臨床試驗(yàn)是新藥人體試驗(yàn)的起始階段，即評(píng)價(jià)人體對(duì)于新藥的耐受性和安全性。
2003 年國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理總局(CFDA)頒布了《藥物臨床試驗(yàn)質(zhì)量管理規(guī)范》(GCP)。其中規(guī)定研究者應(yīng)獲得所在醫(yī)療機(jī)構(gòu)或主管單位的同意，保證有充分的時(shí)間在方案規(guī)定的期限內(nèi)負(fù)責(zé)和完成臨床試驗(yàn)，從而保證臨床試驗(yàn)高質(zhì)量進(jìn)行，得出真實(shí)、科學(xué)、可信的試驗(yàn)結(jié)果。
臨床試驗(yàn)的規(guī)范程度直接關(guān)系到藥物研發(fā)的成敗，在試驗(yàn)的整個(gè)過(guò)程中生物樣本處理與保存環(huán)節(jié)中尤為重要，對(duì)試驗(yàn)的結(jié)果的準(zhǔn)確性起著關(guān)鍵的作用，也是保證檢測(cè)數(shù)據(jù)真實(shí)可靠和溯源的重要依據(jù)。
本研究結(jié)合本研究室近年開(kāi)展的多個(gè)試驗(yàn)項(xiàng)目，探討生物樣本處理與保存的重要性，從而建立科學(xué)的標(biāo)本處理與保存的流程，旨在提高臨床試驗(yàn)生物樣本的安全以及試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確可靠。
1、 臨床實(shí)驗(yàn)標(biāo)本處理前準(zhǔn)備
1.1 管理制度：
在《藥物Ⅰ期臨床試驗(yàn)管理指導(dǎo)原則(試行)》中規(guī)定按照臨床試驗(yàn)方案和標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程(SOP)采集、處理和保存臨床試驗(yàn)生物樣本。樣本容器的標(biāo)識(shí)應(yīng)有足夠的信息量，易于識(shí)別和具有唯一性。
生物樣本轉(zhuǎn)運(yùn)和保存應(yīng)符合試驗(yàn)方案和相關(guān) SOP 的要求，保證其完整性和活性不受影響，并做好記錄。在試驗(yàn)過(guò)程中，應(yīng)保證生物樣本的標(biāo)識(shí)性和可溯源性，建立樣本標(biāo)識(shí)、移交和保存等相關(guān)記錄和樣本的儲(chǔ)存檔案。
嚴(yán)格的管理制度和完善的 SOP 是藥物臨床試驗(yàn)順利實(shí)施的保證。管理的規(guī)章制度可以規(guī)定實(shí)驗(yàn)室人員“應(yīng)該做什么”，而“如何規(guī)范操作”是通過(guò) SOP 具體闡述的，所以 SOP必須具備可操作性，才能將規(guī)范化落到實(shí)處。
1.2 實(shí)驗(yàn)室研究人員培訓(xùn)：
實(shí)驗(yàn)室研究人員責(zé)任心要強(qiáng)，要有扎實(shí)的技術(shù)理論基礎(chǔ)，且具有豐富實(shí)驗(yàn)操作經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)需經(jīng)過(guò) GCP 培訓(xùn)，要有嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目茖W(xué)研究態(tài)度，在每一項(xiàng)臨床試驗(yàn)前，要認(rèn)真學(xué)習(xí)臨床試驗(yàn)方案、生物樣本處理和保存的SOP，并遵循“赫爾辛基宣言”，保證臨床試驗(yàn)的質(zhì)量。充分明確工作職責(zé)，熟悉整個(gè)試驗(yàn)流程，確保臨床試驗(yàn)的準(zhǔn)確性和安全性。
1.3 儀器設(shè)備：
生物樣本的處理必須有儀器設(shè)備的保障，實(shí)驗(yàn)室應(yīng)配有-70℃超低溫冰箱、-20℃低溫冰箱、離心機(jī)、精密空調(diào)、制冰機(jī)、水浴鍋、移液器、氣體滅火裝置、溫濕控制系統(tǒng)等。
管理人員應(yīng)具有資質(zhì)并經(jīng)過(guò)操作培訓(xùn)，儀器設(shè)備有清晰的標(biāo)簽標(biāo)明其生產(chǎn)日期和運(yùn)行狀態(tài)，定期進(jìn)行維護(hù)、檢測(cè)和校準(zhǔn)，確保專(zhuān)人適時(shí)對(duì)試驗(yàn)設(shè)施設(shè)備進(jìn)行質(zhì)量控制檢查，對(duì)儀器資料進(jìn)行歸檔管理。
實(shí)驗(yàn)室設(shè)備安裝有報(bào)警系統(tǒng)，當(dāng)溫控探頭記錄的溫度超過(guò)設(shè)定的溫度范圍時(shí)，系統(tǒng)即報(bào)警提示，并自動(dòng)發(fā)送報(bào)警短信通知研究者，以便在第一時(shí)間采取相應(yīng)措施。
1.4 材料與耗材：
實(shí)驗(yàn)室人員需仔細(xì)研究試驗(yàn)方案，根據(jù)方案確保試驗(yàn)中需要的儀器設(shè)備的正常運(yùn)行，以及試驗(yàn)記錄表格和試驗(yàn)耗材準(zhǔn)備齊全。
需設(shè)計(jì)耐低溫的帶帽塑料試管標(biāo)簽，標(biāo)簽上應(yīng)標(biāo)有：項(xiàng)目名稱(chēng)、劑量組或試驗(yàn)周期、隨機(jī)號(hào)、時(shí)間點(diǎn)、是否備份等信息。經(jīng)生物樣本管理員核對(duì)無(wú)誤后，將該標(biāo)簽貼于耐低溫的帶帽塑料試管上，按一定順序進(jìn)行擺放，雙人核對(duì)。
2、生物樣本處理
2.1 生物樣本接收：
生物樣本采集完成后，由生物樣本采集者或核對(duì)者及時(shí)將樣本遞交至實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)生物樣本的編碼及數(shù)量進(jìn)行核對(duì)和接收，樣本采集者或核對(duì)者與接收人員在移接記錄本上記錄時(shí)間并簽名。
2.2 生物樣本離心：
實(shí)驗(yàn)室人員離心前需對(duì)離心機(jī)的工作狀態(tài)按照臨床試驗(yàn)方案的要求進(jìn)行設(shè)置，并盡可能選擇合適高度的轉(zhuǎn)籃，以保證離心時(shí)采集管的管帽不摩擦離心機(jī)蓋的內(nèi)壁，且不脫離管體。
將生物樣本采集管放置在離心機(jī)內(nèi)，離心試管需蓋好試管帽(若無(wú)合適高度的轉(zhuǎn)籃，可去除采集管的試管帽進(jìn)行離心)。放置分離樣品時(shí)，注意要做到輕拿輕放，防止樣本濺入其他采集管中。
2.3 生物樣本分裝：
離心結(jié)束后，應(yīng)盡快取出標(biāo)本，進(jìn)行分離，此過(guò)程需要兩人核對(duì)并簽字，確保標(biāo)本的編碼與分離后試管的編碼相對(duì)應(yīng)。根據(jù)方案的要求，確定分裝的樣本量。核對(duì)內(nèi)容包括周期(或劑量組)、受試者編號(hào)及時(shí)間點(diǎn)等。
2.4 特殊生物樣本的處理：
根據(jù)試驗(yàn)方案要求的不同：①試驗(yàn)過(guò)程中需采取避光操作；②生物樣本中需額外增加使其穩(wěn)定的溶液；③生物樣本從采集到儲(chǔ)存過(guò)程中需要采取冰浴措施。
3、生物樣本的保存與運(yùn)輸
3.1 生物樣本儲(chǔ)存：
分裝結(jié)束后，立即將樣本保存在臨床試驗(yàn)方案規(guī)定的-20℃冰箱或-70℃冰箱里。檢測(cè)樣本和備份樣本需保存在不同的冰箱中，防止其中一個(gè)冰箱出現(xiàn)故障。離心時(shí)間、樣本采集到樣本存放時(shí)間均應(yīng)嚴(yán)格按照臨床試驗(yàn)方案要求進(jìn)行。
實(shí)驗(yàn)室研究人員需記錄整個(gè)分離和保存過(guò)程，包括離心機(jī)編號(hào)、離心開(kāi)始時(shí)間、離心后分取時(shí)間、放置到冰箱的時(shí)間、冰箱開(kāi)始使用時(shí)間、結(jié)束時(shí)間、移液器開(kāi)始使用時(shí)間、結(jié)束時(shí)間，操作者以及核對(duì)者簽字。
3.2 生物樣本的取出及運(yùn)輸規(guī)范：
①專(zhuān)人負(fù)責(zé)生物樣品的包裝、裝箱、交接并記錄全過(guò)程；
②項(xiàng)目包裝運(yùn)輸人員應(yīng)與樣品管理員協(xié)商轉(zhuǎn)運(yùn)；
③從冰箱中取出凍存的生物樣品，研究者核對(duì)試驗(yàn)方案編號(hào)、試驗(yàn)藥物名稱(chēng)、受試者編號(hào)、周期、劑量組、是否備份、種類(lèi)(血、尿或者糞樣)、生物樣本的數(shù)目；
④運(yùn)輸工具為發(fā)泡塑料箱，其內(nèi)放入適量干冰。(具體條件應(yīng)依藥物在生物樣品中穩(wěn)定性和運(yùn)輸時(shí)間而定)，隨后放入溫度記錄儀，同時(shí)記錄記錄儀的編號(hào)、數(shù)量及放置時(shí)間；
⑤生物樣本運(yùn)送的外包裝應(yīng)貼有生物樣品標(biāo)記，注明到達(dá)單位和試驗(yàn)藥物名稱(chēng)，并用向上的箭頭表示不可倒置；
⑥運(yùn)輸前，填寫(xiě)樣品轉(zhuǎn)運(yùn)記錄、樣品接收記錄、樣品清單，并簽名、注明日期；
⑦運(yùn)輸員將生物樣品運(yùn)輸?shù)侥康牡睾?，接收人員應(yīng)立即檢查生物樣品運(yùn)輸?shù)臏囟惹闆r，核對(duì)數(shù)目，填寫(xiě)接收記錄。接收人員應(yīng)將接收記錄以傳真或其他方式交給本試驗(yàn)室。
臨床試驗(yàn)是一項(xiàng)在人體內(nèi)進(jìn)行的、用以回答與健康相關(guān)問(wèn)題的科學(xué)研究工作。其包含種類(lèi)很多，如新藥、新的醫(yī)療器械、新的治療與診斷技術(shù)應(yīng)用的安全性與有效性的評(píng)價(jià)，以及新的臨床治療方法的探索與驗(yàn)證等，是從動(dòng)物試驗(yàn)到臨床應(yīng)用不可逾越的橋梁。
而藥物臨床試驗(yàn)是指任何在人體(患者或健康志愿者)內(nèi)進(jìn)行的藥物系統(tǒng)性研究，以證實(shí)或發(fā)現(xiàn)試驗(yàn)藥物的藥理、臨床和/或其他藥效學(xué)方面的作用、不良反應(yīng)以及藥物的吸收、分布、代謝及排泄，目的是確定試驗(yàn)藥物的安全性和有效性。
藥物臨床試驗(yàn)一般分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期臨床試驗(yàn)與藥物生物等效性試驗(yàn)以及人體生物利用度試驗(yàn)。藥物Ⅰ期臨床試驗(yàn)是較為初步的臨床藥理學(xué)及人體安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)，通過(guò)觀察人體對(duì)于新藥的耐受程度和藥代動(dòng)力學(xué)，為臨床制定給藥方案提供依據(jù)。
藥物臨床試驗(yàn)流程包括：招募受試者、給藥、采集標(biāo)本、生物樣本處理及保存、生物樣本的運(yùn)輸?shù)?，需要各?lèi)專(zhuān)業(yè)人員，包括：醫(yī)生、護(hù)士、藥理學(xué)專(zhuān)業(yè)人員，還需要醫(yī)技人員。
規(guī)范藥物臨床試驗(yàn)生物樣本的處理及保存，是試驗(yàn)數(shù)據(jù)得以準(zhǔn)確的根本，需要通過(guò)人員培訓(xùn)與設(shè)備完善來(lái)不斷提升生物樣本的處理與保存的質(zhì)量。實(shí)驗(yàn)室研究人員作為生物樣本處理與保存的執(zhí)行者，其及時(shí)、準(zhǔn)確的處理標(biāo)本可為試驗(yàn)結(jié)果的分析或評(píng)價(jià)提供客觀、準(zhǔn)確地依據(jù)。
雖然近年來(lái)計(jì)算機(jī)和互聯(lián)網(wǎng)技術(shù)的不斷發(fā)展，電子數(shù)據(jù)采集技術(shù)具有的數(shù)據(jù)及時(shí)錄入、實(shí)時(shí)發(fā)現(xiàn)數(shù)據(jù)錯(cuò)誤、加快研究進(jìn)度等優(yōu)勢(shì) ，在臨床試驗(yàn)中被應(yīng)用。
但是，在藥物臨床試驗(yàn)研究中，為了確保處理的每個(gè)生物樣本的準(zhǔn)確性，以及試驗(yàn)數(shù)據(jù)的真實(shí)、可靠，還必須對(duì)處理和保存的各個(gè)環(huán)節(jié)采取一系列的管理措施。試驗(yàn)前，做好充分的準(zhǔn)備，包括儀器、耗材等；處理標(biāo)本中，實(shí)驗(yàn)室人員嚴(yán)格依從試驗(yàn)方案要求、遵循 SOP、嚴(yán)格執(zhí)行核對(duì)，確保每個(gè)標(biāo)本的準(zhǔn)確。
綜上所述，規(guī)范藥物臨床試驗(yàn)中的生物樣本的處理與保存，嚴(yán)格執(zhí)行 SOP，是保證藥物臨床試驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、可靠性的重要前提。
原標(biāo)題：《臨床試驗(yàn)生物樣本的處理與保存規(guī)范 》
來(lái)源：《中國(guó)藥物與臨床》2019年8月第19卷第16期
作者：朱園園 王思揚(yáng) 任 健 郝 娟 王紅霞 支婷婷 張瑞琴
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