常規(guī)問題
1. 蒸汽滅菌柜（高壓滅菌釜）的生產(chǎn)商是誰？
2. 高壓滅菌釜的型號，使用年限，內(nèi)部容積是多少？
3. 滅菌介質(zhì)是什么(例如，蒸汽，高壓，過熱水，γ射線)？
4. 如果是帶夾層的，相對腔體內(nèi)，夾層的壓力/溫度維持在什么水平？
5. 使用什么類型的空氣過濾器，多長時(shí)間檢測一次完整性？
6. 空氣過濾器是疏水性的嗎？濾殼是否帶加熱以預(yù)防冷凝水的產(chǎn)生?
7. 滅菌周期是手動控制還是自動控制？
8. 使用了什么類型的監(jiān)測和控制傳感器（例如汞-玻璃溫度計(jì)，熱電偶，熱電阻，壓力計(jì)）？
9. 這些傳感器是怎么校準(zhǔn)的？適當(dāng)時(shí)，美國國家標(biāo)準(zhǔn)與技術(shù)研究所（National Institute of Standards and Technology ，NIST）標(biāo)準(zhǔn)是否可追溯（或者海外公司可追溯至國家標(biāo)準(zhǔn)）？
10. 該滅菌柜是否裝有蒸汽分散器（對于這一類型滅菌柜，考慮帶有多于一種類型的蒸汽入口線）？
11. 如果該公司使用了一臺以上的高壓滅菌釜，當(dāng)所有高壓滅菌釜都同時(shí)運(yùn)行時(shí)對應(yīng)的系統(tǒng)的蒸汽產(chǎn)能是多少？
12. 滅菌周期參數(shù)是什么?(應(yīng)將受檢藥品的主工藝記錄/SOP 標(biāo)準(zhǔn)與已完成的工藝記錄進(jìn)行比較)
13. 對于以下參數(shù)，該公司的標(biāo)準(zhǔn)和現(xiàn)場觀察到的參數(shù)分別是多少：
• 時(shí)間
• 溫度
• 壓力（psi, 多少汞柱）
14. 滅菌控制探頭位置在哪兒？
15. 問題13中的每個(gè)滅菌參數(shù)分別是如何監(jiān)控的？與驗(yàn)證研究中達(dá)到的升溫時(shí)間相比，滅菌過程中腔內(nèi)溫度的升溫時(shí)間是否可重現(xiàn)？
16. 每個(gè)高壓滅菌周期內(nèi)，每一個(gè)負(fù)載模式下監(jiān)測的熱點(diǎn)（冷點(diǎn)）是否最慢？
17. 自上次現(xiàn)場檢查以來，蒸汽滅菌系統(tǒng)是否有變更？是否對這些變更進(jìn)行評估確認(rèn)是否需要再驗(yàn)證？
18. 是否使用了潔凈蒸汽（控制細(xì)菌內(nèi)毒素）？
驗(yàn)證
19. 該公司是否有書面驗(yàn)證規(guī)程并包括以下內(nèi)容：
• 設(shè)計(jì)目標(biāo)
• 設(shè)備的安裝確認(rèn)（Installation qualification，IQ）
• 設(shè)備的運(yùn)行確認(rèn)（Operational qualification，OQ）
• 產(chǎn)品的性能確認(rèn)（Performance qualification，PQ）(申請文件中提交的最大和最小負(fù)載，以及后續(xù)的所有變更)
• 關(guān)于該系統(tǒng)需要再驗(yàn)證的情況的描述
• 再驗(yàn)證的規(guī)程
20. 驗(yàn)證文件是否包括了以下內(nèi)容：
A. 空載/負(fù)載熱分布研究:
• 運(yùn)行次數(shù)？
• 是否確定了冷點(diǎn)？
• 允許的偏差范圍？
• 實(shí)際的偏差范圍？
• 什么是最差情況的負(fù)載？
B. 熱穿透研究
• 是否對所使用的每種負(fù)載模式/每種尺寸的容器都做了熱穿透？
• 每種負(fù)載模式做了幾次實(shí)驗(yàn)？
• 是否確定了每種負(fù)載模式的冷點(diǎn)？
• 既定的負(fù)載配置是否在注冊申請和/或后續(xù)報(bào)告變更（適用時(shí)）中提交？
21. 使用的是何種溫度測量系統(tǒng)？是否每一個(gè)熱電偶都可以提供一個(gè)可獨(dú)立印刷的讀數(shù)？
22. 使用的是何種類型的溫度傳感器，每次運(yùn)行之前和之后是否對每個(gè)傳感器進(jìn)行了校準(zhǔn)？
23. 如果驗(yàn)證過程中使用了生物指示劑，請?zhí)峁?/span>
• 指示劑類型(子條，接種產(chǎn)品，安瓿)
• 指示劑來源
• 所使用的微生物，包括濃度和 D 值；
• 生物指示劑是否被用在“終點(diǎn)”或“數(shù)值下降”模式中？如果發(fā)現(xiàn)了任何陽性的生物指示劑（預(yù)期之外的），該公司是怎么處理的？
23. 如果在研究過程中發(fā)現(xiàn)熱分布或熱穿透有偏差，該公司是怎么糾正或者允許這種偏差的？
24. 該公司是否已經(jīng)對各種尺寸/重量的容器，產(chǎn)品粘度等延遲時(shí)間都有確定，并對其滅菌周期進(jìn)行了相應(yīng)的調(diào)整？
干熱滅菌/除熱原
干熱滅菌器主要用于盛裝注射藥品的玻璃容器的滅菌和除熱原。使用干熱烘箱和干熱隧道烘箱。烘箱是分批的工藝，在滅菌周期的結(jié)束后，無菌西林瓶被手動從烘箱中移出，轉(zhuǎn)運(yùn)并手動裝載到灌裝線上。干熱隧道烘箱使用的是連續(xù)的，集成化的工藝。在隧道中，西林瓶經(jīng)傳送帶從清洗區(qū)轉(zhuǎn)移到加熱區(qū)，并在此區(qū)內(nèi)進(jìn)行滅菌和除熱原，然后經(jīng)過冷卻區(qū)，最終直接進(jìn)入灌裝線的百級區(qū)域。通常情況下，公司都會驗(yàn)證玻璃容器的除熱原情況，而不是滅菌周期。這基于一般去除熱原或滅活熱原物質(zhì)比去除/變性微生物更困難。經(jīng)過了干熱除熱原工藝的組件就認(rèn)為是無菌的。
常規(guī)問題
25. 確定使用了何種類型的干熱滅菌器（烘箱，隧道）？
26. 確定熱原的位置。產(chǎn)生除熱原溫度的加熱元件/裝置能夠影響 HEPA 過濾器及其提供預(yù)期過濾非活性粒子的能力。例如，高溫會使 HEPA 濾網(wǎng)和濾殼產(chǎn)生膨脹和擠壓，這會損害過濾器的可靠性和功能。
27. 烘箱或者隧道內(nèi)的熱度是怎么分布的(風(fēng)扇或熱對流)？
28. 烘箱或者隧道內(nèi) HEPA 過濾器的位置在哪兒？隧道內(nèi)的哪些區(qū)域是 HEPA 過濾器送風(fēng)（進(jìn)瓶，加熱，冷卻區(qū)域）？隧道內(nèi)的冷卻段是否可以提供百級的潔凈條件，以保持容器的無菌性？哪些區(qū)域是按照百級進(jìn)行控制的？
29. 由于熱動力學(xué)（360 度以上的高溫會導(dǎo)致濾殼的膨脹和擠壓），HEPA 過濾器一般每 6 個(gè)月進(jìn)行一次完整性測試。但是，根據(jù)其用于除熱原隧道的使用次數(shù)，以及熱隧道外圍中獲得的粒子監(jiān)測數(shù)據(jù)，可能會需要增加完整性測試的頻率。該公司是如何保證 HEPA 過濾器的完整性的？多長時(shí)間更換一次 HEPA 過濾器？
30. 隧道中熱空氣的非活性粒子是否有監(jiān)控？由于溫度較高，在日常操作中不會對去熱原隧道的百級/ISO-5 區(qū)域里的非活性粒子進(jìn)行監(jiān)測。但是，應(yīng)對 ISO 5 級區(qū)域內(nèi)的非活性粒子的定期測量進(jìn)行核實(shí)，該測量通常是在批生產(chǎn)/生產(chǎn)周期前后，并且在室溫下。
31. 滅菌/除熱原的周期是人工還是自動控制的？
32. 使用了何種類型的監(jiān)測和控制傳感器（例如，熱電偶，熱電阻，壓力表，傳送帶速度指示器）？校準(zhǔn)頻率？
參數(shù)
33. 滅菌/除熱原周期參數(shù)或設(shè)備設(shè)置是什么？應(yīng)將主生產(chǎn)記錄/SOP 標(biāo)準(zhǔn)與特定代表性產(chǎn)品的工藝記錄進(jìn)行比較。
34. 該公司的滅菌時(shí)間、溫度、傳送帶速度，壓力的標(biāo)準(zhǔn)是什么？
35. 關(guān)鍵參數(shù)是什么？它們是怎么建立的？該公司如何保證每一批或者每個(gè)周期的關(guān)鍵參數(shù)都符合要求？
36. 用于滅菌周期控制器的傳感器擺放在哪里？
37. 上述每一參數(shù)是如何監(jiān)測的？是否有哪個(gè)參數(shù)沒有監(jiān)測？連續(xù)系統(tǒng)中的關(guān)鍵參數(shù)，例如隧道烘箱使用的關(guān)鍵參數(shù)，是否有警報(bào)？如果出現(xiàn)警報(bào)，企業(yè)做了什么？
38. 對于烘箱的每一周期或隧道的連續(xù)運(yùn)轉(zhuǎn)，該公司如何保證所有的關(guān)鍵參數(shù)都符合要求？
39. 如果關(guān)鍵參數(shù)（熱，傳送帶速度，壓力）沒有達(dá)到要求，干熱隧道是否會有警報(bào)以警戒操作員？警報(bào)是否有記錄？造成警報(bào)的滅菌條件是否需要實(shí)施變更控制？是否會影響已驗(yàn)證的工藝?
40. 自上次檢查至今，干熱滅菌/除熱原系統(tǒng)是否發(fā)生了變更？這些變更有無經(jīng)過評估決定是否需要再驗(yàn)證？
驗(yàn)證
41. 該公司是否有書面的干熱滅菌器的資質(zhì)確認(rèn)規(guī)程，包括以下方面：
• 設(shè)計(jì)目的
• 設(shè)備的 IQ
• 設(shè)備的 OQ
• 產(chǎn)品的 PQ
• 對需要再驗(yàn)證和規(guī)程的情況的描述
42. 驗(yàn)證文件是否包括熱分布/穿透研究？
• 該公司允許的溫度偏差范圍是多少？實(shí)際生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)的偏差范圍是多少？
• 使用的是何種溫度測量系統(tǒng)？
• 驗(yàn)證前后是否進(jìn)行了校準(zhǔn)？
• 如果干熱滅菌器是烘箱，是否已確定最慢加熱區(qū)域？
43. 除熱原周期是怎么驗(yàn)證的？
• 是否向西林瓶中添加已知量的內(nèi)毒素？
• 是否允許內(nèi)毒素在西林瓶上干燥？
• 是否通過回收實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證確保所添加的標(biāo)準(zhǔn)內(nèi)毒素都可以回收？西林瓶是否添加了足夠的內(nèi)毒素進(jìn)行試驗(yàn)，已達(dá)到下降 3-Log？
• 驗(yàn)證批的滅菌周期和設(shè)備設(shè)置是什么？
• 是否達(dá)到了內(nèi)毒素下降 3-Log？
44. 是否所有的西林瓶進(jìn)行除熱原周期驗(yàn)證，或企業(yè)是否使用了矩陣法？如果使用了矩陣法（西林瓶尺寸/重量），使用什么標(biāo)準(zhǔn)挑選最差情況以試驗(yàn)這個(gè)系統(tǒng)？是否包括所有西林瓶的類型和尺寸？
45. 驗(yàn)證研究完成后干熱滅菌器的周期或設(shè)備設(shè)置有沒有變更？比較驗(yàn)證研究，現(xiàn)行 SOPs和最近批次的工藝記錄。
無菌灌裝
46. 在生產(chǎn)過程中觀察操作人員是否根據(jù)既定潔凈室 SOPs 的要求，踐行適當(dāng)?shù)臐崈羰倚袨椤?/span>
47. 是否可以不進(jìn)入潔凈室就能觀察到無菌灌裝工藝（例如，通過窗子或者 TV 監(jiān)控錄像）？
A. 如果可以，則觀看/觀察從配料區(qū)到灌裝、再到最終制劑的密封的無菌灌裝工藝，包括實(shí)際生產(chǎn)過程中關(guān)鍵區(qū)域所進(jìn)行的環(huán)境監(jiān)測。
B. 如果不可以，考慮進(jìn)入到潔凈室里去觀察無菌灌裝，例如，在萬級（ISO7 級）區(qū)域觀察。在進(jìn)入之前，詢問地區(qū)辦公室。
• 人員是否進(jìn)入灌裝線上的關(guān)鍵百級(ISO 5)區(qū)域并進(jìn)行干預(yù)？如果是，這些是如何記錄的？
• 進(jìn)入/干預(yù)是如何完成的（全身進(jìn)入，還是只有雙手進(jìn)入）？
• 為什么？
• 這種做法是常規(guī)性的還是偶爾常發(fā)生的？
• 是否使用了適當(dāng)?shù)臒o菌技術(shù)？[參考: FDA 2004 無菌工藝指南 V.A 部分.]
• 人員的手或者胳膊是否會經(jīng)過開放的、裝有無菌成分的西林瓶上？如果是，這些西林瓶是否被剔除？
48. 該公司是否有描述藥品的無菌灌裝的書面規(guī)程？是否包括了相應(yīng)的對百級區(qū)域進(jìn)行干預(yù)的無菌技術(shù)和可以接受的技術(shù)的討論？
49. 審核非活性粒子，活性粒子和人員的監(jiān)測數(shù)據(jù)的趨勢報(bào)告。
• 該公司是否已經(jīng)識別出某些趨勢？如果是，采取了什么措施？
• 對于超出限度的結(jié)果是否進(jìn)行了調(diào)查？
無菌灌裝驗(yàn)證
參考：FDA 2004 無菌工藝指南 IX 部分
50. 用于培養(yǎng)基灌裝的工藝與商業(yè)批藥品的無菌灌裝工藝相比如何？該公司是否對日常的（隨著時(shí)間變化）生產(chǎn)操作與培養(yǎng)基灌裝的設(shè)計(jì)進(jìn)行了精確的對比評估？該公司是否有詳細(xì)的培養(yǎng)基灌裝工藝規(guī)程，包括頻率，試驗(yàn)條件，人員參與，容器/密封件，干預(yù)，灌裝時(shí)間，西林瓶的物料平衡，驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)，培養(yǎng)，培養(yǎng)后檢查，如果有發(fā)現(xiàn)陽性生長需要采取的行動等。
51. 要求提供一份自上次檢查以來所進(jìn)行的所有的培養(yǎng)基灌裝的總結(jié)，包括批號識別，灌裝日期，生產(chǎn)線，單位灌裝瓶數(shù)，單位培養(yǎng)瓶數(shù)，未生長的瓶數(shù)，有陽性生長的瓶數(shù)，有菌生長的容器里的微生物鑒別，培養(yǎng)基灌裝單位的處置等。
• 是否按照規(guī)程規(guī)定的頻率進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝？
• 是否有培養(yǎng)基灌裝出現(xiàn)過陽性生長？
• 是否有培養(yǎng)基灌裝沒有符合驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)？
52. 當(dāng)發(fā)現(xiàn)已灌裝培養(yǎng)基的西林瓶中有陽性生長時(shí)，是否遵照了規(guī)程的要求？是否對所有陽性生長的已灌裝培養(yǎng)基的西林瓶都進(jìn)行了調(diào)查？當(dāng)培養(yǎng)基灌裝未能符合驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)時(shí)做了什么？審核所有陽性生長的調(diào)查。
53. 是否所有班次（例如，階段性生產(chǎn)時(shí)代表性班次的操作）都進(jìn)行了培養(yǎng)基灌裝？培養(yǎng)基灌裝是否包括了日常生產(chǎn)中出現(xiàn)的換班或中斷情況？
54. 什么時(shí)候培養(yǎng)基灌裝可以中止或者灌裝單位可以中止培養(yǎng)？如果在灌裝過程中存在相同的情況，該生產(chǎn)批是否為不合格？
55. 培養(yǎng)基灌裝項(xiàng)目是否包括所有的人員？是否包括了無菌灌裝線的裝配人員和機(jī)械師？該公司有什么系統(tǒng)可以保證所有的人員都能被包括進(jìn)來？
56. 如果實(shí)際生產(chǎn)中使用了終端過濾器，培養(yǎng)基灌裝中是否也使用了？
57. 培養(yǎng)基灌裝過程中使用了哪種尺寸的西林瓶或者安瓿？如果公司沒有使用該條生產(chǎn)線上灌裝的所有容器/密封件配置進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝，評估其選擇最差條件試驗(yàn)的依據(jù)是否合理。
58. 西林瓶在培養(yǎng)之前是否進(jìn)行了翻轉(zhuǎn)以保證培養(yǎng)基能接觸到所有的內(nèi)表面？
59. 該公司如何對灌裝在棕色或者不透明的容器中的產(chǎn)品進(jìn)行培養(yǎng)基灌裝？
60. 該公司如何保證所有完整的西林瓶都進(jìn)行了培養(yǎng)？該公司如何處理操作中因干預(yù)被剔除的已灌裝的西林瓶？
61. 培養(yǎng)基灌裝是否包括了日常生產(chǎn)過程中發(fā)生的干預(yù)？是否有書面規(guī)程指出，要剔除與日常操作的做法一致的培養(yǎng)基灌裝單位（干預(yù)的類型和需要剔除的瓶數(shù)）？是否觀察有沒有被包括在培養(yǎng)基灌裝中的日常生產(chǎn)批次灌裝過程中的干預(yù)？
62. 培養(yǎng)基灌裝的持續(xù)時(shí)間是否與日常生產(chǎn)批次的持續(xù)時(shí)間大體相同？如果不同，評估該公司使用更短的培養(yǎng)基灌裝時(shí)間的依據(jù)是否合理？
63. 微生物生長的培養(yǎng)基是什么？
64. 每種所使用的培養(yǎng)基類型是否都進(jìn)行了促生長研究？
65. 是否每次完成培養(yǎng)基灌裝后都進(jìn)行促生長研究？
66. 何時(shí)進(jìn)行促生長研究（灌裝前/后；培養(yǎng)后；等等）？
67. 使用什么微生物進(jìn)行促生長實(shí)驗(yàn)？是否使用了任一環(huán)境中的微生物？
68. 培養(yǎng)基灌裝的西林瓶的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)次數(shù)是什么？
69. 陽性生長的西林瓶里的微生物是否鑒別到屬和種？這些微生物與環(huán)境監(jiān)測中發(fā)現(xiàn)的微生物之間是否有關(guān)系？
70. 培養(yǎng)開始后如果發(fā)現(xiàn)有破裂的西林瓶是否會進(jìn)行調(diào)查？
71. 已灌裝的西林瓶何時(shí)在哪里進(jìn)行檢查？
72. 培養(yǎng)基灌裝的西林瓶由誰進(jìn)行檢查？如果生產(chǎn)人員進(jìn)行檢查，是否對他們進(jìn)行了識別各種微生物生長的培訓(xùn)？在進(jìn)行檢查時(shí)是否有微生物學(xué)家在場？
73. 用什么培養(yǎng)箱來培養(yǎng)灌裝培養(yǎng)基的西林瓶？是如何對溫度進(jìn)行控制和監(jiān)測的？是否做了檢測以確定整個(gè)培養(yǎng)箱內(nèi)的溫度是否均勻？
凍干參考
凍干注射劑的檢查指南，F(xiàn)DA, 1993 年 7 月
常規(guī)問題
74. 凍干機(jī)的制造商是誰？
75. 描述凍干機(jī)所用的加熱和冷卻系統(tǒng)；真空系統(tǒng)；用于破壞真空的氣體以及是否無菌；以及溫度控制系統(tǒng)。
76. 西林瓶是怎么樣從灌裝線轉(zhuǎn)移到凍干機(jī)里的？在轉(zhuǎn)移、凍干機(jī)進(jìn)料和出料的過程中如何保持百級(ISO 5)的條件？
77. 西林瓶的進(jìn)料和出料是自動的還是手動的？
78. 西林瓶（已放膠塞）的封口是如何進(jìn)行的？
79. 如果在周期末時(shí)，在腔體內(nèi)自動完成壓塞，是否在真空條件下進(jìn)行的？如果不是在真空下進(jìn)行，使用了什么氣體？該氣體是如何進(jìn)行滅菌的？
80. 如果西林瓶是在腔體外壓塞的，如何在凍干產(chǎn)品轉(zhuǎn)移到壓塞區(qū)的過程中和加塞操作過程中保護(hù)產(chǎn)品不受污染？
81. 描述同一產(chǎn)品不同批次間的，以及不同產(chǎn)品間的腔體清潔規(guī)程（包括使用的滅菌劑/清潔劑，適用時(shí)滅菌劑殘留的監(jiān)測，以及暴露時(shí)間）。
82. 歷史經(jīng)驗(yàn)表明凍干機(jī)的冷凝器可能是一個(gè)污染源，對凍干工藝的評價(jià)應(yīng)該包括對冷凝器的檢查。凍干周期是如何監(jiān)控/記錄和審核的？
凍干驗(yàn)證-腔體的滅菌
81. 凍干箱是如何滅菌的？所有的表面如何暴露到蒸汽里的，例如移動的架子的所有表面？
82. 何時(shí)對凍干的腔體進(jìn)行滅菌？如果不是每一批都進(jìn)行，解釋/理由是什么？
83. 滅菌周期是如何進(jìn)行控制的（手動的，程序化的）？生產(chǎn)過程中是如何對周期進(jìn)行監(jiān)控的？
84. 凍干腔體的滅菌是否經(jīng)過了驗(yàn)證？是否確定了腔體內(nèi)最慢熱的表面并進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)？
85. 審核現(xiàn)行的操作規(guī)程和生產(chǎn)批次的滅菌記錄。所使用的周期參數(shù)是否與驗(yàn)證過程中使用的參數(shù)相同？生產(chǎn)周期是否符合已驗(yàn)證的周期參數(shù)？
凍干的驗(yàn)證-無菌操作
86. 對凍干產(chǎn)品的無菌操作是否使用培養(yǎng)基灌裝進(jìn)行驗(yàn)證？
87. 在無菌工藝中，培養(yǎng)基灌裝過程中是否進(jìn)行了凍干模擬？
88. 培養(yǎng)基灌裝過程中，是否模擬了凍干前西林瓶放置的最長時(shí)間？如果西林瓶不是在凍干腔體內(nèi)密封，培養(yǎng)基灌裝過程中是否模擬了壓塞前西林瓶的最長放置時(shí)間？
89. 驗(yàn)證過程中，凍干腔體內(nèi)的真空度是多少？
90. 灌裝培養(yǎng)基的西林瓶在凍干腔體內(nèi)在真空下的放置時(shí)間是多久？與商業(yè)批的放置時(shí)間對比如何？
91. 工藝的模擬是否引起培養(yǎng)基凍結(jié)？注意該工藝模擬不應(yīng)該包括培養(yǎng)基的凍結(jié)。
92. 日常生產(chǎn)和驗(yàn)證中，在凍干機(jī)進(jìn)料時(shí)，是否進(jìn)行了環(huán)境監(jiān)測？
93. 該公司是否有該培養(yǎng)基的促生長數(shù)據(jù)？培養(yǎng)結(jié)束后，是否對西林瓶進(jìn)行了促生長檢測？
94. 日常生產(chǎn)和驗(yàn)證中，在凍干機(jī)出料時(shí)，是否進(jìn)行了環(huán)境監(jiān)測？
95. 培養(yǎng)基灌裝過程中，是使用什么破壞真空的（氮?dú)猓諝?，其他氣體）？
凍干的驗(yàn)證-工藝
98.該公司是否驗(yàn)證了每個(gè)產(chǎn)品的凍干周期（例如，時(shí)間，熱輸入率，溫度，共晶點(diǎn)）？審核受檢的不同理化性質(zhì)的產(chǎn)品的驗(yàn)證記錄。
99. 審核相同產(chǎn)品的凍干生產(chǎn)記錄。
周期參數(shù)和觀察到的結(jié)果是否在驗(yàn)證的周期內(nèi)？
100. 該公司判斷每批實(shí)驗(yàn)可接受和不可接受的標(biāo)準(zhǔn)是什么，是否包括總體外觀，餅體外觀，回熔，重構(gòu)時(shí)間，濕度，等等）？
101. 該公司是否進(jìn)行了設(shè)備確認(rèn)，預(yù)防性維護(hù)，關(guān)鍵儀器的校準(zhǔn)，和清潔驗(yàn)證？
無菌原料藥（Active Pharmaceutical Ingredients，API）的凍干
其無菌操作可能包括人工或者自動化轉(zhuǎn)移工藝，或者是二者結(jié)合，目的是將凍干原料藥從凍干機(jī)里轉(zhuǎn)移至在線滅菌的 SIP 或者轉(zhuǎn)移罐。
同等重要的是觀察和評價(jià)無菌凍干工藝中的人工操作，并保證原料藥的培養(yǎng)基灌裝過程中使用了類似的操作。
隔離技術(shù)
參考：FDA 2004 無菌工藝指南附件 1
注：消毒隔離屏障的方法（例如過氧化氫，過氧乙酸）能夠讓表面沒有活性微生物，但達(dá)不到蒸汽滅菌的強(qiáng)度。雖然這些試劑不能有效穿透被遮擋或保護(hù)的表面，但經(jīng)驗(yàn)證的系統(tǒng)在確保隔離器內(nèi)部表面無污染方面還是非常有效的。
102. 確定：
• 隔離器或者屏障的模式，構(gòu)造材質(zhì)
• 隔離器的類型（開放的還是密閉的）？
• 氣流（亂流，單向流）？
• 周圍環(huán)境的級別
• 手套或半身衣的數(shù)目和位置
• 操作人員是否全面更衣（例如是否在隔離器手套里戴有無菌手套）？
• 運(yùn)行參數(shù)（壓力，空氣流速，溫度，濕度）
103. 是否有適當(dāng)?shù)臅婢S護(hù)項(xiàng)目，其中要求對手套、半身衣、門封等等的可靠性進(jìn)行常規(guī)的、有記錄的檢查或測試？所做的是何種測試/檢查，按什么頻率進(jìn)行？
104. 是否有書面的規(guī)程規(guī)定手套更換的頻率？如果有，按照什么頻率更換，按哪個(gè) SOP 進(jìn)行？
105. 隔離器是否保持連續(xù)正壓和適當(dāng)?shù)膲毫λ剑?/span>
106. 物料是怎么進(jìn)出隔離器的？轉(zhuǎn)移的機(jī)制是否健全？
107. 與無菌產(chǎn)品和組件直接接觸的設(shè)備和表面是否進(jìn)行熱滅菌？生物指示劑是否可以達(dá)到孢子最低下降 6-log？
108. 隔離屏障內(nèi)表面是使用什么方法凈化的（例如過氧化氫氣體、過氧化氫蒸汽、二氧化氯等）？判斷滅菌參數(shù)。
109. 表面凈化驗(yàn)證研究是否能夠充分證明滅菌劑在整個(gè)腔體內(nèi)能徹底分布并到達(dá)所有的表面的能力？該凈化工藝是否使用化學(xué)指示劑（Chemical Indicators ，CI）來判斷工作表面VHP 分布和/或最差情況的位置并能進(jìn)行凈化？CI 可以通過提供有用的定性數(shù)據(jù)來幫助評估工藝。在整個(gè)隔離器中是否復(fù)制了 BIs，包括最難到達(dá)的部位（例如，在隔離器滅菌過程中殘留的任何物品）？是否評估了最難滅菌的材料？
110. 隔離器凈化的頻率是什么？是否有驗(yàn)證數(shù)據(jù)支持？
111. 斷電、壓力逆轉(zhuǎn)或其他非預(yù)期的系統(tǒng)完整性破壞發(fā)生后，是否進(jìn)行了凈化周期？
112. 隔離器的凈化周期多久再驗(yàn)證一次？
113. 書面的環(huán)境監(jiān)測項(xiàng)目是否包括了每次集中生產(chǎn)時(shí)對非活性粒子的日常檢測和適當(dāng)次數(shù)的微生物檢測（例如主動空氣，表面取樣，手套取樣）？評估所進(jìn)行的測試及檢測頻率。
隔離器的檢測（無菌測試）
114.在實(shí)驗(yàn)室的隔離器屏障內(nèi)是否發(fā)現(xiàn)了任何假陽性的情況（這應(yīng)該是非常罕見的情況）？是否對假陽性的情況進(jìn)行了調(diào)查，確定并糾正了發(fā)生的原因？
環(huán)境監(jiān)測-非活性粒子
參考：FDA 2004 無菌工藝指南 IV 部分
115.關(guān)鍵區(qū)域（有產(chǎn)品暴露/灌裝區(qū)域）的送風(fēng)是否經(jīng)過了處于正壓的 HEPA 的過濾？
116.關(guān)鍵區(qū)域的氣流在送到使用點(diǎn)時(shí)是不是單向流？送風(fēng)空氣流速是多少？風(fēng)速是不是在關(guān)鍵工作面高度且面向過濾器測量的？在動態(tài)條件下進(jìn)行氣流模式評估（煙霧研究），來將指定區(qū)域/房間內(nèi)[例如：百級和 10,000 級 (ISO5 和 ISO7)]的單向流空氣可視化并證明其是單向。煙霧研究也可以揭示空氣中的亂流和漩渦，這些都可能引起關(guān)鍵生產(chǎn)區(qū)微生物和/或非活性粒子污染的傳播。
117. 關(guān)鍵區(qū)域(未滅菌產(chǎn)品、過程中物料、容器/密封件的準(zhǔn)備區(qū)域)的送風(fēng)是如何進(jìn)行過濾的？
118. 該公司如下區(qū)域的空氣質(zhì)量級別是什么：
• 配料
• 設(shè)備準(zhǔn)備
• 產(chǎn)品或滅菌組件暴露的區(qū)域
• 進(jìn)行無菌連接的區(qū)域
• 灌裝線
• 灌裝線周圍房間
• 壓蓋區(qū)
119. HEPA 過濾器的可靠性測試的頻率是什么？使用什么方法測試的？如果發(fā)現(xiàn)有泄露要做什么？如果由外部公司做，測試結(jié)果是否由現(xiàn)場人員（包括質(zhì)量部門）審核？
120. 每一個(gè) HEPA 過濾器的空氣流速的測試頻率是什么？空氣流速標(biāo)準(zhǔn)是什么？如果空氣流速讀數(shù)超標(biāo)要怎么做？
121. 該公司是否有一個(gè)關(guān)于各級區(qū)域的書面的監(jiān)測項(xiàng)目，其內(nèi)容包括：科學(xué)合理的取樣計(jì)劃表，取樣的布點(diǎn)和取樣頻率的描述？這些取樣位置是如何選擇的？
122. 各級區(qū)域的非活性粒子計(jì)數(shù)是用什么類型的儀器檢測的？空氣取樣是連續(xù)進(jìn)行的嗎？如果是連續(xù)的，當(dāng)計(jì)數(shù)超出預(yù)先設(shè)定的限度，或者檢測到潔凈室的門打開的時(shí)間過長時(shí)，是否會有警報(bào)？如有警報(bào)如何響應(yīng)？是否有警報(bào)日志？使用的是永久性安裝的探頭還是便攜式的可以帶入和帶出關(guān)鍵區(qū)域的檢測裝置？當(dāng)計(jì)數(shù)達(dá)到或者超出警戒限和行動限時(shí)要做什么？
123. 無菌核心區(qū)域的壓差要求是什么？能否保證從最潔凈區(qū)域到最不潔凈區(qū)域（按照潔凈級別）有壓差梯度？
124. 壓差是如何監(jiān)測的？是否使用了連續(xù)監(jiān)測系統(tǒng)？如果是，有否安裝能夠使操作人員知道出現(xiàn)偏差的警報(bào)系統(tǒng)？警報(bào)情況是否有記錄（警報(bào)日志）？如果發(fā)生警報(bào)會做出什么響應(yīng)？引發(fā)警報(bào)的情況必須存在多久才能引發(fā)警報(bào)？
125. 溫度和濕度是如何監(jiān)測的？可接受范圍是多少？如果讀數(shù)超出了范圍要做什么？
126. 環(huán)境超趨勢（讀數(shù)達(dá)到或超出警戒限或者行動限）是如何處理的？是否對超標(biāo)進(jìn)行了調(diào)查以確定對產(chǎn)品的影響，根本原因和所需的糾正措施？
環(huán)境和人員監(jiān)測-微生物
參考：FDA 2004 無菌工藝指南 V 和 X.A 部分
空氣
127. 該公司是否有一個(gè)有效的環(huán)境監(jiān)測（Environmental Monitoring，EM）項(xiàng)目？EM 項(xiàng)目的目的和范圍是什么？EM 取樣點(diǎn)的選擇策略是根據(jù)工藝和操作對產(chǎn)品污染的風(fēng)險(xiǎn)制定的嗎？微生物監(jiān)測的警戒限和行動限是否基于從生產(chǎn)現(xiàn)場的生產(chǎn)操作、輔助系統(tǒng)和人員行為中獲得的歷史 EM 數(shù)據(jù)？在各區(qū)使用“主動的”空氣取樣器（采取已知體積的空氣的取樣系統(tǒng)）對空氣微生物取樣的頻率是什么？
例如：
• 有產(chǎn)品或者無菌組件暴露到環(huán)境中的區(qū)域
• 灌裝區(qū)
• 凍干機(jī)的裝載區(qū)
• 背景區(qū)域
128. 定量空氣取樣的既定微生物警戒限和行動限是多少？取樣時(shí)間長度？是在生產(chǎn)過程中還是靜態(tài)條件下取樣？
129. 使用什么類型的空氣取樣設(shè)備（離心式、沖擊式、膜式）？取樣設(shè)備校準(zhǔn)了嗎？空氣采樣器的效率是多少？
130. 該公司是否有數(shù)據(jù)證明這些取樣器能夠回收到微生物，而不會對培養(yǎng)基產(chǎn)生擠壓或干燥進(jìn)而對微生物的生存產(chǎn)生有害影響？
131. 每個(gè)取樣點(diǎn)空氣取樣的實(shí)際體積是多少？
132. 有沒使用擺碟？擺碟時(shí)間是多長？取樣頻率是多少？布點(diǎn)（包括臨近關(guān)鍵操作的位置）？微生物限度是多少？
表面
133.是否有書面的規(guī)程描述潔凈室里的表面監(jiān)測情況？該程序有沒有描述布點(diǎn)，頻率，取樣技術(shù)？
134. 關(guān)鍵區(qū)域（百級/ISO5）對哪些表面進(jìn)行取樣？有沒有包括關(guān)鍵表面（與無菌產(chǎn)品或者無菌組件接觸的）
135. 什么時(shí)候?qū)Ρ砻孢M(jìn)行取樣？關(guān)鍵表面是否只在操作結(jié)束時(shí)取樣？
136. 表面取樣的頻率是什么？
137. 每個(gè)布點(diǎn)都收集了什么類型的樣品（RODAC 接觸碟，擦拭樣）？
138. 對關(guān)鍵表面，百級區(qū)表面，以及其他級別的表面的微生物取樣的警戒限和行動限是多少？這些水平/限度是怎么制定的？樣品結(jié)果達(dá)到或者超出警戒限和行動限時(shí)要做什么？
人員
139. 在潔凈區(qū)和無菌工藝區(qū)域工作的人員是否有專門的培訓(xùn)項(xiàng)目？該項(xiàng)目有沒包括微生物檢測或者在允許人員進(jìn)入該區(qū)域工作前對人員進(jìn)行資質(zhì)認(rèn)證？該項(xiàng)目是否包括資質(zhì)預(yù)審要求？
140.灌裝間人員多久監(jiān)測一次？是否只要在潔凈室出現(xiàn)（例如，每班）就要監(jiān)測？手套（雙手）取樣頻率？無菌服取樣頻率？發(fā)生任何干預(yù)行為后是否要取樣？
141.誰來對人員進(jìn)行取樣？是自己取樣嗎？取樣是由另一個(gè)生產(chǎn)人員，微生物學(xué)家，技術(shù)人員或者其他質(zhì)量控制人員進(jìn)行嗎？
142.該公司人員監(jiān)測的警戒限和行動限是多少？這些水平/限度是怎么制定的？樣品結(jié)果達(dá)到或者超出警戒限和行動限時(shí)要做什么？
143.人員在取樣之前是否要往手上噴殺菌劑或者消毒劑？
常規(guī)問題
144. 用于環(huán)境和人員監(jiān)測樣品的微生物生長培養(yǎng)基是什么？
145. 用于微生物監(jiān)測項(xiàng)目的培養(yǎng)基是否已通過促生長實(shí)驗(yàn)證明其能夠檢測到霉菌、酵母菌和細(xì)菌？
146. 有否監(jiān)測過厭氧菌？什么時(shí)候？
147.有否使用滅活劑對抗生素或其他殺菌/抑菌藥品進(jìn)行滅活？公司有否證明其有效性？有記錄否？
148. 何時(shí)對回收到的微生物進(jìn)行鑒別？到什么程度（屬、種）？
149. 培養(yǎng)的時(shí)間和溫度是什么？
150. 如何對環(huán)境和人員監(jiān)測的數(shù)據(jù)進(jìn)行趨勢分析？多久準(zhǔn)備一次趨勢報(bào)告？報(bào)告多久審核一次？誰來審核這些趨勢報(bào)告？基于趨勢報(bào)告的審核會采取何種類型的行動？
151. 對于超出行動限的環(huán)境和人員監(jiān)測樣品是否調(diào)查了其對產(chǎn)品的影響，原因，和所需糾正措施？如果超出了警戒限要做什么？審核和評估 EM 趨勢數(shù)據(jù)，該數(shù)據(jù)會提供一個(gè)很好的線索，確定活性和非活性粒子是被維持在設(shè)定的水平內(nèi)還是超出了控制范圍。發(fā)生異常情況的原因是什么？是否采取了糾正和預(yù)防措施來避免活性和非活性粒子異常的再次發(fā)生？
生物指示劑（BIs)
在無菌藥品的生產(chǎn)過程中，BIs 通常用于驗(yàn)證最終滅菌，設(shè)備和組件滅菌的周期。BIs 也用于凍干機(jī)，工藝罐，除菌過濾器，產(chǎn)品線，以及用于凈化隔離器表面的 SIP 系統(tǒng)的驗(yàn)證。
152. 使用的是何種類型的指示劑（例如接種載體，接種產(chǎn)品，接種的模擬產(chǎn)品等）？如果可能，BIs 是否要接種到組件（例如膠塞）上去？他們對應(yīng)的 D 值是多少？滅菌工藝效果是否與 BI 的 D 值相一致？
153. 如果指示劑來源自商業(yè)的，其品牌名稱和生產(chǎn)商是什么？與 BI 一起收到的標(biāo)簽是什么樣的？如果 BI 是自制的，判斷微生物的供應(yīng)商，該 BI 是如何增殖和貯存的，制備方法是什么樣的？
154. 用的是什么微生物（種，屬）？是否適用于滅菌？
155. 生物指示劑在暴露到滅菌劑中之前，其試驗(yàn)級別是什么？
156. 該公司在將 BIs 用于驗(yàn)證之前，是否確認(rèn)其存活的孢子數(shù)？
157. 該公司或者 BI 的標(biāo)簽是否聲稱符合 USP 蒸汽性能標(biāo)準(zhǔn)或者 ETO 生物指示劑標(biāo)準(zhǔn)？
158. 該公司對于收到的每一批 BIs，是否都要按照 USP 檢測？
159. 生物指示劑的 D-值大約是多少？在驗(yàn)證之前是否對 D 值進(jìn)行了確認(rèn)？
160. 每一次滅菌負(fù)載使用了多少 BIs?
161. 使用什么規(guī)程對暴露后的指示劑進(jìn)行測定？使用了何種生長培養(yǎng)基？BI 的最佳和實(shí)際培養(yǎng)時(shí)間和溫度是多少（與連同 BI 一起收到的 COA 進(jìn)行比較）？
162. 滅菌前要對 BIs 做什么準(zhǔn)備？
163. 生物指示劑是否位于產(chǎn)品最難滅菌的位置（解釋）？這些位置是怎么確定的？
164. 使用的負(fù)載模式中是否有一個(gè)生物指示劑的分布圖？
165. 指示劑從滅菌器中取出到進(jìn)行檢測之間的間隔時(shí)間是多久（小時(shí)）？對于這個(gè)時(shí)間限度是否有規(guī)定？如果超出了會怎么辦？
166. 滅菌后如果發(fā)現(xiàn)陽性 BIs 要做些什么？
167. 描述生物指示劑的貯存條件：
A. 房間，柜子的類型等（是保存在冷凍箱，還是冷藏箱，無霜狀態(tài)）
B. 溫度
C. 相對濕度（如果知道）
D. 與連同 BI 一起收到的文獻(xiàn)或書面規(guī)程進(jìn)行比較
168. 該公司是否使用化學(xué)工藝監(jiān)測來指示所暴露的周期或者測量一個(gè)或者多個(gè)周期參數(shù)？
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