中文字幕一级黄色A级片|免费特级毛片。性欧美日本|偷拍亚洲欧美1级片|成人黄色中文小说网|A级片视频在线观看|老司机网址在线观看|免费一级无码激情黄所|欧美三级片区精品网站999|日韩av超碰日本青青草成人|一区二区亚洲AV婷婷

加強牙膏的監(jiān)督管理，進一步提高牙膏使用安全性，中國食品藥品檢定研究院組織北京大學口腔醫(yī)學院口腔醫(yī)療器械檢驗中心開展了口腔黏膜刺激試驗方法的研究制定工作，內容如下：

 

口腔黏膜刺激試驗（征求意見稿）

Oral mucous irritation test（征求意見稿）

 

1、 范圍

本方法適用于評價牙膏對口腔黏膜組織潛在的刺激作用。

 

2、 試驗目的

確定和評價牙膏對動物的口腔黏膜組織是否有刺激作用及其程度。

 

3、 定義

口腔黏膜刺激Oral mucous irritation

口腔黏膜組織接觸受試樣品后所產生的水腫、炎性變化及組織損傷。

 

4、 試驗的基本原則

將受試樣品放置受試動物的一側頰黏膜并多次接觸，另一側頰黏膜放入對照樣品，在規(guī)定的時間間隔內，肉眼觀察動物頰黏膜的接觸部位刺激程度，根據(jù)刺激程度判斷選擇即刻和/或24小時進行組織學評價。

動物如果在試驗的任何階段出現(xiàn)嚴重抑郁、痛苦的表現(xiàn)，則應當給予人道地處死。依據(jù)試驗情況對受試物進行適當評價。

 

5、 試驗方法

5.1  試驗樣品

5.1.1  受試樣品

受試樣品一般不需稀釋，可直接使用，每次放置樣品量為0.4g或0.4mL。

注：若受試樣品稀釋一定比例后可釋放某種潛在的刺激性物質，可依照牙膏產品包裝或說明書提供的稀釋比例稀釋受試樣品，并增加稀釋后樣品的測試。

5.1.2  對照樣品：可選用無菌的生理鹽水作為對照樣品，或選用其他無口腔黏膜刺激性的材料作為對照樣品。

5.2  實驗動物和飼養(yǎng)環(huán)境

5.2.1  首選健康初成年的金黃地鼠（拉丁學名：Mesocricetus auratus）, 同一品系, 雌雄不限。雌性動物應無孕。

5.2.2  至少使用3只動物。

5.2.3  試驗前動物要在實驗動物房環(huán)境內至少適應3天。實驗動物及實驗動物房應符合國家相關規(guī)定。選用標準配合飼料，飲水不限制。

5.3  試驗步驟

5.3.1  動物準備與麻醉

用適當?shù)穆樽韯游锶砺樽? 檢查動物雙側頰囊有無異常（剔除頰黏膜異常動物）。翻轉動物頰囊用生理鹽水或蒸餾水清洗干凈后進行試驗。

5.3.2  試樣接觸

5.3.2.1  一側頰囊放入試驗樣品,另一側頰囊放入對照樣品。試樣與黏膜接觸時間為5min，每小時1次（含接觸時間）,共重復4 次。每次接觸試樣后及重復放置試樣前肉眼檢查頰囊，并記錄異常情況。24h后肉眼觀察頰囊并取與試樣接觸部位的黏膜進行組織學評價。

5.3.2.2  試驗過程中根據(jù)表1肉眼觀察試驗部位，3只動物中如有出現(xiàn)輕微至中度紅斑或水腫現(xiàn)象，應另取3只動物再次試驗，方法同5.3.2.1，但接觸4次完成后即刻取與試樣接觸部位的黏膜進行組織學評價。

5.3.2.3  在5.3.2.1和5.3.2.2試驗過程中，根據(jù)表1肉眼觀察試驗部位，在試驗周期內的任意時間點，3只動物中如有1只及以上出現(xiàn)重度紅斑、水腫、糜爛或潰瘍現(xiàn)象，可直接判定為重度黏膜刺激反應，無需再進行組織學評價。

5.4  結果觀察

5.4.1  臨床觀察

試驗期間及術后觀察動物, 記錄異常表現(xiàn), 包括局部、全身及異常行為。若動物因試

驗影響以外的其他因素引起死亡時（如過度麻醉等）, 應替補動物再進行試驗。

表1.口腔黏膜臨床觀察系統(tǒng)

表現(xiàn)
紅斑	無紅斑
	極輕微紅斑（勉強可見）
	紅斑清晰
	中度紅斑
	重度紅斑（縈紅色）至焦痂形成、糜爛、潰瘍
水腫	無水腫
	極輕微水腫（勉強可見）
	清晰水腫（腫起邊緣清晰）
	中度水腫（腫起約1mm）
	重度水腫（腫起超過1mm，并超出接觸區(qū)）

5.4.2  大體觀察

無痛處死動物后, 觀察頰囊黏膜有無刺激、水腫、損傷、充血、糜爛及潰瘍等情況, 并比較同一動物的試驗側頰囊和對照側頰囊, 記錄每側頰囊的狀況, 注意試驗側與對照側的差異。

5.4.3  組織學觀察

5.4.3.1  組織切片制作

試驗結束時應采用超劑量麻醉或其他無痛方法處死動物。取試樣接觸部位的黏膜,10%福爾馬林固定, 常規(guī)石蠟包埋, 半連續(xù)切片, 間隔取片5張, H.E染色。

5.4.3.2  組織學觀察及記分

對黏膜組織進行組織學評價。根據(jù)表2組織反應記分系統(tǒng)計算每只動物組織反應記分。試驗組中所有動物的組織反應記分相加, 再除以觀察總數(shù), 得出試驗組平均記分。對照組同法計算。

表2. 口腔黏膜組織反應記分系統(tǒng)

反應	記分
1.上皮
正常，完好無損	0
細胞變性或變扁平	1
組織變形	2
局部糜爛	3
廣泛糜爛	4
2.白細胞浸潤（每個高倍視野）
無	0
極少（少于25）	1
輕度（26~50）	2
中度（51~100）	3
重度（大于100)	4
3.血管充血
無	0
極少	1
輕度	2
中度	3
重度伴血管破裂	4
4.水腫
無	0
極少	1
輕度	2
中度	3
重度	4

6、 結果評價

6.1  臨床觀察評價

6.1.1  在試驗周期內的任意時間點，3只動物中如有1只及以上出現(xiàn)重度紅斑、水腫、糜爛或潰瘍現(xiàn)象，該受試樣品為重度口腔黏膜刺激反應。

6.1.2  試驗周期內臨床觀察出現(xiàn)輕微至中度紅斑或水腫現(xiàn)象時，以組織學評價較重的結果為準。

6.2  組織學評價

6.2.1  若出現(xiàn)動物的對照側頰囊組織學評價記分之和大于9時, 則考慮試驗操作時造成的損傷，有必要進行復試。

6.2.2  試驗組平均記分減去對照組平均記分得出刺激指數(shù)。根據(jù)表3給出的刺激指數(shù)對口腔黏膜組織反應程度進行分級。

表3. 口腔黏膜組織反應分級

刺激指數(shù)	等級
0	無
>0 ~ ≤4	極輕
>4 ~ ≤8	輕度
>8 ~ ≤11	中度
>11 ~ ≤16	重度

7、 結果判定

臨床觀察評價和/或組織學評價進行結果判定，臨床觀察為重度口腔黏膜刺激反應是不可接受的（見6.1.1）；依據(jù)6.2.2 口腔黏膜組織反應分級，認為受試樣品為無或極輕的口腔黏膜刺激反應是可接受的。

 

8、 試驗結果的解釋

試驗結果應能得出受試樣品的口腔黏膜刺激程度，這些結果只能在很有限的范圍內外推到人類。引起動物強烈反應的物質在人群中也可能引起一定程度的口腔黏膜刺激反應。

 

口腔黏膜刺激試驗起草說明

 

加強牙膏的監(jiān)督管理，進一步提高牙膏使用安全性，中國食品藥品檢定研究院組織北京大學口腔醫(yī)學院口腔醫(yī)療器械檢驗中心開展了口腔黏膜刺激試驗方法的研究制定工作。現(xiàn)就工作有關情況說明如下：

 

一、起草原則

本方法主要參照北京大學口腔醫(yī)學院口腔醫(yī)療器械檢驗中心編制并在2018年發(fā)布的醫(yī)藥行業(yè)標準“口腔醫(yī)療器械生物學評價第13部分：口腔黏膜刺激試驗”。寫作結構框架按現(xiàn)行《化妝品安全技術規(guī)范》進行調整。本方法制定在充分考慮動物福利的前提下，本著科學性、合理性、規(guī)范性的指導原則，對某些內容進行具體化和明確化，在盡量提高可操作性的同時，兼顧了技術發(fā)展的前瞻性。本方法制定過程中還注意了科學性和合理性、協(xié)調性和有效性，以及通俗性和規(guī)范性之間的關系。

 

二、起草過程

本方法于2023年9月由化妝品標準專家委員會立項；在研究和分析國內外相關標準及文獻的基礎上，起草了本方法文本及編制說明，形成方法草案。

本方法由化妝品標準專家委員會立項并通過結題專家論證，形成如下意見及結論：規(guī)范文字說明，完善文本，修改后通過。修改后對外征求意見，根據(jù)反饋情況對文本進行修改。

 

三、與我國已有相關標準的關系

我國現(xiàn)已發(fā)布國家標準GB/T 16886.10-2017《醫(yī)療器械生物學評價第10部分：刺激與皮膚致敏試驗》和行業(yè)標準YY/T 0127-2018《口腔醫(yī)療器械生物學評價第13部分：口腔黏膜刺激試驗》。本方法在參考上述我國已有相關標準的基礎上，主要針對牙膏的特點，重點討論牙膏是否稀釋情況、放樣量（試驗操作時吸入注射器中，所以增加mL的單位，方便試驗操作）、增加了臨床觀察評價（新增水腫的觀察指標）、組織學觀察僅給出了短期口腔黏膜刺激指標，未將慢性刺激指標（如上皮增生等）納入，結果評價中新增臨床觀察評價、增加判定原則，以現(xiàn)行的《化妝品安全技術規(guī)范》為寫作框架，本著牙膏檢測適用性及可操作性的原則進行編制。

 

四、與國際同類標準的關系

   本方法以ISO 10993-10 , 2010年發(fā)布“醫(yī)療器械生物學評價第10部分：刺激與皮膚致敏試驗”（Biological evaluation of medical devices Part 10: Tests for irritation and skin sensitization）為參考依據(jù)進行撰寫，結合國內實驗條件及操作的具體情況，撰寫的標準，內容基本涵蓋了實驗對象、實驗操作、結果評價和結果判定等技術要求。

 

五、與《規(guī)范》中原方法的對比情況

現(xiàn)行《化妝品安全技術規(guī)范》中尚無口腔黏膜刺激試驗的相關內容，但有急性眼刺激性/腐蝕性試驗和皮膚變態(tài)反應試驗的相關內容，本標準以上述試驗方法的寫作框架為模板，重點增加了對口腔黏膜刺激相關特征指標規(guī)定。