近年來(lái)，隨著新型合成方法、加工技術(shù)的不斷出現(xiàn)，使得具有尺寸精準(zhǔn)，特定幾何形狀、帶有表面電荷等獨(dú)特性質(zhì)的新型高分子納米材料發(fā)展迅速。許多高分子納米材料應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域，隨著越來(lái)越多的納米生物材料應(yīng)用于臨床，產(chǎn)生了一系列的納米安全性問(wèn)題。人體內(nèi)存在縱橫交錯(cuò)，豐富而發(fā)達(dá)的血管網(wǎng)絡(luò)，應(yīng)用于體內(nèi)的納米材料最終將不可避免會(huì)進(jìn)入到血液組織中。一旦納米粒子進(jìn)入血液組織，它就有可能與蛋白、細(xì)胞膜、細(xì)胞等接觸而產(chǎn)生某種聯(lián)系，發(fā)生相互作用，由此可能導(dǎo)致納米粒子發(fā)生溶血毒性。接下來(lái)和大家一起探討醫(yī)療器械的納米溶血。
1、什么是溶血實(shí)驗(yàn)？
溶血試驗(yàn)作為血液相容性試驗(yàn)之一，用于在體外測(cè)定由醫(yī)療器械、材料和（或）其浸提液導(dǎo)致的紅細(xì)胞溶解和血紅蛋白釋放的程度。
2、納米材料溶血試驗(yàn)的原理：
直接/間接與血液接觸的納米材料及組合在醫(yī)療器械中游離或釋放的納米材料會(huì)引起急性體外紅細(xì)胞破壞。該試驗(yàn)的原理是除硫化血紅蛋白外，血紅蛋白及其衍生物在堿性條件下可被高鐵氰化鉀氧化成高鐵蛋白，高鐵血紅蛋白與氰化鉀反應(yīng)生成氰化高鐵蛋白（CMH），采用微光孔板分光光度計(jì)（或酶標(biāo)儀）在540nm波長(zhǎng)處讀數(shù)測(cè)定CMH吸光度值。結(jié)果用納米材料與血液接觸釋放到血漿中的血漿游離血紅蛋白（PFH）占總血紅蛋白（TBH）的百分比。
3、納米材料溶血試驗(yàn)與常規(guī)溶血試驗(yàn)的不同
|
納米材料溶血 |
常規(guī)溶血 |
|
對(duì)照不同 |
陰性對(duì)照：40%PEG貯存原液 |
陰性對(duì)照：聚乙烯 |
|
陽(yáng)性對(duì)照：10%TRTON X-100水溶液 |
陽(yáng)性對(duì)照：丁腈手套 |
|
血液制備不同 |
使用3.8%檸檬酸三鈉采血 |
使用3.2%檸檬酸鈉采血 |
|
稀釋不同因子 |
18 |
16 |
|
接受準(zhǔn)則不同 |
除最低濃度的Cal外，每一Cal的PDFT應(yīng)在20%之內(nèi)，最低濃度Cal的PDFT在30%之內(nèi)；3個(gè)QC中有2個(gè)或每一個(gè)QC的至少一個(gè)平行孔的PDFT在20%之內(nèi)；QC的CV在20%之內(nèi)。 |
陰性對(duì)照的溶血率應(yīng)＜2%； |
|
每一陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及試驗(yàn)樣品的CV應(yīng)在20%之內(nèi)，否則應(yīng)重新實(shí)驗(yàn) |
陽(yáng)性對(duì)照的溶血率應(yīng)＞5%，否則應(yīng)重新實(shí)驗(yàn) |
4、納米溶血的結(jié)果分析
當(dāng)試驗(yàn)樣品的溶血百分率＞5%時(shí)，表明試驗(yàn)材料會(huì)引起紅細(xì)胞的破壞。對(duì)于納米材料溶血，需計(jì)算試驗(yàn)樣品引起溶血百分率為5%時(shí)對(duì)應(yīng)的濃度。
京公網(wǎng)安備11010802046783號(hào)
