引言
《化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）》中明確指出了“應(yīng)通過研究確定藥液配制后至過濾前的存放時間、藥液過濾操作的時間、過濾后至灌裝前放置的時間等工藝時限來降低除菌過濾的風(fēng)險。”
國內(nèi)制藥企業(yè)對此指導(dǎo)原則的解讀大相徑庭，導(dǎo)致了注射劑項目關(guān)于藥液存放時限的考察在實際研發(fā)生產(chǎn)過程中的做法不一，本文章，以凍干粉針劑為例，參考CDE、EU及PDA相關(guān)指導(dǎo)原則并結(jié)合作者的研發(fā)生產(chǎn)經(jīng)驗，對注射劑項目研發(fā)生產(chǎn)過程中關(guān)于藥液存放時限進行了系統(tǒng)性的考量，不足之處，還請業(yè)內(nèi)同仁指出，共同學(xué)習(xí)。
一、國內(nèi)外相關(guān)指導(dǎo)原則
1、國外相關(guān)指導(dǎo)原則
（1）EU GMP Annex 1 : Manufacture of Sterile Products(2020).
EU于2020-02-20發(fā)布GMP Annex 1 : Manufacture of Sterile Products(2020)修訂草案關(guān)于藥液存放時限的考量，如下：
從產(chǎn)品開始制備到通過除菌過濾器(如果適用)進行除菌或過濾直到無菌灌裝過程結(jié)束之間的時間。考慮到產(chǎn)品的成分和規(guī)定的存儲方法，每種產(chǎn)品應(yīng)有最大允許時間。
灌裝前無菌產(chǎn)品的保持時間。
無菌處理時間。
灌裝時間。
滅菌容器和封閉容器在關(guān)鍵加工區(qū)域(包括灌裝)密封前的最大暴露時間。
解讀：
EU的GMP對生產(chǎn)過程中的產(chǎn)品保持時間明確的進行了分階段系統(tǒng)性的考察，從而保證產(chǎn)品的質(zhì)量。
（2）PDA Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products echnical Report No. 22 (2011 Revision) of PDA.
PDA于2011年發(fā)布的《Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products echnical Report No. 22》關(guān)于無菌灌裝產(chǎn)品的工藝模擬實驗的考量，如下：
2.2Worst Case最差條件
在制藥工藝驗證中最常采用的技術(shù)之一是采用“最差條件”。采用“最差條件”是有意對工藝、系統(tǒng)、設(shè)備在更高的挑戰(zhàn)條件下進行驗證。如果在“最差條件”的挑戰(zhàn)下，仍能夠達到預(yù)期的可接受標準，那么在正常條件下，對系統(tǒng)的可靠性將有更高的信心。工藝模擬實驗很容易進行“最差條件”的挑戰(zhàn)。下面提供了類型的挑戰(zhàn):
使用的原料、組件和密封在無菌工藝區(qū)域保留時間超出范圍；
解讀：
PDA對無菌灌裝產(chǎn)品的工藝模擬實驗有著詳盡的規(guī)定，工藝模擬實驗證明了無菌生產(chǎn)工藝生產(chǎn)無菌產(chǎn)品的能力，可以根據(jù)此指導(dǎo)原則的出發(fā)點并結(jié)合產(chǎn)品在實際生產(chǎn)過程中物理及化學(xué)變化的考量，從而對藥液存放時限進行思考。
2、國內(nèi)相關(guān)指導(dǎo)原則
（1）CDE：《化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）》
國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心（CDE）于2020-12-31發(fā)布的《化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）》中對藥液存放時限有明確規(guī)定。如下：
研究確定藥液配制后至過濾前的存放時間、藥液過濾操作的時間、過濾后至灌裝前放置的時間等工藝時限，降低除菌過濾的風(fēng)險。
解讀：
CDE參考了EU、FDA、PDA等相關(guān)指導(dǎo)原則并結(jié)合實際生產(chǎn)，關(guān)注到了無菌工藝生產(chǎn)過程中關(guān)鍵工序的風(fēng)險點（工序?qū)Ξa(chǎn)品物理、化學(xué)、生物學(xué)及微生物學(xué)的影響），從而對藥液存放時限的考察制定了科學(xué)合理的規(guī)定。
二、藥液存放時限的系統(tǒng)性考量
藥液存放時限的系統(tǒng)性考量需要依據(jù)車間實際生產(chǎn)步驟（生產(chǎn)系統(tǒng)、設(shè)備參數(shù)及生產(chǎn)組件）指導(dǎo)小試開發(fā)，再根據(jù)小試開發(fā)結(jié)果進行放大生產(chǎn)驗證，從而形成可持續(xù)生產(chǎn)出符合質(zhì)量要求的產(chǎn)品工藝。
1、藥液存放時限的開發(fā)
（1）評估生產(chǎn)工序?qū)λ幰捍娣艜r限的風(fēng)險；
（2）根據(jù)可能影響藥液存放時限的工藝參數(shù)，進行小試開發(fā)；
（3）根據(jù)小試開發(fā)結(jié)果進行放大生產(chǎn)驗證；
（4）根據(jù)放大生產(chǎn)驗證的結(jié)果指導(dǎo)工藝驗證；
（5）形成科學(xué)合理的藥液存放時限；
2、生產(chǎn)工序?qū)λ幰捍娣艜r限的風(fēng)險評估
（1）關(guān)鍵工藝步驟評估
（2）關(guān)鍵工藝參數(shù)評估
（3）生產(chǎn)過程中的存放時限
（4）確定生產(chǎn)過程中的存放時限
① 配制開始至過濾結(jié)束；
② 過濾結(jié)束至凍干開始；
③ 灌裝開始至凍干開始；
④ 凍干結(jié)束至軋蓋結(jié)束；
3、藥液存放時限的小試開發(fā)
3.1 配制、過濾及灌裝
注意事項：
（1）配制開始至過濾結(jié)束，溫度：常溫配制的產(chǎn)品一般考察10℃~30℃，高溫X℃配制的產(chǎn)品一般考察X-5℃~X+5℃，特殊品種另外考慮；
（2）配制開始至過濾結(jié)束，時間：對于普通凍干粉針劑從配制開始到配置結(jié)束一般不超過4h，中間產(chǎn)品檢測一般不超過2h，過濾一般不超過0.5h，考察10h是為了應(yīng)對生產(chǎn)異常，特殊品種另外考慮；
（3）過濾結(jié)束至凍干開始，溫度：無論是常溫配制還是高溫配制一般都在配制結(jié)束降至常溫過濾灌裝，低溫配制灌裝產(chǎn)品、降溫后改變藥液狀態(tài)（如黏度）產(chǎn)品等特殊品種另外考慮；
（4）過濾結(jié)束至凍干開始，時間：對于普通凍干粉針劑從灌裝開始至凍干開始一般不超過8h，過濾結(jié)束至凍干開始考察14h是為了應(yīng)對生產(chǎn)異常，特殊品種另外考慮；
（5）通過對生產(chǎn)過程分析，產(chǎn)品與光照接觸的位置有：
① 投料時短暫接觸；
② 灌裝時短暫接觸；
③ 灌裝機停機時接觸；
④ 灌裝完成轉(zhuǎn)移至凍干機短暫接觸；
⑤ 凍干機等待開始凍干時接觸；
制藥生產(chǎn)車間一般采用熒光燈（照度為300lx），小試考察光照箱（5000Lux，90μW/cm2，25℃）、室內(nèi)光、熒光可覆蓋正常生產(chǎn)時的光源，考察時間24h可覆蓋產(chǎn)品與光照最長接觸時間，特殊品種另外考慮；
3.2 冷凍干燥
不考察
3.3 軋蓋
注意事項：
（1）凍干結(jié)束至軋蓋結(jié)束，時間：對于普通凍干粉針劑從凍干結(jié)束至軋蓋結(jié)束一般不超過8h，考察10h是為了應(yīng)對生產(chǎn)異常，特殊品種另外考慮；
4、放大生產(chǎn)過程中考察藥液存放時限
依據(jù)小試開發(fā)結(jié)果設(shè)計放大生產(chǎn)中關(guān)于藥液存放時限的考察，若小試開發(fā)上述考察結(jié)果皆不影響產(chǎn)品質(zhì)量，可依據(jù)小試開發(fā)結(jié)果設(shè)計放大生產(chǎn)，若小試開發(fā)上述考察結(jié)果影響產(chǎn)品質(zhì)量，則重新設(shè)計小試工藝。
4.1 模擬存放
4.1.1 配制
注意事項：
（1）存放容器盡量選擇和配制罐材質(zhì)一致，頂空氣體與配制罐一致；
（2）存放條件（溫度、光照）與在配制罐一致；
（3）配制開始至過濾結(jié)束時限目標定為8h，考察10h留有冗余；
（4）使用經(jīng)驗證的濾器不會改變產(chǎn)品的理化性質(zhì)，考察22h包含過濾結(jié)束至凍干開始12h，考察24h留有冗余；
4.1.2 過濾
注意事項：
（1）時間點的選擇需以配置開始10h為過濾結(jié)束0h計時；
（2）過濾結(jié)束至凍干開始目標定為12h，考察14h留有冗余；
4.1.3 灌裝
注意事項：
（1）過濾結(jié)束至凍干開始時限包含灌裝開始至凍干開始時限；
（2）存放條件與正常生產(chǎn)一致（A級層流）；
（3）根據(jù)灌裝開始的含量確定排液體積；
（4）灌裝開始至凍干開始時限目標定為8h，考察10h留有冗余；
4.1.4 冷凍干燥
不考慮時限；
4.1.5 軋蓋
注意事項：
（1）存放條件與正常生產(chǎn)一致（A級層流）；
（2）凍干結(jié)束至軋蓋結(jié)束時限目標定為8h，考察10h留有冗余；
4.2 真實存放
4.2.1 配制
注意事項：
（1）配制開始后10h過濾；
（2）過濾前將用于22h、24h取樣檢測的藥液取出，待過濾完成倒回配制罐；
4.2.2 過濾
注意事項：
（1）過濾結(jié)束14h再開始凍干；
4.2.3 灌裝
注意事項：
（1）灌裝開始10h再開始凍干；
（2）在凍干結(jié)束后取灌裝在8h~10h之間的樣品用于影響因素或穩(wěn)定性考察；
4.2.4 冷凍干燥
不考慮時限；
4.2.5 軋蓋
注意事項：
（1）軋蓋工序時限模擬存放與真實持續(xù)相應(yīng)時間存放無明顯差別，可模擬存放；
5 工藝驗證過程中考察藥液存放時限
依據(jù)放大生產(chǎn)過程中藥液存放時限考察的結(jié)果設(shè)計工藝驗證藥液存放時限，若放大生產(chǎn)上述考察結(jié)果皆不影響產(chǎn)品質(zhì)量，可依據(jù)放大生產(chǎn)結(jié)果設(shè)計工藝驗證存放時限，若放大生產(chǎn)上述考察結(jié)果影響產(chǎn)品質(zhì)量，則重新設(shè)計放大生產(chǎn)工藝或依據(jù)相應(yīng)數(shù)據(jù)設(shè)計工藝驗證藥液存放時限。
三、參考資料
1、化學(xué)藥品注射劑滅菌和無菌工藝研究及驗證指導(dǎo)原則（試行）
2、《中國藥典》（ 2020年版）中國醫(yī)藥科技出版社， 2020.
3、國家藥品監(jiān)督管理局.關(guān)于發(fā)布除菌過濾技術(shù)及應(yīng)用指南等3個指南的通告（2018年第85號）
4、EU.GMP Annex 1 : Manufacture of Sterile Products(2020).
5、EMA. Guideline on the sterilisation of the medicinal product, active substance, excipient and primary container(2019).
6、PDA Process Simulation Testing for Aseptically Filled Products echnical Report No. 22 (2011 Revision) of PDA.
京公網(wǎng)安備11010802046783號
