當(dāng)前，單克隆抗體是目前發(fā)展最快的新型治療性生物大分子藥物，隨著國內(nèi)生物醫(yī)藥的快速發(fā)展，越來越多的新型抗體藥物（如雙特異性抗體、抗體偶聯(lián)藥物（ADC）等）進(jìn)入產(chǎn)業(yè)化階段，本文梳理了新型抗體藥物-ADC的生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查關(guān)注點(diǎn)，新型抗體藥物企業(yè)在員工培訓(xùn)或內(nèi)部質(zhì)量審計(jì)等工作中可參考使用。
一 新型抗體藥物-ADC的生產(chǎn)工藝
抗體偶聯(lián)藥物(Antibody–Drug Conjugates，簡稱ADC)是新藥研發(fā)熱點(diǎn)之一，被業(yè)界人士稱為靶向殺傷腫瘤細(xì)胞的“生物導(dǎo)彈”，ADC是指由靶向特異性抗原的抗體藥物與有效載荷（如小分子細(xì)胞毒藥物）通過連接子偶聯(lián)而成，兼具傳統(tǒng)小分子細(xì)胞毒藥物的強(qiáng)大殺傷效應(yīng)和抗體藥物的腫瘤靶向性，通俗地講，ADC主要由三部分組成，分別是抗體（制導(dǎo)系統(tǒng)-靶向定位）+連接子（linker）+細(xì)胞毒素（也有效載荷（payload）、殺傷性彈藥），ADC的優(yōu)勢(shì)是在抗體藥物高特異性的基礎(chǔ)上，增加了對(duì)腫瘤具有更強(qiáng)殺傷力的細(xì)胞毒性小分子藥物，ADC藥物生產(chǎn)流程參考示意圖如下：
二 新型抗體藥物檢查策略
新型抗體藥物屬于生物大分子的特殊屬性，在檢查中除了應(yīng)當(dāng)關(guān)注新型抗體藥物的工藝特性、過程控制、生產(chǎn)能力和質(zhì)量屬性，還需要重點(diǎn)關(guān)注抗體生物活性和原液生產(chǎn)過程中污染控制的工藝控制要求，現(xiàn)在監(jiān)管機(jī)構(gòu)現(xiàn)場(chǎng)檢查一般采用兩種策略，分別是基于體系的橫向檢查策略和基于品種的縱向檢查策略。
三 新型抗體藥物-ADC檢查關(guān)注點(diǎn)
ADC藥物的生產(chǎn)是一個(gè)技術(shù)密集型流程，大體可分為小分子藥物生產(chǎn)工藝、原液的生產(chǎn)工藝及制劑的生產(chǎn)工藝3個(gè)環(huán)節(jié)，每個(gè)環(huán)節(jié)都擁有其關(guān)注點(diǎn)，基于對(duì)ADC藥物當(dāng)前的認(rèn)識(shí)，梳理了ADC藥物小分子藥物生產(chǎn)工藝和制劑生產(chǎn)工藝檢查關(guān)注的重點(diǎn)，原液生產(chǎn)工藝可參見單抗的通用檢查要點(diǎn)，如有遺漏，歡迎大家補(bǔ)充。
1.小分子藥物生產(chǎn)
生產(chǎn)工藝主要包括：連接子制備、小分子藥物制備、連接子-小分子藥物制備。
【檢查要點(diǎn)示例】
應(yīng)當(dāng)盡可能使用專用設(shè)施（如獨(dú)立的HVAC系統(tǒng)）和設(shè)備進(jìn)行小分子藥物分裝；如共線生產(chǎn)，需采取特別防護(hù)措施并經(jīng)過風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和必要的清潔驗(yàn)證，應(yīng)充分評(píng)估小分子藥物在環(huán)境及設(shè)備表面殘留可能造成的風(fēng)險(xiǎn)。
應(yīng)設(shè)立獨(dú)立的洗衣間，用于小分子藥物生產(chǎn)人員穿戴的防護(hù)服的清洗，如有必要，應(yīng)進(jìn)行預(yù)浸泡處理。
小分子藥物中間品及產(chǎn)品等進(jìn)行轉(zhuǎn)運(yùn)時(shí)應(yīng)采用不易破碎的器具進(jìn)行二次包裝。
小分子藥物和連接子-小分子藥物生產(chǎn)區(qū)域及存儲(chǔ)設(shè)備設(shè)施應(yīng)受控。
對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量有影響的起始物料、試劑應(yīng)建立質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，如果手性對(duì)ADC藥物的活性有影響，對(duì)具有手性的起始物料應(yīng)制定對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體的限度。
當(dāng)起始物料或中間體的某個(gè)雜質(zhì)與產(chǎn)品的關(guān)鍵質(zhì)量屬性關(guān)聯(lián)時(shí)，應(yīng)驗(yàn)證生產(chǎn)工藝去除該雜質(zhì)或其衍生物的能力并確定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。
應(yīng)制定中間體的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，如性狀、有關(guān)物質(zhì)等；
應(yīng)對(duì)制備過程中影響產(chǎn)品質(zhì)量的工藝參數(shù)（例如：投料量、工藝溫度、工藝時(shí)間、精制方法、干燥方式、干燥溫度等）進(jìn)行控制。
根據(jù)產(chǎn)品質(zhì)量控制的需要，應(yīng)檢測(cè)外觀性狀、理化常數(shù)（如比旋度、溶解度等）、無機(jī)雜質(zhì)、有機(jī)殘留溶劑（如有必要）、有關(guān)物質(zhì)、含量等（如必要）。
工藝中涉及柱層析和制備純化等使用填料的步驟時(shí)，若填料循環(huán)使用，應(yīng)關(guān)注填料壽命及清潔方法，并有相關(guān)驗(yàn)證研究。
如涉及中間體或產(chǎn)品混合（包括但不限于將小的批次混合以增加批量、將相同中間體或產(chǎn)品的尾料（例如分離出的相對(duì)較少的量）混合成一個(gè)批次），每一個(gè)將被用于混合的批次均須是按照注冊(cè)批準(zhǔn)的規(guī)程生產(chǎn)、檢測(cè)并符合質(zhì)量要求；應(yīng)對(duì)混合過程進(jìn)行監(jiān)控和記錄；混合批號(hào)的有效期或復(fù)驗(yàn)期應(yīng)根據(jù)混合物中最早的尾料或批次的生產(chǎn)日期決定。
如果涉及物料和溶劑回收，應(yīng)具備經(jīng)過批準(zhǔn)的溶劑回收規(guī)程，且回收的物料和溶劑應(yīng)有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；若回收溶劑與新溶劑混合使用，應(yīng)有相關(guān)研究證明回收溶劑可適用于其可能被使用的所有生產(chǎn)步驟；對(duì)母液、回收溶劑和其他回收物料的使用應(yīng)有記錄。
2.ADC制劑生產(chǎn)
ADC制劑的生產(chǎn)工藝包括：半成品配制、過濾灌裝、凍干（如有）、軋蓋、燈檢、貼簽、包裝等。
2.1【半成品配制工藝檢查要點(diǎn)示例】
關(guān)注原液儲(chǔ)存容器、原液化凍方式和化凍時(shí)間的控制方式（如凍融條件（溫度、時(shí)長、震搖）、凍融次數(shù)等）。
關(guān)注原液/成品藥液工藝時(shí)長、原液稀釋時(shí)的攪拌溫度/時(shí)間/速度、緩沖液配制參數(shù)（容器開口后吐溫多次使用或者長時(shí)間存放，需要考慮氧化雜質(zhì)影響、如產(chǎn)品對(duì)金屬粒子、氧氣和光照敏感，配液罐（金屬離子）、罐體頂空氧/稀釋劑/溶劑的溶氧、光照等。
關(guān)注除菌過濾前的微生物負(fù)荷控制水平、除菌過濾工藝的過濾設(shè)計(jì)，如濾器種類、過濾動(dòng)力學(xué)參數(shù)（如最大過濾體積、壓力或?yàn)V速、時(shí)長、溫度）等工藝參數(shù)；
2.2【過濾灌裝工藝檢查要點(diǎn)示例】
關(guān)注灌裝泵種類和速度（剪切力）、灌裝溫度/時(shí)長、噴嘴（直徑、位置、數(shù)量）、充氮（起泡）、光/氧等工藝參數(shù)；
采用蠕動(dòng)泵進(jìn)行灌裝的，應(yīng)當(dāng)重點(diǎn)關(guān)注灌裝精度要求。
2.3【凍干工藝檢查要點(diǎn)示例】
凍干步驟關(guān)注凍干曲線的批間一致性，如出現(xiàn)異常，相關(guān)的調(diào)查、評(píng)估對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響及風(fēng)險(xiǎn)控制措施。
2.4【加塞/壓蓋工藝檢查要點(diǎn)示例】
ADC制品軋蓋結(jié)束后應(yīng)對(duì)容器外壁進(jìn)行清洗，以減少取樣、燈檢過程中人員操作暴露，清洗時(shí)應(yīng)控制清洗水的溫度。清洗后應(yīng)確保容器在進(jìn)入后段包裝或暫存冷庫前，已處于干燥的狀態(tài)。
加塞/壓蓋除關(guān)注無菌保證相關(guān)參數(shù)（如軋蓋力等）外，還應(yīng)根據(jù)產(chǎn)品自身特性關(guān)注膠塞/活塞的硅油、玻璃的金屬離子等對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響；
生產(chǎn)過程應(yīng)注意消毒劑殘留（如雙氧水等）對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量的影響（氧化物）。
2.5【軋蓋、燈檢、貼簽、包裝等工藝檢查要點(diǎn)示例】
由于ADC品種多為低溫儲(chǔ)存，應(yīng)當(dāng)重點(diǎn)關(guān)注燈檢、包裝、貼簽等步驟的脫冷鏈暴露及光照暴露和時(shí)間的控制要求。
當(dāng)抗體偶聯(lián)的小分子藥物具有較強(qiáng)的疏水性時(shí)，應(yīng)關(guān)注ADC藥物在生產(chǎn)和貯藏期間多聚體的變化情況，檢測(cè)方法應(yīng)具有專屬性和靈敏度。
如共線生產(chǎn)，經(jīng)有數(shù)據(jù)的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和采取有效的措施后方可實(shí)施。應(yīng)充分評(píng)估ADC制品在環(huán)境及設(shè)備表面中殘留可能造成的風(fēng)險(xiǎn)，并采取有效的措施進(jìn)行殘留去除，設(shè)備的清潔應(yīng)經(jīng)過清潔驗(yàn)證，確保制品暴露風(fēng)險(xiǎn)可接受。
采用人工燈檢的，人員應(yīng)經(jīng)過實(shí)操培訓(xùn)且經(jīng)考核合格后方可上崗，應(yīng)定期進(jìn)行再培訓(xùn)；
采用燈檢機(jī)燈檢的，燈檢機(jī)應(yīng)當(dāng)經(jīng)過驗(yàn)證。驗(yàn)證應(yīng)包含人機(jī)對(duì)比且不得低于人工燈檢效果。
應(yīng)當(dāng)建立不合格品樣品庫， 以便于后續(xù)追溯，并定期進(jìn)行盤點(diǎn)，當(dāng)生產(chǎn)過程中出現(xiàn)新種類的不合格品時(shí)應(yīng)進(jìn)行調(diào)查并評(píng)估是否更新至不合格品樣品庫。應(yīng)定期對(duì)不合格品趨勢(shì)進(jìn)行分析，并對(duì)出現(xiàn)的異常趨勢(shì)或偏差進(jìn)行調(diào)查。
參考文獻(xiàn)
《人用重組單克隆抗體制品生產(chǎn)通用技術(shù)要求》、《抗體類藥品現(xiàn)場(chǎng)檢查指南（征求意見稿）》、《探討單抗注冊(cè)生產(chǎn)現(xiàn)場(chǎng)檢查中的質(zhì)量控制要點(diǎn)》等。
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