消毒劑的習(xí)慣定義：能消除以細(xì)胞繁殖形態(tài)出現(xiàn)的微生物污染的化學(xué)物質(zhì)。消毒劑的分類定義（USP29 <1072>）:
①抗菌劑（Antiseptic)
②化學(xué)殺菌劑(Chemical Disinfectant)
③清潔劑(Cleaning Agent)
④消毒劑(Disinfectant)
⑤衛(wèi)生洗滌劑(Sanitizing Agent)
⑥殺孢子劑(Sporicidal Agent)
⑦滅菌劑(Sterilant Agent)
1.消毒劑配制及其注意事項(xiàng)：
按供應(yīng)商的使用說明進(jìn)行配制和儲存(純化水、注射用水)
潔凈室及相關(guān)受控環(huán)境使用，應(yīng)進(jìn)行除菌過濾。
溫度提高，殺菌效力增大。效力驗(yàn)證時，在常溫下配制。
2.影響消毒劑效力的因素有：
pH；溫度，濃度；材質(zhì)和附著物質(zhì)；溶劑（水）；接觸時間；微生物的類型和數(shù)量；
3.消毒劑作用機(jī)理:
鈍化胞內(nèi)酶活性，影響細(xì)胞的正常代謝（如酚類）
阻斷物質(zhì)運(yùn)輸通道（如季銨鹽類（＋電荷），附著于細(xì)胞膜特定部分（－電荷））
破壞微生物細(xì)胞（膜）的結(jié)構(gòu)和功能（如醛類、含氯、過氧化物）
4.微生物對消毒劑的耐受性受以下幾方面因素的影響：
形成生物膜（粘性多糖物質(zhì)）
消毒劑的相互作用（中和反應(yīng)）
固有耐受性和概率殘存
致死劑量
5.微生物抗力由小到大排列一般為：
細(xì)菌繁殖體--真菌繁殖體--真菌孢子--病毒--分枝桿菌--細(xì)菌芽孢
6.消毒劑的選擇考慮如下因素：
需控制的微生物的類型和數(shù)量
市售消毒劑的抗菌譜
消毒劑的品牌
濃度、使用方法和接觸時間
待消毒物體的材質(zhì)和對消毒劑的兼容性
可能影響殺菌效力的表面有機(jī)物數(shù)量
反復(fù)使用，對設(shè)備表面的腐蝕程度
對操作者的安全性
和清潔劑/其它消毒劑的相容性
交替使用方案和對產(chǎn)品的影響
7.消毒劑驗(yàn)證步驟：
第一步：在實(shí)驗(yàn)室對代表細(xì)菌在規(guī)定的使用濃度和規(guī)定的作用時間進(jìn)行確認(rèn)。
第二步：應(yīng)用不同材質(zhì)的載體，進(jìn)行模擬試驗(yàn)
第三步：完成驗(yàn)證報告，形成SOP。
8.驗(yàn)證用菌種：
金黃色葡萄球菌、銅綠色假單胞菌、沙門氏菌、大腸埃希菌、枯草桿菌、白色念珠菌、黑曲霉、環(huán)境分離菌。
菌種選擇的原則:代表性,普遍性,標(biāo)準(zhǔn)菌種。(環(huán)境中常見的污染菌)。菌種的要求：不得超過5代。
采用適宜的方法保存。
9.挑戰(zhàn)微生物(USP29)：
10.準(zhǔn)備性試驗(yàn)：
選擇適合的中和劑：Letheen肉湯、D/E中和肉湯（酚類，季銨鹽類）、TAT肉湯基礎(chǔ)＋吐溫20＋卵磷脂＋胰蛋白胨
10.1D/E中和肉湯配方（每升）：
胰蛋白胨5g；酵母膏2.5g；葡萄糖10g；硫乙醇酸鈉1g；硫代硫酸鈉6g；亞硫酸氫鈉2.5g；吐溫805g；卵磷脂7g；溴甲酚紫0.02g；最終pH7.6±0.2于25℃；
10.2準(zhǔn)備性試驗(yàn)之中和劑毒性：
將10～100CFU的微生物加入到中和劑中；薄膜過濾，沖洗，培養(yǎng)，計數(shù)¢與菌液對照組比較，回收率應(yīng)>70％
10.3準(zhǔn)備性試驗(yàn)之中和效力：
使用中稀釋檢測（use-dilutiontests)(對不同濃度下，對消毒劑的效力進(jìn)行篩選;針對不同標(biāo)準(zhǔn)菌株和環(huán)境微生物，確認(rèn)接觸時間)
將消毒劑和中和劑混合（記錄時間）
加入10～100CFU微生物¢薄膜過濾，沖洗，培養(yǎng)，計數(shù)
與菌液對照組比較，回收率應(yīng)>70％驗(yàn)證方法
薄膜過濾法：菌懸液和消毒劑直接混合，在不同的時間間隔條件下過濾，培養(yǎng)后評價。
11.驗(yàn)證準(zhǔn)備：
測試菌液準(zhǔn)備：增菌過夜，并調(diào)整至106～108CFU/ml
消毒劑稀釋至規(guī)定濃度：分裝10ml于若干無菌試管中；試管上標(biāo)注消毒時間：如“1分鐘組”，“5分鐘組”，“10分鐘組”或其他要求的時間段。
配制中和劑（分裝100ml，300ml）驗(yàn)證步驟:
接種：接種各驗(yàn)證菌種至盛有待驗(yàn)證消毒劑的試管（使接后濃度>104CFU/ml)，混合均勻，并立即開始計時。
中和、過濾：將消毒劑傾入100ml中和劑中，混合，稀釋（如需要），過濾，然后用100ml中和劑清洗濾膜，濾過3次。
陽性對照：用無菌水代替消毒劑，步驟同上。
培養(yǎng)和計數(shù)：取下濾膜放入規(guī)定的培養(yǎng)基平板，在規(guī)定的溫度、時間培養(yǎng)后，記數(shù)。和陽性對照相比，微生物數(shù)量下降應(yīng)至少3個對數(shù)值（細(xì)菌芽孢至少2個對數(shù)值）。
表面挑戰(zhàn)試驗(yàn)（surfacechallengetests)
使用標(biāo)準(zhǔn)菌株和典型環(huán)境分離微生物
選擇合適的濃度和接觸時間，進(jìn)行試驗(yàn)
獲得挑戰(zhàn)微生物數(shù)量下降的對數(shù)值
對使用新消毒劑前后環(huán)境微生物的檢出頻率和數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)評估（無菌生產(chǎn)區(qū)域、GMP要求）
根據(jù)設(shè)施的實(shí)際情況，選擇不同材質(zhì)的載體（玻璃，不銹鋼，塑料薄膜，乳膠，墻面涂料，地面材質(zhì)）
接種，并確認(rèn)實(shí)際數(shù)量
接觸殺菌、中和、過濾。
12.正確使用消毒劑:
① 稀釋消毒劑時應(yīng)用純化水、注射用水
② 設(shè)備使用后徹底清潔
③ 將環(huán)境常見菌列入驗(yàn)證范疇
④ 輪換使用不同的消毒劑，消毒劑間要用無菌水充分清洗
⑤ 消毒的SOP：配制、使用、糾正、防護(hù)等
⑥ 供應(yīng)商的審核和確認(rèn)
13.消毒劑的文件:
標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程SOP
消毒劑配制記錄
消毒劑使用記錄
消毒劑標(biāo)簽消毒劑文件，應(yīng)該等同于原始記錄。
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