耐用性作為分析方法驗(yàn)證中的必要項(xiàng)目，旨在考察測(cè)定條件有小的變動(dòng)時(shí)，測(cè)定結(jié)果不受影響的承受程度。然而耐用性在分析方法開發(fā)之初就需要進(jìn)行考察，以液相的分析方法為例，在開發(fā)方法中進(jìn)行耐用性的考察，一方面可以優(yōu)化色譜條件，另一方面能為樣品測(cè)定提供參考。那么，耐用性考察的項(xiàng)目，考察的方法及可接受的指標(biāo)在具體的操作中如何實(shí)施和選擇呢，本人就新藥研發(fā)中的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究給予一定的小結(jié)，希望與廣大同行進(jìn)行探討。本文以液相色譜法為例：
一、耐用性考察的項(xiàng)目
以4類仿制藥的有關(guān)物質(zhì)檢查的HPLC方法開發(fā)為例，擬開發(fā)的方法一般在收載于藥典或法定藥品標(biāo)準(zhǔn)中，然而因?yàn)橐合?、色譜柱品牌的初步選擇差異，存在方法重現(xiàn)效果差的情況。此時(shí)，耐用性就會(huì)在方法開發(fā)中發(fā)揮作用。在實(shí)際的應(yīng)用中我們可以按照下面方式進(jìn)行考察。
二、考察的方法
以下色譜圖為緩沖鹽濃度微小變化造成的色譜峰保留時(shí)間變化及峰形改變：
以下色譜圖為緩沖鹽pH微小變化造成的峰形改變：
以有關(guān)物質(zhì)檢查的HPLC方法學(xué)驗(yàn)證為例，耐用性項(xiàng)目的實(shí)際進(jìn)樣可以參考如下過(guò)程：
三、可接受的指標(biāo)
注：因?yàn)樵诜椒ㄩ_發(fā)之初，已經(jīng)充分的進(jìn)行了方法耐用性的考察，所以在驗(yàn)證中可以根據(jù)方法開發(fā)報(bào)告中的結(jié)論予以評(píng)估，在選擇耐用范圍時(shí)可以更直接，在一定程度上節(jié)省了方法學(xué)驗(yàn)證中的耐用性用時(shí)，提高驗(yàn)證工作效率。
以有關(guān)物質(zhì)檢查的HPLC方法學(xué)驗(yàn)證為例，各考察指標(biāo)的可接受標(biāo)準(zhǔn)判定如下：
1、儀器精密度：雜質(zhì)限度水平為1%時(shí)，RSD≤2%。雜質(zhì)的限度水平為0.1%時(shí)，RSD≤3%。雜質(zhì)的限度水平為0.01%時(shí)，RSD≤4%。
2、系統(tǒng)適用性：理論塔板數(shù)，拖尾因子，分離度均應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的范圍內(nèi)。
3、雜質(zhì)的水平：同一因素的兩種耐用性變化與擬定條件的三種情況下的測(cè)定的結(jié)果之間進(jìn)行極差或RSD的計(jì)算，極差絕對(duì)值一般在0.2%以內(nèi)，RSD的結(jié)果根據(jù)雜質(zhì)限度水平不同，判定的結(jié)果存在一定的差異，雜質(zhì)限度水平為1%時(shí)，RSD≤2%。雜質(zhì)的限度水平為0.1%時(shí)，RSD≤3%。雜質(zhì)的限度水平為0.01%時(shí)，RSD≤4%。
注：一般極差的評(píng)價(jià)用于供試品直接測(cè)定，因?yàn)楣┰嚻分袑?shí)際存在的雜質(zhì)的量不會(huì)很大，均會(huì)低于其限度水平或者未檢出等，同時(shí)雜質(zhì)的限度比較小時(shí)，多采用極差的評(píng)價(jià)方式。當(dāng)供試品中加入100%水平的已知雜質(zhì)進(jìn)行耐用性的考察時(shí)，需要選擇RSD的方式進(jìn)行考察。因?yàn)榇藭r(shí)雜質(zhì)的水平較高。
耐用性在分析方法中占有舉足輕重的位置，無(wú)論是鑒別，含量測(cè)定，雜質(zhì)的定量和限度檢查等均需要進(jìn)行耐用性的驗(yàn)證，在開發(fā)方法之初就對(duì)耐用性進(jìn)行良好的考察，可以有效的進(jìn)行分析方法的全生命周期管理，耐用性可以保證因?yàn)閮x器差異，人員等造成的系統(tǒng)誤差情況下對(duì)測(cè)定結(jié)果的沒有影響，可以確保測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。無(wú)論是采取方法的確認(rèn)還是方法的驗(yàn)證，還是進(jìn)行方法的轉(zhuǎn)移均可以起到事半功倍的效果。因此，分析人員在分析方法的開發(fā)，驗(yàn)證中需要給予耐用性足夠的重視，并采取科學(xué)有效的評(píng)估方法對(duì)耐用性結(jié)果進(jìn)行評(píng)價(jià)，降低分析方法在生命周期管理中的風(fēng)險(xiǎn)值，保證中試，工藝驗(yàn)證，穩(wěn)定性樣品測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。
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