問(wèn)：做二氯喹啉酸的農(nóng)殘分析，查閱文獻(xiàn)，前處理后跑液相，色譜條件：流動(dòng) 相（乙腈：水=1:1，水 PH 用磷酸調(diào)到 4），流速（1ml/min），波長(zhǎng) 225nm，進(jìn)樣量 20μl 在此條件下，標(biāo)樣出峰時(shí)間較早，保留時(shí)間 4min 左右，樣品峰不太分開(kāi)，且 8min 左右就 不出峰。調(diào)整了流動(dòng)相比例后（乙腈：水=1:3)，增加水相，保留時(shí)間確實(shí)后移了，15min左右，但峰高和峰面積明顯降低，且濃度較低的基本不能出峰。樣品峰值也極小，根本也不好判斷是不是我的目標(biāo)物。
答：這是一個(gè)涉及到色譜分離時(shí)的色譜擴(kuò)散問(wèn)題。由于色譜填料的不規(guī)整以及色譜柱的直 徑等因素，目標(biāo)化合物在色譜柱中分配分離時(shí)，會(huì)存在縱向擴(kuò)散和橫向擴(kuò)散的現(xiàn)象，導(dǎo)致同時(shí)進(jìn)入色譜柱的目標(biāo)化合物依次流出色譜柱，從而在色譜圖上呈現(xiàn)一個(gè)具有良好的對(duì)稱性，呈高斯分布的色譜峰。目標(biāo)化合物在色譜柱中分配分離過(guò)程的周期越長(zhǎng)，其擴(kuò)散程度 越嚴(yán)重，則色譜峰越寬。因此在等度洗脫條件下，我們會(huì)看見(jiàn)保留時(shí)間長(zhǎng)的化合物色譜峰 寬大于保留時(shí)間短的化合物色譜峰寬。兩個(gè)化合物的色譜峰保留時(shí)間差異越大，則兩峰峰寬的差異也越大。色譜峰寬隨著保留時(shí)間的增大而變寬，當(dāng)?shù)竭_(dá)一定程度上時(shí)，必然會(huì)造成色譜峰變得與基線無(wú)法分辨。
通過(guò)調(diào)節(jié)流動(dòng)相組成來(lái)改善色譜峰的分離是優(yōu)化色譜分離條件的主要手段之一。在日 常工作中，優(yōu)化流動(dòng)相中有機(jī)相的比例時(shí)，可以按 5%-10%的梯度有機(jī)相的比例去優(yōu)化洗脫 條件，也可以采用梯度洗脫的方式去優(yōu)化洗脫條件。
京公網(wǎng)安備11010802046783號(hào)
