導(dǎo)語(yǔ)：近期中國(guó)動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心發(fā)布了《養(yǎng)殖場(chǎng)非洲豬瘟病毒弱毒株防控技術(shù)指南》，指南中提到“采樣要使用聚丙烯材質(zhì)拭子，避免使用頭部為棉花制品的拭子、含海藻酸鈣拭子以及木柄拭子”，詳見(jiàn)《養(yǎng)殖場(chǎng)非洲豬瘟病毒弱毒株防控技術(shù)指南》的使用說(shuō)明。原博士曾在病毒采樣拭子的評(píng)估試驗(yàn)初探 文章中通過(guò)實(shí)驗(yàn)對(duì)不同材質(zhì)的拭子對(duì)核酸檢測(cè)的影響進(jìn)行了評(píng)估，實(shí)驗(yàn)表明植絨材質(zhì)的拭子更適合用于核酸檢測(cè)。但是，不同材質(zhì)的拭子對(duì)抗體采樣檢測(cè)有什么影響呢？鳴捷生物左總的團(tuán)隊(duì)開(kāi)展了不同材質(zhì)的拭子對(duì)抗體檢測(cè)影響的實(shí)驗(yàn)，現(xiàn)分享給大家：
采樣作為檢測(cè)的第一個(gè)環(huán)節(jié)，采樣質(zhì)量的好壞直接影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，在原博士的研究中表示植絨拭子在核酸檢測(cè)的病毒釋放率和穩(wěn)定性上均優(yōu)于棉簽拭子，但是對(duì)于抗體檢測(cè)實(shí)驗(yàn)中是否也有類(lèi)似的情況，尚不清晰。本文通過(guò)吸水量及抗體釋放率兩項(xiàng)指標(biāo)對(duì)比了植絨拭子和棉拭子在不同情況下對(duì)抗體檢測(cè)結(jié)果的影響，使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測(cè)試劑盒X3檢測(cè)溶液中的抗體含量，來(lái)確定抗體釋放水平的高低，檢測(cè)值越高，代表抗體釋放越多。其結(jié)果如下：
1.吸水量
吸水量體現(xiàn)的是不同材質(zhì)的拭子的吸水能力，通常吸水能力越強(qiáng)越好。本實(shí)驗(yàn)選擇一份背景清晰的非瘟陽(yáng)性的血清分成兩份，將不同材質(zhì)的拭子在相同體積的血清中充分浸泡，然后拿出拭子計(jì)算每種拭子的吸水量。
試驗(yàn)結(jié)果：棉簽>植絨（與原博士結(jié)果一致）。
表1 植絨及棉拭子吸水量對(duì)比
討論：由于兩種拭子的拭子頭大小不一樣，棉簽的頭比較大所以吸水量也比較大，應(yīng)該在相同大小的拭子頭下進(jìn)行評(píng)估會(huì)更準(zhǔn)確，但是每個(gè)廠(chǎng)家生產(chǎn)出來(lái)的本身就是大小不一，因此在選擇采樣工具時(shí)，本試驗(yàn)結(jié)果仍具有參考性。
2.抗體釋放率
抗體釋放率體現(xiàn)的是不同材質(zhì)的拭子吸附抗體后的釋放效率，抗體釋放率越高，采樣獲得的抗體越多。考慮到臨床采樣的多樣性，本次試驗(yàn)對(duì)比了拭子完全濕潤(rùn)的情況下和固定上樣量情況下，兩種拭子的抗體釋放率以及模擬了采樣后加保存液和不加保存液運(yùn)輸或干燥后運(yùn)輸?shù)那闆r下的抗體釋放率，以期為后期臨床抗體檢測(cè)的采樣運(yùn)輸環(huán)節(jié)提供參考。
2.1完全浸潤(rùn)的抗體釋放率
本試驗(yàn)在相同體積的血清中分別加入兩種拭子，使其充分浸泡吸取血清后，兩種拭子放入另一個(gè)等體積的稀釋液中浸泡并震蕩，充分混勻后使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測(cè)試劑盒X3檢測(cè)溶液中的抗體含量。
試驗(yàn)結(jié)果：完全浸潤(rùn)情況下抗體釋放率：植絨＞棉簽拭子。
表2 植絨及棉拭子完全浸潤(rùn)下抗體釋放情況
討論：雖然棉簽的吸水量是植絨的1.3倍左右（原博士結(jié)果1.5倍），但是釋放結(jié)果上植絨好于棉簽，后續(xù)試驗(yàn)評(píng)估了相同吸水量的情況下抗體釋放率。
2.2 固定上樣量情況下的抗體釋放率
本試驗(yàn)將同一份血清取100 ul中分別滴到兩種拭子上，待兩種拭子都充分吸取血清后，將兩種拭子放入另一個(gè)等體積的稀釋液中浸泡震蕩，充分混勻后使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測(cè)試劑盒X3檢測(cè)溶液中的抗體含量。
試驗(yàn)結(jié)果：同一上樣量情況下抗體釋放率：植絨略好于棉簽拭子。
表3 植絨及棉拭子固定上樣量的抗體釋放情況
討論：由于該組實(shí)驗(yàn)是在加樣之后直接就放入稀釋液中浸泡，此時(shí)植絨拭子的抗體滴度略好于棉拭子，但可能不能完全模擬臨床的情況，因此后續(xù)試驗(yàn)?zāi)M了不同運(yùn)輸條件下的抗體釋放率。
2.3 保存液運(yùn)輸條件下及干燥運(yùn)輸條件下的抗體釋放率對(duì)比
本試驗(yàn)分為兩組，第一組待兩種拭子充分吸取血清后放入等體積稀釋液中運(yùn)輸，第二組待兩種拭子充分吸取血清后放入空EP管運(yùn)輸，運(yùn)輸時(shí)長(zhǎng)為3小時(shí)，常溫運(yùn)輸，收到樣本后充分渦旋震蕩，瞬離后使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測(cè)試劑盒X3檢測(cè)溶液中的抗體含量。
試驗(yàn)結(jié)果：保存液運(yùn)輸條件下：植絨>棉簽；干燥運(yùn)輸條件下：棉簽＞植絨。
表4 植絨及棉拭子不同運(yùn)輸條件下的抗體釋放情況
討論：本試驗(yàn)?zāi)M臨床上血拭子樣本運(yùn)輸條件對(duì)比了不同采樣材質(zhì)和運(yùn)輸條件下的抗體釋放率，結(jié)果顯示在濕潤(rùn)條件下運(yùn)輸植絨的抗體釋放率好于棉簽拭子，但是在干燥運(yùn)輸條件下，由于棉簽吸水量更大，承載的抗體更多，在干燥條件下運(yùn)輸更不容易揮發(fā)和損失，可能導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果高于植絨拭子，但是本次實(shí)驗(yàn)因?yàn)闂l件限制未能充分對(duì)比兩種拭子采樣完全干燥后的抗體釋放率，后續(xù)補(bǔ)充了這一塊的內(nèi)容。
2.4 干燥條件下的抗體釋放率
本試驗(yàn)分為兩組，第一組對(duì)比充分浸潤(rùn)的兩種拭子干燥后的抗體釋放率，第二組對(duì)比同一上樣量下（100 ul）兩種拭子干燥后的抗體釋放率，所有拭子干燥后用同一稀釋液浸泡5min使之充分釋放，同時(shí)設(shè)置對(duì)照組，即100 ul原液加500 ul稀釋液比較干燥后的抗體檢測(cè)值是否會(huì)受到較大影響，所有結(jié)果使用上海鳴捷生物高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測(cè)試劑盒X3檢測(cè)，結(jié)果如下。
試驗(yàn)結(jié)果：干燥后抗體釋放率：植絨>棉簽。
表4 植絨及棉拭子干燥后的抗體釋放情況
討論：本試驗(yàn)?zāi)M臨床上血拭子干燥后運(yùn)輸，到實(shí)驗(yàn)室再處理的場(chǎng)景，結(jié)果顯示，無(wú)論是充分浸潤(rùn)還是固定上樣量條件下，徹底風(fēng)干后（本實(shí)驗(yàn)風(fēng)干耗時(shí)2天） 植絨拭子的抗體釋放率都明顯優(yōu)于棉拭子。此外，本結(jié)果中100 ul血清直接稀釋的結(jié)果和100 ul血清利用植絨作為載體運(yùn)輸?shù)慕Y(jié)果差異不大，也說(shuō)明植絨在臨床是非常好的采樣載體。
總結(jié)，原博士核酸釋放率試驗(yàn)結(jié)果及本試驗(yàn)抗體釋放率結(jié)果表明，在臨床采樣中植絨拭子相對(duì)于棉簽拭子更有利于提高檢出率。但是由于植絨拭子較棉簽拭子成本更高，臨床需要根據(jù)實(shí)際情況選擇合適的采樣拭子。
鳴捷生物為臨床非瘟抗體檢測(cè)特地研發(fā)了一款適合于尾根血拭子檢測(cè)非瘟抗體的試劑盒高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測(cè)試劑盒X3，相對(duì)于普通試劑盒能夠極其顯著的提高臨床復(fù)雜毒株感染的檢出率。
附：
高靈敏非洲豬瘟病毒抗體雙抗原夾心法檢測(cè)試劑盒X3抗體解讀如下：
京公網(wǎng)安備11010802046783號(hào)
