引言
重組人源化膠原蛋白僅是重組膠原蛋白的一類，是由DNA重組技術(shù)制備的人膠原蛋白特定型別基因編碼的全長(zhǎng)或部分氨基酸序列片段，或是含人膠原蛋白功能片段的組合。
國(guó)家藥監(jiān)局器審中心為進(jìn)一步規(guī)范重組人源化膠原蛋白原材料的管理，組織制定了《重組人源化膠原蛋白原材料評(píng)價(jià)指導(dǎo)原則》，也為重組人源化膠原蛋白原材料生物學(xué)評(píng)價(jià)提供了新的思路。該原則回答了以下5個(gè)生物學(xué)評(píng)價(jià)相關(guān)問(wèn)題：
問(wèn)：重組人源化膠原蛋白原材料如何開展生物學(xué)評(píng)價(jià)？
答：需參照GB/T 16886.1的要求對(duì)重組人源化膠原蛋白原材料原材料進(jìn)行必要的生物學(xué)評(píng)價(jià)，尤其通過(guò)膠原蛋白材料到醫(yī)療器械終產(chǎn)品的加工工藝分析發(fā)現(xiàn)，兩者之間的生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)相近時(shí)。
如預(yù)期用于植入產(chǎn)品的原材料，還需評(píng)估樣品是否為內(nèi)源性凝血系統(tǒng)激活物。若醫(yī)療器械終產(chǎn)品與膠原蛋白材料的使用方法不一致，需考慮生物學(xué)補(bǔ)充研究。
根據(jù)GB/T 42062《醫(yī)療器械 風(fēng)險(xiǎn)管理對(duì)醫(yī)療器械的應(yīng)用》描述的風(fēng)險(xiǎn)管理過(guò)程進(jìn)行生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)定，識(shí)別材料、添加劑、加工助劑和其他潛在可瀝濾物中的危害，接觸劑量等因素，繪制基于風(fēng)險(xiǎn)管理的生物學(xué)評(píng)價(jià)流程圖。
問(wèn)：重組人源化膠原蛋白原材料需要考慮哪些生物學(xué)終點(diǎn)？
答：按照GB/T 16886.1，重組人源化膠原蛋白應(yīng)考慮的生物學(xué)風(fēng)險(xiǎn)終點(diǎn)包括：
致敏反應(yīng)：注射膠原、膠原止血?jiǎng)┑染哂袧撛谏锟山到庑圆牧?，或體內(nèi)植入材料以及材料制備過(guò)程中新增了化學(xué)成分和制造加工助劑、裝配粘合劑/溶劑殘留物，以及成品中可能存在滅菌殘留物或滅菌過(guò)程所致的反應(yīng)性產(chǎn)物時(shí)，需進(jìn)行遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗(yàn)。
皮內(nèi)反應(yīng)：注射膠原、膠原止血?jiǎng)┑染哂袧撛谏锟山到庑圆牧匣蝮w內(nèi)植入材料以及材料制備過(guò)程中新增化學(xué)成分和制造加工助劑、裝配粘合劑/溶劑殘留物以及滅菌殘留物或滅菌過(guò)程所致的反應(yīng)性產(chǎn)物可能存在于成品時(shí)需進(jìn)行皮內(nèi)刺激試驗(yàn)。
溶血性：血管修復(fù)材料、創(chuàng)傷和燒傷修復(fù)材料、膠原止血?jiǎng)?、心臟瓣膜等與循環(huán)血液接觸的外部接入材料和大部分植入材料以及全部植入血管系統(tǒng)材料需進(jìn)行溶血試驗(yàn)。
植入反應(yīng)：皮下植入（膠原支架、血管修復(fù)材料、創(chuàng)傷和燒傷修復(fù)材料、膠原止血?jiǎng)┑瓤山到?可吸收材料或需植入生物材料等需進(jìn)行皮下組織植入試驗(yàn)進(jìn)行評(píng)價(jià)）；肌肉植入；骨植入。
其他生物學(xué)終點(diǎn)：細(xì)胞毒性、皮膚刺激性、材料介導(dǎo)的致熱性、全身毒性、遺傳毒性。
問(wèn)：是否需要開展重組人源化膠原蛋白原材料的包材相容性研究？
答：如產(chǎn)品涉及貯存，需對(duì)直接接觸的包裝容器開展相應(yīng)的包材相容性研究。
對(duì)制備工藝中與樣品接觸的容器和一次性使用材料（如貯存袋、過(guò)濾膜、層析介質(zhì)、管路等），需開展風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估和/或相應(yīng)的相容性研究。
問(wèn)：為什么需要開展重組人源化膠原蛋白原材料的免疫毒理學(xué)評(píng)價(jià)？
答：部分人膠原蛋白核酸序列進(jìn)行編輯組合而重組的蛋白質(zhì)產(chǎn)物，特別是長(zhǎng)期反復(fù)使用時(shí)，可能引起人體預(yù)測(cè)不到的免疫原性。
當(dāng)擬生產(chǎn)醫(yī)療器械免疫原性風(fēng)險(xiǎn)與已上市產(chǎn)品無(wú)可比性，且無(wú)充分的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)評(píng)價(jià)其免疫原性，需進(jìn)行免疫毒理學(xué)試驗(yàn)研究。
通過(guò)免疫毒理學(xué)試驗(yàn)，可對(duì)炎癥反應(yīng)、免疫抑制、免疫刺激、超敏反應(yīng)以及自身免疫進(jìn)行確證評(píng)價(jià)，從而評(píng)估免疫系統(tǒng)改變導(dǎo)致的潛在人體不良健康作用。
問(wèn)：如何開展重組人源化膠原蛋白原材料的免疫毒理學(xué)評(píng)價(jià)？
答：免疫學(xué)安全性研究是重組人源化膠原蛋白材料生物安全性研究資料的主體。但是，用傳統(tǒng)生物試驗(yàn)方法來(lái)評(píng)價(jià)重組人源化膠原蛋白往往有困難，并受多種因素的影響。
可參考GB/T 16886.20《醫(yī)療器械免疫毒理學(xué)試驗(yàn)原則和方法》選擇性進(jìn)行功能性或非功能性免疫毒理學(xué)試驗(yàn)，也可通過(guò)嚙齒動(dòng)物試驗(yàn)方式檢測(cè)和評(píng)價(jià)物質(zhì)的不良作用。
免疫毒理學(xué)可通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)（FCM）、酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）、組織病理切片等方法測(cè)定，試驗(yàn)方法可考慮結(jié)合生物學(xué)試驗(yàn)、體外T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)（YY/T 1465.1《醫(yī)療器械免疫原性評(píng)價(jià)方法 第1部分 體外T淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化試驗(yàn)》）等。
參考文獻(xiàn)：
[1] GB/T 16886.1, "醫(yī)療器械生物學(xué)評(píng)價(jià) 第1部分：風(fēng)險(xiǎn)管理過(guò)程中的評(píng)價(jià)與試驗(yàn)," 中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn), 2022.
[2] 國(guó)家藥品監(jiān)督管理局. 藥物涂層球囊擴(kuò)張導(dǎo)管注冊(cè)審查指導(dǎo)原則：國(guó)家藥品監(jiān)督管理局通告2023年第9號(hào)[Z].
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