi)金的行為較突出[4]。
本文通過查閱雞內(nèi)金國家標(biāo)準(zhǔn)、地方標(biāo)準(zhǔn)及國內(nèi)外相關(guān)文獻，對其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、質(zhì)量控制等研究現(xiàn)狀進行整理歸納與分析，剖析存在的問題，為完善雞內(nèi)金質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、提高質(zhì)量控制水平、保障其臨床效果提供參考。
1 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)
1.1 國家標(biāo)準(zhǔn)
1963～2020年，共計10版《中國藥典》收錄雞內(nèi)金，并規(guī)定其來源為雉科動物家雞Gallus gallus domesticus Brisson。1963年版《中國藥典》從來源、鑒別、炮制、貯藏等對雞內(nèi)金進行規(guī)定，并認為優(yōu)質(zhì)雞內(nèi)金為個大、完整不破碎、無雜質(zhì)者[5]。1977年版《中國藥典》刪除鑒別項，增加性狀描述，規(guī)定優(yōu)質(zhì)雞內(nèi)金為色黃、少破碎者[6]。從1985年版《中國藥典》開始，刪除優(yōu)質(zhì)雞內(nèi)金描述[7]。1990年版至2020年版《中國藥典》，增加雞內(nèi)金厚度(2mm)[8]。2005年版《中國藥典》，新增水分、總灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物[9]。2010年版《中國藥典》中總灰分限量由2005年版不得過1.0%提升至2.0%，刪除酸不溶性灰分[10]?，F(xiàn)行2020年版《中國藥典》一部規(guī)定了來源、性狀、檢查(水分、總灰分)、浸出物，以及雞內(nèi)金、炒雞內(nèi)金和醋雞內(nèi)金的炮制方法及炒雞內(nèi)金性狀[1]。
1.2 地方標(biāo)準(zhǔn)
雞內(nèi)金全國各地均產(chǎn)，炮制形式多樣，各省(自治區(qū)、直轄市)根據(jù)自身實際情況制定其地方標(biāo)準(zhǔn)。本文收集了相關(guān)地方標(biāo)準(zhǔn)并進行匯總整理。由表1可知，僅《臺灣中藥典》第三版對雞內(nèi)金中有害物質(zhì)進行了規(guī)定。各地方標(biāo)準(zhǔn)中對雞內(nèi)金水分、總灰分、酸不溶性灰分要求不一。臺灣、陜西、北京、江西、廣西、湖南、浙江、上海8地地方標(biāo)準(zhǔn)收錄雞內(nèi)金。其中，湖南、浙江未規(guī)定水分限量，臺灣、廣西、上海規(guī)定水分不超過15%，陜西、北京、江西規(guī)定水分不超過13%；江西規(guī)定總灰分和酸不溶性灰分的限量最高，分別為不超過8.0%和3.0%，陜西、廣西、上海規(guī)定不超過2.0%和1.0%；湖南規(guī)定浸出物含量不低于9.0%，陜西、北京、廣西、上海規(guī)定浸出物含量不低于7.5%。陜西、江西、廣西、湖南、浙江、上海6地地方標(biāo)準(zhǔn)收錄炒雞內(nèi)金，但僅陜西規(guī)定了水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的檢測標(biāo)準(zhǔn)。陜西、北京、山東、江西、廣西、湖南6地地方標(biāo)準(zhǔn)收錄醋雞內(nèi)金，僅陜西規(guī)定了水分、總灰分、酸不溶性灰分、浸出物的檢測標(biāo)準(zhǔn)。另外，存在炮制品名稱相同炮制方法不同的情況。例如，陜西、江西規(guī)定炒雞內(nèi)金采用清炒法，江西、廣西、湖南、浙江、上海規(guī)定采用砂炒法；北京規(guī)定醋雞內(nèi)金所用醋為米醋，其他各地未做要求，且北京、廣西規(guī)定醋雞內(nèi)金用文火炒。按地方標(biāo)準(zhǔn)炮制加工的雞內(nèi)金往往會流入其他地區(qū)，但各地方標(biāo)準(zhǔn)有異，增加了監(jiān)管的難度。
2 質(zhì)量控制
中藥質(zhì)量控制是采用必要的方法、技術(shù)或措施監(jiān)控中藥質(zhì)量使之達到藥用要求。其內(nèi)容主要包括真?zhèn)舞b別和優(yōu)劣評價兩方面。真?zhèn)舞b別是中藥質(zhì)量控制的首要任務(wù)，是對中藥來源真實性的檢驗。優(yōu)劣評價是在保證中藥真實性的條件下對其各項指標(biāo)的檢測，包括活性成份、指標(biāo)性成份、雜質(zhì)檢查、衛(wèi)生學(xué)檢查等。
2.1 真?zhèn)舞b別
2.1.1 基原鑒別
雞內(nèi)金來源于雉科動物家雞Gallus gallus domesticus Brisson的干燥沙囊內(nèi)壁。家雞由紅原雞馴化而來，品種繁多。狼山雞、北京油雞、鹿苑雞等15個雞種COI基因序列存在特異性突變位點和單倍型，這些特異性遺傳標(biāo)記為品種資源的鑒定提供了客觀依據(jù)[11]。
2.1.2 性狀鑒別
雞內(nèi)金性狀鑒別應(yīng)注意形狀、厚度、顏色、表面特征、斷面5個方面。2020年版《中國藥典》規(guī)定雞內(nèi)金性狀為不規(guī)則卷片，厚約2mm。表面黃色、黃綠色或黃褐色，薄而半透明，具明顯的條狀皺紋。質(zhì)脆，易碎，斷面角質(zhì)樣，有光澤[1]。偽品鵝內(nèi)金較雞內(nèi)金稍大，呈圓片狀或片塊狀，長7～10cm，寬5～7cm，厚1～1.5mm，表面黃白色或灰黃色，外部邊緣有齒狀短裂紋，斷面無光澤；偽品鴨內(nèi)金稍厚，呈蝶形碎片狀，厚1～3mm，表面暗綠色、黑綠色、紫色或黃棕色，表面縱紋較少，斷面無光澤[12]。性狀鑒別簡單、快速，但對于破碎的雞內(nèi)金，則存在局限性。若鑒定者經(jīng)驗不足，易出現(xiàn)誤判情況。
2.1.3 顯微鑒別
雞內(nèi)金經(jīng)粉碎后性狀特征消失，肉眼難以鑒別。翟延君等[13]曾利用光學(xué)顯微鏡對嬰兒消食散中雞內(nèi)金粉末進行研究，其形狀不規(guī)則，邊緣不整齊，半透明或略呈淡黃色，表面皺縮具扭曲紋理。張鑫等[14]采用顯微鑒別法對十味益脾顆粒中雞內(nèi)金進行鑒別，發(fā)現(xiàn)雞內(nèi)金中有不規(guī)則的無色或棕黃色碎塊。姚志凌等[15]采用顯微鑒別法對肝維康膠囊中雞內(nèi)金進行鑒別，發(fā)現(xiàn)雞內(nèi)金有不規(guī)則的淡黃色內(nèi)壁組織碎片，表面具明顯的條狀紋理。雞內(nèi)金粉末顯微特征專屬性弱，實際工作中鑒別難度較大。
2.1.4 理化鑒別
雞內(nèi)金含蛋白質(zhì)類成份，其理化鑒別多聚焦于電泳檢測。采用聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)對雞內(nèi)金、鴨內(nèi)金、鴿內(nèi)金進行檢測，電泳圖譜顯示三者譜帶數(shù)目及區(qū)域存在差異，可有效區(qū)分三者。另外，不同生長階段、不同性別雞內(nèi)金電泳譜圖也不同[16,17]。SDS-PAGE法重現(xiàn)性好，但耗時耗力。高效毛細管電泳法(HPCE)高效、低耗、快速，對雞內(nèi)金、鴨內(nèi)金的酸性、中性、堿性蛋白提取液進行檢測，3種提取液HPCE圖譜均存在顯著差異，可有效鑒別雞內(nèi)金與鴨內(nèi)金[18]。紅外檢測研究發(fā)現(xiàn)，雞內(nèi)金、鴨內(nèi)金、鵝內(nèi)金吸收峰特征不同，可作為其定性方法之一[19]。此外，廖立英[20]與崔恩忠等[21]分別建立了腎石顆粒、消石通顆粒中雞內(nèi)金的薄層色譜鑒別法(TLC)。
2.1.5 分子鑒別
近年來，分子鑒別在中藥鑒定領(lǐng)域發(fā)展迅速。以線粒體DNA細胞色素b基因通用引物L(fēng)14841和H15149對雞內(nèi)金和鴨內(nèi)金DNA進行擴增、測序、比對，發(fā)現(xiàn)二者DNA序列存在明顯差異，可準(zhǔn)確區(qū)分雞內(nèi)金和鴨內(nèi)金[22]。以COI基因序列的差異片段[23]和12S基因序列的差異片段[3]設(shè)計特異性引物，進行擴增和電泳檢測，均能快速、有效區(qū)分雞內(nèi)金及其偽品。另外，熊文樂等[24]采用DNA條形碼技術(shù)對小兒消食片、胃炎寧顆粒、胃可安膠囊3種劑型11種中成藥中雞內(nèi)金進行鑒定，得出該方法可行、高效[25]，但成本較高，不能排除摻入除雞沙囊內(nèi)壁以外雞組織、器官的可能性。
2.2 優(yōu)劣評價
2.2.1 成份研究
雞內(nèi)金富含蛋白質(zhì)，堿提取物中蛋白含量達60%[26]。有學(xué)者認為蛋白酶、淀粉酶可能為雞內(nèi)金活性蛋白[27]。還有學(xué)者認為氨基酸在雞內(nèi)金功能主治方面起著重要作用[25]。氨基酸自動分析儀測得肉雞雞內(nèi)金水解氨基酸總含量達86.924%[28]，柱前衍生化RP-HPLC 測得雞內(nèi)金氨基酸含量在261.7～571.3mg/g[29]。有研究表明，雞內(nèi)金多糖有較強的清除羥自由基、螯合二價鐵離子、抑制脂質(zhì)過氧化物活性的作用[30]；已分離純化出的新型多糖(PECGp)具有心臟保護活性[31]?，F(xiàn)已知雞內(nèi)金多糖由甘露糖、鹽酸氨基葡萄糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖鹽酸鹽、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、巖藻糖11種物質(zhì)組成[32]。綜上，雞內(nèi)金成份研究主要集中在總蛋白、氨基酸定量及多糖定性研究階段，活性成份尚不明確，而活性成份是中藥優(yōu)劣評價的關(guān)鍵內(nèi)容，活性成份缺失增加了雞內(nèi)金質(zhì)量控制的難度。
2.2.2 優(yōu)劣評價方法
研究發(fā)現(xiàn)，蛋白酶活力為醋雞內(nèi)金(112～113U/g)>炒雞內(nèi)金(85～90U/g)>生雞內(nèi)金(77～78U/g)；淀粉酶活力為生雞內(nèi)金(10～11U/g)>醋雞內(nèi)金(9.5～9.6U/g)>炒雞內(nèi)金(2～3U/g)[33]。該發(fā)現(xiàn)為使用酶活性評價雞內(nèi)金優(yōu)劣提供了理論參考。近年來，生物活性測定法在動物藥材優(yōu)劣評價中取得了一些進展[34]。其是以藥物生物效應(yīng)為基礎(chǔ)，生物統(tǒng)計為工具，運用特定實驗設(shè)計，測定藥物有效性的一種方法[35]。黃偉等[36]以胃蛋白酶活力為評價指標(biāo)，采用質(zhì)反應(yīng)平行線法建立了基于胃蛋白酶活性的雞內(nèi)金生物效價測定法，該方法為雞內(nèi)金質(zhì)量優(yōu)劣評價提供了新的思路。
3 存在的問題
3.1 質(zhì)控指標(biāo)待完善
理化、分子鑒別技術(shù)已在雞內(nèi)金真?zhèn)舞b別中有所應(yīng)用，而現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)僅對性狀等內(nèi)容有所規(guī)定，缺乏專屬性較強的鑒別方法。雞內(nèi)金富含多種金屬元素，如鋁、鈣、鎘、鈷、銅、鐵、鎂、錳、鉬、鉛、鋅等[37]。其中，鉛、鎘、鋁、銅低劑量對人體有益，高劑量則對人體有害。2020年版《中國藥典》雖在四部規(guī)定了重金屬、有害元素等檢測方法，但尚未設(shè)定雞內(nèi)金檢測限度，缺乏與療效相關(guān)的【含量測定】，難以保證雞內(nèi)金有效性。雞內(nèi)金飲片存在生熟異用現(xiàn)象，但其飲片無專屬性質(zhì)控指標(biāo)。另外，部分雞內(nèi)金生粉中存在大腸埃希菌、沙門菌[38]，應(yīng)加強該指標(biāo)研究與監(jiān)測力度。
3.2 采收加工標(biāo)準(zhǔn)尚不具體
采收加工是影響中藥質(zhì)量的重要因素之一。2020年版《中國藥典》規(guī)定了雞內(nèi)金采收過程，但未規(guī)定其采收具體時期與采收年限。有資料顯示，雞內(nèi)金全年均可采收[39]。另外，白羽肉雞9 周齡達到出欄體重，地方雞品種17 周齡達出欄體重[40]，所以市售雞內(nèi)金存在基原動物生長周期不一的情況。又因家雞不是以藥用為目的進行養(yǎng)殖，雞內(nèi)金也非主要產(chǎn)品，其產(chǎn)地初加工缺乏統(tǒng)一的標(biāo)準(zhǔn)化操作規(guī)程。
3.3 品種復(fù)雜多樣
家雞資源豐富，全球各地均產(chǎn)?！吨袊仪萜贩N志》(1989年版)共收載了家雞地方品種26個(仙居雞、北京油雞、清遠麻雞等)、培育品種9個(北京白雞、鄭州紅雞、海江黃雞等)、引入品種11個(白來航雞、洛島紅雞、洛克雞等)[41]。《中國畜禽遺傳資源志-家禽志》(2011年版)共收錄107個地方雞品種[42]?！秶倚笄葸z傳資源品種名錄(2021年版)》共收錄102個地方雞品種。家雞品種多樣造成了雞內(nèi)金來源的復(fù)雜性[43]。肉用型雞雞內(nèi)金促進小鼠胃蛋白酶分泌作用強于蛋用型；但肉用型雞雞內(nèi)金組小鼠的小腸推進率和胃排空率均低于蛋用型組[44]。白羽肉雞雞內(nèi)金胃蛋白酶活力和淀粉酶活力遠大于家養(yǎng)雞雞內(nèi)金[45]。不同品種家雞雞內(nèi)金藥效作用和成份差異如何，需進一步系統(tǒng)研究。
3.4 與臨床療效關(guān)聯(lián)研究較少
《本草蒙筌》記載：“雞種類最多，古今方書常用，并以毛色分優(yōu)劣。丹雄者取冠血并頭，黃雌者稱卵及卵白。其心、肝、膽、血、腸、肪、翅、黃皮等，取烏雄者為優(yōu)焉。”《本草害利》記載：“雞雖屬木，分而配之，則丹雄雞得離火陽明之象，白雄雞得庚金太白之象，故辟邪惡者宜之，黃雌雞屬土，故脾胃宜之。”《滇南本草》記載：“紅者味甘，無毒。白者氣味酸，寒。紅者治婦人諸虛損、血崩漏下，溫中。白者療風(fēng)、治狂，下氣消渴。”姚僧垣所著《集驗方》首次提出雞內(nèi)金在臨床使用過程中應(yīng)遵循男用雌、女用雄的原則。此后，《本草綱目》《本草備要》《本草原始》等多部古籍均有記載。故宮博物院所藏清宮雞內(nèi)金有“雄”字標(biāo)注，且光緒三十四年三月初七至九月二十九日，由御醫(yī)張仲元為慈禧太后開具的處方中，曾5次出現(xiàn)使用“雄雞內(nèi)金”的記錄。有研究表明，雌雞內(nèi)金和雄雞內(nèi)金蛋白譜帶存在差異，雌雞內(nèi)金較雄雞內(nèi)金多一條較淺的譜帶[18]。但未見不同羽色、雌雄等與臨床療效關(guān)聯(lián)研究。
4 小結(jié)與展望
雞內(nèi)金是一味常見藥食同源藥材，開發(fā)利用前景廣闊。其質(zhì)量控制工作雖取得了一些進展，但仍有一些不足。為提高雞內(nèi)金質(zhì)量，保障臨床用藥安全有效，筆者提出以下建議：一是盡快提升完善其質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)。如增加電泳法、DNA分子鑒定等現(xiàn)代鑒別方法；組織開展雞內(nèi)金大樣本研究，制定重金屬、有害元素的限量標(biāo)準(zhǔn)。二是開展雞內(nèi)金采收時間、采收年限、產(chǎn)地初加工規(guī)范化研究，制定其采收加工過程技術(shù)規(guī)范。三是深入研究不同品種家雞雞內(nèi)金之間的異同，包括性狀、成份、藥理活性等，在此基礎(chǔ)上選擇優(yōu)良品種進行以藥用為目的標(biāo)準(zhǔn)化養(yǎng)殖。四是重視雞內(nèi)金性狀、成份等對臨床療效影響的相關(guān)研究，構(gòu)建與臨床相關(guān)聯(lián)的動物藥材質(zhì)量控制技術(shù)體系，傳承創(chuàng)新中藥源于臨床實踐的科學(xué)內(nèi)涵。
動物類中藥物質(zhì)基礎(chǔ)復(fù)雜，一直以來都是中藥質(zhì)量控制的難點。雞內(nèi)金作為《中國藥典》品種，無明確藥效成份，整體質(zhì)量控制水平較低。雞內(nèi)金富含蛋白質(zhì)、多糖等?？衫枚康鞍踪|(zhì)組學(xué)(iTRAQ)、蛋白質(zhì)酶切、雙向電泳技術(shù)等，開展雞內(nèi)金活性成份研究；也可利用雞內(nèi)金中多糖成份，建立雞內(nèi)金多糖酶解產(chǎn)物多維色譜特征分析圖，探索建立以多糖為指示性成份的質(zhì)量控制方法。
來源：中國食品藥品監(jiān)管雜志
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