溶劑效應(yīng)有兩種類型：溶劑選擇效應(yīng)和溶劑強度效應(yīng)。溶劑選擇效應(yīng)是指不同的溶劑會選擇性地影響各種分子的相對流動性能，進而影響分子的運移速度和分離順序。溶劑強度效應(yīng)是指溶劑濃度的變化會影響溶液的極性和流動性，從而影響分子在移動相中的行為。通常我們通過降低進樣量、稀釋劑改為流動相的方法消除。本案例是通過調(diào)節(jié)酸堿性來控制溶劑效應(yīng)。
溶劑效應(yīng)Case
問題背景:
檢測A項目濕品時峰高只有四百多，進樣量由原來的5μL進10μL會有溶劑效應(yīng)，出現(xiàn)裂峰。配樣方式為稱50mg樣品用20%乙腈稀釋到100ml。
色譜條件如下：
典型圖譜：
并且由于樣品溶解度比較差，無法通過增大濃度的方式來達到合適的峰高。
所以只能嘗試更換稀釋劑。
問題解決:
該樣品在堿水和酸水里面溶解度比較好，嘗試往稀釋劑里面加入適量TFA。
下面兩圖分別是用含0.1%TFA的20%乙腈水溶液和0.2%TFA的20%乙腈水溶液配樣的結(jié)果，如右圖所示，進10μL沒有裂峰，并且TFA含量高時，峰形會更尖銳一點。
補充驗證：取了一個樣品，用兩種稀釋劑配樣對比，與20%ACN稀釋相比，加TFA后，純度沒有變化。
解決方法：將該濕品的配樣改成稱50mg樣品稀釋到100ml，超聲溶解，進10μL，稀釋劑ACN:H2O:TFA=20:80:0.2
溶劑效應(yīng)拓展
總結(jié):本次實驗發(fā)現(xiàn)，溶劑效應(yīng)不僅與溶劑強度有關(guān)，與酸堿也有一定關(guān)系。
查詢資料得，溶劑效應(yīng)，可以理解為特定組分在稀釋劑與流動相中所處狀態(tài)的差異對色譜行為的不利影響，差異主要包括洗脫能力、電離狀態(tài)、離子締合、互變平衡等。
（1）洗脫能力：如果稀釋劑的洗脫能力大于流動相，則可能導(dǎo)致溶劑效應(yīng)。解決方法為調(diào)整稀釋劑或流動相，使二者的洗脫能力接近或稀釋劑的洗脫能力低于流動相。一般情況下，為避免洗脫能力導(dǎo)致的溶劑效應(yīng)，反相色譜中較為穩(wěn)妥的做法是稀釋劑中有機相比例低于流動相或相當(dāng)，必要時可略高于流動相
（2）化合物的電離狀態(tài)：很多可以離子化的化合物都只能部分電離；即電離平衡中一部分是離子狀態(tài)另一部分是分子狀態(tài)，兩種狀態(tài)在固定相與流動相的分配是不一樣的。在反相系統(tǒng)中，分子狀態(tài)與固定相結(jié)合更為緊密，保留更強；離子狀態(tài)則更傾向于流動相，保留較弱。
設(shè)想一種情況，如果樣品為堿性化合物，稀釋劑為pH6.8緩沖鹽溶液，流動相為pH3.0的磷酸鹽溶液-有機相系統(tǒng)，這有非常大的可能導(dǎo)致明顯峰型異常的溶劑效應(yīng)。因為樣品在pH6.8緩沖鹽溶液中的電離狀態(tài)遠低于pH3.0的磷酸鹽溶液，供試品溶液與流動相混合的過程中，需要一段時間將電離狀態(tài)從稀釋劑緩沖至流動相的狀態(tài)，如因某些原因（稀釋劑是緩沖鹽、流動相緩沖能力弱等）導(dǎo)致該時間較長，則待測組分峰極可能出現(xiàn)明顯的峰型異常。這種情況出現(xiàn)的溶劑效應(yīng)解決辦法一般有四種：更換稀釋劑使稀釋劑中待測物的電離狀態(tài)與流動相一致或接近，減少進樣量、在流動相中加入反離子或者增加流動相緩沖能力。
（3）離子締合：這種情況常見于由于待測物溶解性差在稀釋劑中含有十二烷基硫酸鈉的試驗中，待測組分峰可能嚴(yán)重變形，或者保留時間波動非常大。如果待測物為堿性化合物，則其原因為離子狀態(tài)的待測物的陽離子與十二烷基硫酸根陰離子形成離子締合物，該物質(zhì)在反相色譜中保留相對于待測物極大增強；而在流動相中并不存在該締合物，流動相消除該締合物的影響時間如果較長，則會產(chǎn)生明顯的溶劑效應(yīng)。
簡單的做法是更換稀釋劑，如稀釋劑不能更換，也可改變流動相，如在流動相中加入待測物的反離子，也形成離子締合物，減少待測物在稀釋劑與流動相中的差異。
（4）互變平衡：對于在溶液中存在互變結(jié)構(gòu)的待測物，例如酮式烯醇式互變，如果在稀釋劑與流動相中互變異構(gòu)狀態(tài)差異較大，也可能導(dǎo)致明顯的溶劑效應(yīng)。
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