體外診斷試劑注冊申報資料的分析性能評估主要包括準確度、精密度、包容性、檢出限、分析特異性、高劑量鉤狀效應、測量區(qū)間及可報告區(qū)間等項目的研究資料。其中分析特異性研究是性能評估中的重要資料，通過模擬產(chǎn)品實際使用過程中各種干擾因素可能對檢測結(jié)果產(chǎn)生的影響，為產(chǎn)品有效性提供證據(jù)。分析特異性研究主要包括交叉反應和干擾試驗，根據(jù)方法學、檢測靶標、樣本類型等不同，分析特異性的要求也存在區(qū)別。
一、交叉反應
交叉反應物主要考慮因素包括：
1）結(jié)構(gòu)類似物，由于反應原理的相似性，結(jié)構(gòu)類似物是交叉反應驗證的重要部分，如具有同源性的抗原結(jié)構(gòu)、具有同源性序列的核酸片段、核酸序列相近或具有同源性的野生型或其他突變類型序列、檢測范圍外的型別、同類藥物中的所有藥物/化合物和藥物代謝物、以及易共存的其他類似物。如CYP2C19藥物代謝酶基因多態(tài)性檢測試劑應對靶標的同源性序列（CYP2C19的其他突變序列、CYP2C9基因序列等）進行交叉反應驗證；EGFR突變基因檢測試劑應對EGFR基因不同序列、HER家族不同基因、不同濃度的野生型人DNA樣本、非人類基因組基因等進行交叉反應驗證。
2）易引起相同或相似的臨床癥狀的其他病原體、相同或相似的臨床癥狀出現(xiàn)時，體內(nèi)易升高的其他蛋白、采樣部位正常寄生或易并發(fā)的其他微生物（包含近緣微生物）。如冠狀病毒檢測試劑盒應考慮易引起相似臨床癥狀的流感病毒、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、諾如病毒等；病原體抗體檢測試劑盒需考慮高濃度病原體特異性IgG抗體與特異性IgM抗體的交叉反應；不同采樣部位的正常寄生微生物，如宮頸拭子樣本應選擇在人類泌尿、生殖道寄生微生物或病原體，鼻拭子樣本應選擇呼吸道常見微生物。
3）原材料設(shè)計可能引入的其他因素：如原材料為鼠源單抗，則應驗證人抗鼠抗體（HAMA）的交叉反應；如檢測試劑采用基因重組抗原，應增加對重組基因?qū)胛⑸锾禺愋钥贵w的交叉反應評價。
4）交叉反應驗證的樣本，應盡量采用臨床樣本或病原體培養(yǎng)物。根據(jù)產(chǎn)品特點選擇潛在的交叉反應物質(zhì)進行驗證，一般建議選擇高濃度交叉反應物水平進行驗證，細菌或者真菌的最低濃度為106 CFU/mL；病毒的最低濃度為105 PFU/mL；人野生型DNA至少包含100 ng/μL野生核酸樣本。對于交叉反應中病原體的最低濃度，生產(chǎn)商也可根據(jù)病原體的具體特性規(guī)定相應濃度及濃度單位，應提供用于所有用于交叉反應驗證的病原體的制備方法、來源、種屬和濃度信息，可選擇已上市產(chǎn)品進行確定，如無已上市產(chǎn)品，也可通過企業(yè)自建的穩(wěn)定合理方法確認。
二、干擾試驗
1）干擾物質(zhì)類型：干擾物質(zhì)本身一般不能與試劑產(chǎn)生反應，但能干擾待測分析物在檢測系統(tǒng)中的反應效率，從而影響試驗結(jié)果的準確性。干擾因素主要包括內(nèi)源性干擾和外源性干擾，內(nèi)源性干擾主要為正常生理和病理狀態(tài)下的人體代謝產(chǎn)物，外源性干擾物主要為常用藥物及其代謝物、患者群體使用的藥物及其代謝物、樣本采集或處理過程中接觸到的物質(zhì)如抗凝劑、防腐劑等。
2）干擾物質(zhì)舉例：樣本類型為血清、血漿、全血的檢測試劑盒，常見內(nèi)源性干擾物主要包括血紅蛋白、脂類、膽紅素、膽固醇、自身抗體、疾病相關(guān)蛋白、患者體內(nèi)異常的生化代謝物等；常見的外源性干擾物質(zhì)包括血漿/全血樣本抗凝劑、常用藥物等。以鼻拭子為受檢樣本的呼吸道病原體檢測試劑盒，內(nèi)源性干擾主要包括鼻分泌物或黏液，如粘蛋白、血液，外源性干擾主要包括鼻咽部局部藥物、全身性藥物如抗病毒藥物、抗生素等；尿液樣本干擾物需考慮尿液中常見代謝物、pH等。
3）干擾物質(zhì)的驗證：一般采用添加干擾物質(zhì)的樣本進行研究，為避免基質(zhì)效應，如干擾物質(zhì)與適用樣本不同，則添加量宜少于總體積的5%。首先對可疑干擾物質(zhì)采用臨床樣本中的最高濃度（最差情形）進行干擾篩查或驗證，一般采用配對比對的方式，比較添加與未添加高濃度干擾物質(zhì)的樣本檢測結(jié)果的差異。如果差異超出接受范圍或?qū)z測結(jié)果有顯著性影響，可確認該物質(zhì)為干擾物質(zhì)，可進一步評估該干擾物質(zhì)濃度與干擾程度之間的關(guān)系；如果差異在接受范圍內(nèi)或?qū)εR床無顯著性影響，可認為該濃度的物質(zhì)不產(chǎn)生干擾，在產(chǎn)品說明書中明確不產(chǎn)生干擾的物質(zhì)濃度上限。干擾實驗建議采用包含弱陽性水平在內(nèi)，至少兩個分析物水平的樣本，可反映干擾物質(zhì)對臨界陽性水平檢測的干擾。
綜上所述，產(chǎn)品申報前應進行充分的臨床背景調(diào)查，最大限度模擬臨床應用中可能出現(xiàn)的場景，依據(jù)產(chǎn)品特性全面選擇潛在的交叉干擾物質(zhì)。
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