【問】在單抗制品下游層析純化操作的實(shí)施過程中，應(yīng)具有哪些通用要求？
【答】層析是單抗下游生產(chǎn)中最為常用的工序，利用蛋白質(zhì)的電荷性、特異性吸附、疏水作用、分子大小等原理實(shí)現(xiàn)單抗純化的巨的。層析系統(tǒng)通常由液體泵、層析柱、附屬的管路及閥門、傳感器(流量、壓力、pH值、溫度) ，以及紫外和電導(dǎo)率等檢測單元組成在單抗的生產(chǎn)過程中，應(yīng)建立層析相關(guān)的操作及管理規(guī)程，并關(guān)注以下要點(diǎn)：
層析系統(tǒng)應(yīng)建立預(yù)防性維護(hù)保養(yǎng)程序，定期檢查各閥門、管路及泵的運(yùn)行情況，檢查校準(zhǔn)各測量單元與傳感器，關(guān)注紫外檢測單元光源使用情況，進(jìn)行預(yù)防性更換。長期使用時，應(yīng)關(guān)注管路的鐘化和老化情況。
層析介質(zhì) (填料) 應(yīng)建立入廠驗(yàn)收程序，如鑒別試驗(yàn)、微生物負(fù)荷及內(nèi)毒素含量等。必要時考慮其工藝要求，如動態(tài)載量測試等。
層析柱裝填前應(yīng)檢查層析柱的清潔狀態(tài)和密封性等，如篩網(wǎng)、密封圈、柱管等組件。
層析柱裝填前應(yīng)目視檢查填料性狀，裝填完畢后，應(yīng)根據(jù)平臺化的操作經(jīng)驗(yàn)及填料的特性，測定柱效并符合設(shè)定的標(biāo)準(zhǔn)，如理論塔板數(shù)、對稱因子等。
層析柱裝填后持續(xù)使用期間，應(yīng)根據(jù)性能監(jiān)測情況及生產(chǎn)批次的安排，制定定期拆裝柱計(jì)劃 (如需)。
層析系統(tǒng)與層析柱的清洗與在線消毒應(yīng)建立相關(guān)規(guī)程。
層析介質(zhì)在位或離線保存時，需選擇合適的保存液，周期性檢查保存液情況，定期更換保存液，避免液位下降與微生物滋生。
層析系統(tǒng)管道需要有標(biāo)識，使用前應(yīng)檢查管路連接情況，避免接錯，運(yùn)行時應(yīng)關(guān)注系統(tǒng)壓力。
層析過程應(yīng)連續(xù)監(jiān)控關(guān)鍵工藝參數(shù)，自動層析程序運(yùn)行前需確認(rèn)程序配方，電子記錄保存需符合數(shù)據(jù)可靠性要求。
層析工序要有明確的樣品收集標(biāo)準(zhǔn)，生產(chǎn)過程中應(yīng)關(guān)注層析圖譜情況，如電導(dǎo)率、pH值、紫外吸收值等。為考察工藝的穩(wěn)健性建議定期對商業(yè)化生產(chǎn)階段批次間圖譜的一致性做分析。
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