對于分析數(shù)據(jù)質(zhì)量（可靠性、一致性）而言，分析方法驗(yàn)證是其最基本的組成要素。在USP 1058 Analytical Instrument Qualification分析數(shù)據(jù)質(zhì)量因素質(zhì)量三角形中分析方法驗(yàn)證是在分析儀器確認(rèn)之上的第二層（圖1），在分析方法驗(yàn)證之上的是系統(tǒng)適用性和質(zhì)量控制樣品的使用，分析方法驗(yàn)證的質(zhì)量直接決定了分析數(shù)據(jù)的質(zhì)量[1]。
圖1 分析數(shù)據(jù)質(zhì)量的組成要素
1、分析方法驗(yàn)證參數(shù)選擇的一般原則
對于分析方法驗(yàn)證所需要進(jìn)行的檢測項(xiàng)目和驗(yàn)證指標(biāo)，在ICH、FDA、NMPA的多種分析方法驗(yàn)證指南中均有明確的規(guī)定，如中國藥典2020年版通則9101分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則（第二次征求意見稿）中規(guī)定根據(jù)檢驗(yàn)項(xiàng)目的不同，視具體情況擬訂驗(yàn)證的指標(biāo)，如專屬性、準(zhǔn)確度、精密度（包括重復(fù)性、中間精密度和重現(xiàn)性）、檢測限、定量限、線性、范圍和耐用性[2]。又如GBT27417-2017合格評定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南規(guī)定的典型方法確認(rèn)參數(shù)的選擇如圖2[3]。
圖2 典型方法確認(rèn)參數(shù)的選擇
對于常規(guī)的分析方法驗(yàn)證來說，按照各項(xiàng)指南的規(guī)定直接進(jìn)行各項(xiàng)指標(biāo)即可?？梢詤⒄找韵乱话阍瓌t進(jìn)行驗(yàn)證指標(biāo)選擇：
（1）對于藥典方法或其他法定方法，通常只需要對系統(tǒng)適用性進(jìn)行確認(rèn)，并根據(jù)方法的復(fù)雜性選擇對其核心指標(biāo)進(jìn)行確認(rèn)。分析方法確認(rèn)參考驗(yàn)證參數(shù)如圖3。
圖3 法定方法確認(rèn)參數(shù)選擇
注：
N/A表示不適用；
#根據(jù)實(shí)際需要選擇；
☆專屬性做選擇性即可；
*若存在輔料的干擾選擇。
（2）對于首次進(jìn)行的方法驗(yàn)證及確認(rèn)，依據(jù)以法律法規(guī)的要求，需對各檢測項(xiàng)目的核心參數(shù)進(jìn)行確認(rèn)，并對需變更檢驗(yàn)方法進(jìn)行適用性驗(yàn)證。分析方法驗(yàn)證參考驗(yàn)證參數(shù)如圖4。
圖4 法定方法確認(rèn)參數(shù)選擇
注：
-表示不適用；
+表示需體現(xiàn)在方法驗(yàn)證方案中；
#根據(jù)實(shí)際需要選擇；
※溶液穩(wěn)定性應(yīng)至少包括在實(shí)際檢測下的穩(wěn)定性；
▲不能完全代表物質(zhì)專屬性的分析方法，應(yīng)有其它分析方法補(bǔ)充；
*當(dāng)分析方法用于穩(wěn)定性樣品檢測時，專屬性必須做穩(wěn)定性指示特性；
僅有當(dāng)方法轉(zhuǎn)移到不同地點(diǎn)的其它實(shí)驗(yàn)室或收錄在藥典中時才需要進(jìn)行重現(xiàn)性，若有重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn)則可不做中間精密度。
濾膜影響試驗(yàn)：根據(jù)實(shí)際需求而定，對于定量分析中使用到的濾膜一般要求做。
2、分析方法驗(yàn)證的風(fēng)險評估
自2005年由ICH提出以來，風(fēng)險評估已經(jīng)成為藥品質(zhì)量管理體系中的最基本原則之一[4]。對于分析方法和分析方法驗(yàn)證來說，風(fēng)險評估一樣是可以是適用的工具。在方法驗(yàn)證中利用有效的質(zhì)量風(fēng)險管理辦法主動確定并控制潛在的驗(yàn)證質(zhì)量風(fēng)險，消除或者不斷降低分析方法對于藥品質(zhì)量的影響?；陲L(fēng)險評估的分析方法驗(yàn)證驗(yàn)證指標(biāo)選擇和方案制定，將在規(guī)范性、合規(guī)性上具有明顯優(yōu)越性。
分析方法風(fēng)險評估：對分析方法開展風(fēng)險評估首先基于分析規(guī)程在使用周期中可能的變異，然后運(yùn)用風(fēng)險評估根據(jù)如FMEA工具進(jìn)行風(fēng)險評估。分析方法風(fēng)險評估對于確定SOP的關(guān)鍵影響參數(shù)和其操作空間，豁免某些變更下的方法再驗(yàn)證具有重要的指導(dǎo)意義，并進(jìn)一步為分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估提供基礎(chǔ)。
分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估：對于分析方法驗(yàn)證的風(fēng)險評估的價值主要還是在于取得“實(shí)驗(yàn)室符合性驗(yàn)證負(fù)擔(dān)”和“法規(guī)合規(guī)性”之間的平衡，從而怎樣使驗(yàn)證/確認(rèn)的工作最小化。分析方法驗(yàn)證的風(fēng)險評估大體可以分成以下步驟：
（1）成立分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估小組；
（2）根據(jù)產(chǎn)品質(zhì)量概況列出方法清單；
（3）判斷方法在GMP系統(tǒng)中的重要性；
（4）基于經(jīng)驗(yàn)、產(chǎn)品特性和分析方法的復(fù)雜程度進(jìn)行風(fēng)險評估；
（5）基于風(fēng)險評估確定驗(yàn)證指標(biāo)；
（6）分析方法驗(yàn)證的風(fēng)險再評估[5,6]。
3、分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估策略探討
分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估策略應(yīng)基于分析的總體考慮。分析方法驗(yàn)證開展的前提必須是在對分析過程中可能的風(fēng)險因素受到控制的前提下，確認(rèn)方法驗(yàn)證方案的先決條件均已滿足。包括檢查方法驗(yàn)證/確認(rèn)方案是否批準(zhǔn)，檢查驗(yàn)證活動參與人員培訓(xùn)結(jié)果，檢查驗(yàn)證活動標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程是否處于受控狀態(tài)，檢查驗(yàn)證活動相關(guān)儀器是否處于受控狀態(tài)，檢查驗(yàn)證活動樣品試劑是否有效。方法驗(yàn)證及確認(rèn)方案的先決條件均符合驗(yàn)證要求的前提下方可開展驗(yàn)證活動。大致來說，分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估策略應(yīng)基于以下風(fēng)險因素：
（1）分析方法驗(yàn)證風(fēng)險源：風(fēng)險源包括首次生產(chǎn)、場地發(fā)生變更、生產(chǎn)工藝發(fā)生變更，或者分析方法雖為法定方法，但質(zhì)控實(shí)驗(yàn)室初次使用，有可能對分析方法結(jié)果構(gòu)成影響。
（2）人員經(jīng)驗(yàn)和知識：在類似方法方面，檢驗(yàn)人員是否有豐富的經(jīng)驗(yàn)和良好的技術(shù)水平。若經(jīng)驗(yàn)不足，則需要進(jìn)行全面深入的驗(yàn)證；若經(jīng)驗(yàn)豐富，則進(jìn)行部分驗(yàn)證。
（3）產(chǎn)品和規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)：在類似產(chǎn)品和類似產(chǎn)品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)上，《中華人民共和國藥典》等法規(guī)是否收載有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。若類似產(chǎn)品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)未被收載，則需要進(jìn)行全面深入的驗(yàn)證，若類似產(chǎn)品規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)已被收載，則進(jìn)行部分驗(yàn)證。
（4）分析方法的復(fù)雜程度：分析方法是一個新的方法還是相對成熟的方法。若為新的方法，則需要進(jìn)行全面深入的驗(yàn)證；若為成熟的方法，則進(jìn)行部分驗(yàn)證。但對于復(fù)雜系統(tǒng)的分析方法（如高效液相色譜方法）仍需要盡可能進(jìn)行全面的方法驗(yàn)證[7]。
在分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估策略中，一樣可以通過風(fēng)險評估分值來評價驗(yàn)證進(jìn)行的程度。在圖5中，對于分析方法驗(yàn)證（AMV）基于風(fēng)險評估的驗(yàn)證考慮做了參考。一般而言，新的方法、新的產(chǎn)品通常采用完全驗(yàn)證，而平臺方法、成熟方法通常只需要部分驗(yàn)證，法定方法則只需要進(jìn)行方法確認(rèn)。
圖5 分析方法驗(yàn)證（AMV）基于風(fēng)險評估的驗(yàn)證考慮參考
4、小結(jié)
分析方法驗(yàn)證是保證分析數(shù)據(jù)質(zhì)量的基礎(chǔ)條件，根據(jù)法規(guī)的規(guī)定可以得到分析方法驗(yàn)證參數(shù)選擇的一般原則。分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估能在驗(yàn)證/確認(rèn)的工作最小化的基礎(chǔ)上滿足分析方法驗(yàn)證的合規(guī)性，可以考慮基于分析方法驗(yàn)證風(fēng)險源識別、人員經(jīng)驗(yàn)和知識、產(chǎn)品和規(guī)格標(biāo)準(zhǔn)、分析方法的復(fù)雜程度等評估策略基礎(chǔ)上進(jìn)行分析方法驗(yàn)證風(fēng)險評估。
參考文獻(xiàn)
1、USP 1058 Analytical Instrument Qualification
2、中國藥典2020年版通則9101分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則（第二次征求意見稿）
3、GBT 27417-2017合格評定化學(xué)分析方法確認(rèn)和驗(yàn)證指南
4、ICH Q9 Quality Risk Management
5、方建茹, 基于風(fēng)險評估的方法學(xué)驗(yàn)證2014.7.24.
6、方建茹, 基于生命周期的分析方法風(fēng)險評估.
7、GBT16631-2008高效液相色譜法通則.2019.06.18
京公網(wǎng)安備11010802046783號
