▲圖1-藥品中元素雜質(zhì)或重金屬雜質(zhì)來源示意圖
元素雜質(zhì)，該名稱最早出自歐美和ICH，其包括可能存于原料藥、輔料或制劑中的催化劑和環(huán)境污染物，主要指藥品生產(chǎn)或貯藏過程中生產(chǎn)、加入或無意引入的物質(zhì)。由于某些元素雜質(zhì)具有毒性，還可能對藥品的穩(wěn)定性、保質(zhì)期產(chǎn)生不利影響，或可能引發(fā)有害的不良反應(yīng)，故各國藥監(jiān)機構(gòu)對藥品元素雜質(zhì)的控制越來越嚴(yán)格。目前ICH Q3D元素指導(dǎo)原則為全世界主流認(rèn)可度比較高的法規(guī)，過去十幾年間，各國藥典以不同的發(fā)展路徑，先后出臺了一系列舉措，來貫徹Q3D在本區(qū)域內(nèi)的實施。
重金屬，早年在各國藥典中均有收載，是指相對原子量較大，比重大于5.0g/cm3的金屬，約有45種，如銅、鉛、鋅、鐵、鎳、錳、鎘、汞等。砷雖不屬于重金屬，但因其來源以及危害都與重金屬相似，故通常將其列入重金屬類別。
個人理解：重金屬和元素雜質(zhì)是不同時期的兩種叫法，元素雜質(zhì)涵蓋的元素種類是多于重金屬范疇的，二者有重合的部分又有不同的部分，個人理解元素雜質(zhì)是重金屬的升級版，重金屬檢查法會逐漸退出各國藥典。
1.1 重金屬及元素雜質(zhì)研究增修訂背景
早期各國藥典，如USP、EP和《中國藥典》，對元素雜質(zhì)的控制主要是針對重金屬和部分無機雜質(zhì)，檢測方法主要包括重金屬試驗、熾灼殘渣、硫化物和砷鹽檢查以及其他的化學(xué)檢查法。其中，重金屬檢查法早在《中國藥典》1953年版就已收載，后幾經(jīng)修改完善，使這一方法廣泛應(yīng)用于藥品中以鉛為代表的重金屬元素雜質(zhì)的控制。該方法主要是控制能形成硫化物沉淀的金屬元素，如鉛、銅和其他金屬，這些元素雜質(zhì)是管道、制藥設(shè)備、工藝和其他常見來源的潛在污染物。
隨著藥品生產(chǎn)過程中催化劑和試劑的應(yīng)用日益廣泛，近年來，元素污染的風(fēng)險因素發(fā)生了巨大變化，但其控制標(biāo)準(zhǔn)在幾十年內(nèi)幾乎沒有變化?，F(xiàn)有藥典中的檢測方法不是針對低水平金屬催化劑和試劑的殘留設(shè)計的，專屬性、靈敏度低，不能對單個元素雜質(zhì)進(jìn)行定量分析，已不能滿足藥品安全性控制的需要。同時，藥典中提供的可接受限度是基于歷史數(shù)據(jù)，并不一定基于合適的安全性數(shù)據(jù)。通常，利用藥典重金屬檢查法檢測出的金屬種類是有限的，并不包括有安全風(fēng)險的其他金屬雜質(zhì)。
因此，為了保障公眾健康安全，建立較重金屬檢查法更科學(xué)的元素雜質(zhì)限度和測定指導(dǎo)原則，對已明確毒理學(xué)問題的元素雜質(zhì)進(jìn)行更精確的控制尤為重要。基于以上考慮，ICH提出Q3D元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則，并于2014年11月發(fā)布。Q3D適用于原料藥和制劑，采用基于風(fēng)險的方法對元素雜質(zhì)進(jìn)行評估，對在改變合成工藝步驟、引入在線或上游控制、原料藥和輔料以及容器密閉系統(tǒng)等藥品全生命周期內(nèi)存在的元素雜質(zhì)進(jìn)行控制。
在此基礎(chǔ)上，歐美藥典陸續(xù)出臺一系列通則或指導(dǎo)原則對元素雜質(zhì)進(jìn)行控制，歷經(jīng)多次修訂完善；目前，元素雜質(zhì)的種類和限度基本上和ICH保持一致。
1.2 ICH Q3D指導(dǎo)原則的增修訂歷程
2009年10月，ICH批準(zhǔn)制定Q3D金屬雜質(zhì)指導(dǎo)原則，旨為藥品中的金屬雜質(zhì)定性和定量控制提供全球性政策。ICH指導(dǎo)原則須經(jīng)過四個階段方可公布，在最后第五階段被ICH區(qū)域內(nèi)的各國藥品監(jiān)管部門采納。2013年7月，ICH將Q3D指導(dǎo)原則的題目由“金屬雜質(zhì)指導(dǎo)原則”修改為“元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則”。2014年12月，ICH發(fā)布了Q3D第四階段正式文件，其歷史進(jìn)程中的主要節(jié)點見表1。Q3D指導(dǎo)原則分為三個部分：評估潛在元素雜質(zhì)的毒性數(shù)據(jù)，確定每一種有毒元素的每日允許暴露量（PDE），以及運用ICH Q9質(zhì)量風(fēng)險管理指導(dǎo)原則來評估和控制藥品中的元素雜質(zhì)。ICH Q3D指導(dǎo)原則的出臺，有利于幫助制藥企業(yè)通過風(fēng)險評估來判斷對哪些元素進(jìn)行額外控制，為藥品制訂合理的元素限度。Q3D中未規(guī)定元素雜質(zhì)的檢測方法，藥品注冊申請人可參考ICH Q2分析方法驗證指導(dǎo)原則采用任何經(jīng)驗證的檢測方法。
▲表1-ICH Q3D歷史進(jìn)程的主要節(jié)點
1.3 USP元素雜質(zhì)相關(guān)控制要求的增修訂歷程
2008年，USP開始啟動元素雜質(zhì)新標(biāo)準(zhǔn)和方法的制訂。2012年12月，USP35第二增補本中增訂了通則<232>元素雜質(zhì)限度、<233>元素雜質(zhì)測定方法；明確要求測定各元素雜質(zhì)含量而不是總量，即由半定量轉(zhuǎn)為定量控，將取代通則USP<231>重金屬檢查法，于2014年5月1日正式執(zhí)。
2015年12月，USP38第二增補本刪除了<231>重金屬檢查法，且<231>重金屬檢查法自2018年1月1日不再執(zhí)行。
由于USP和ICH的工作進(jìn)程不同，二者在不同時期內(nèi)容不盡一致，相關(guān)規(guī)定有所差異；在2017年12月后（USP40版之后），USP修訂了通則<232>中的元素雜質(zhì)種類和限度，與ICH規(guī)定保持一致，并規(guī)定在2018年1月1日之后，針對USP品種，提交改良型新藥申請（NDA）、仿制藥的申請（ANDA）應(yīng)符合USP通則<232>、<233>。針對非USP品種，申請人提交新的NDA、ANDA時，應(yīng)該遵循ICH Q3D。
▲表2-USP元素雜質(zhì)相關(guān)控制要求的增修訂歷程
1.4 EP元素雜質(zhì)相關(guān)控制要求的增修訂歷程
2014年6月，歐洲藥品質(zhì)量管理局（EDQM）制訂了對EP重金屬通則的修訂策略，并在7月的會議上宣布了實施計劃：
（1）首先修訂EP通則5.20<金屬催化劑和金屬試劑殘留>，一旦Q3D在歐盟進(jìn)入第五階段（即正式實施階段），則采用Q3D取代5.20的相關(guān)內(nèi)容；
（2）2016年7月，新注冊申請執(zhí)行Q3D；
（3）2017年12月，歐盟已上市制劑執(zhí)行Q3D。
2015年3月，EDQM批準(zhǔn)了更加詳細(xì)的策略：（1）2017年1月1日，EP 9.0從各論中刪除對通則2.4.8<重金屬檢查法>的引用；（2）隨后逐個評估并刪除各論中已有特定元素的檢測項，建立Q3D中其他元素如鐵、鋁等的檢測方法；（3）2018年8月1日，EP 9.3中通則5.20引用了Q3D，這標(biāo)志著Q3D正式在EP中實施。
盡管通則5.20引用Q3D，但按照EP的執(zhí)行方式，通則5.20只有被各論引用才能成為強制性通則，所以只在通則5.20中引用Q3D，對EP收載的各論約束力不夠。因此，EP又在強制性總論2034原料藥和2619藥物制劑中引用了通則5.20，使Q3D成為強制性法規(guī)，成為所有該總論適用的藥品必須滿足的條件。2619提到在Q3D 適用范圍外的產(chǎn)品，企業(yè)也應(yīng)對元素雜質(zhì)限度進(jìn)行風(fēng)險評估。由于通則2.4.8<重金屬檢查法>已從原料藥各論引用中刪除，此后企業(yè)將選擇適當(dāng)?shù)脑胤治霾呗?，使其符合Q3D 的要求。
對于各論中特定元素的實施方法，EP和USP一致，刪除了除天然來源外的各論中屬于Q3D 分類的特定元素的檢測項，保留Q3D中其他元素的檢測項。
▲表3-EP元素雜質(zhì)相關(guān)控制要求的增修訂歷程
1.5 中國藥典元素雜質(zhì)相關(guān)控制要求的現(xiàn)狀
目前在元素雜質(zhì)相關(guān)控制要求方面，《中國藥典》與USP和EP相比還存在明顯的差距，2020年版《中國藥典》未針對元素雜質(zhì)控制收載明確的技術(shù)指南或通則，只是在四部通則9102<藥品雜質(zhì)分析指導(dǎo)原則>中提到“無機雜質(zhì)參照ICH元素雜質(zhì)指導(dǎo)原則（Q3D）進(jìn)行研究，并確定檢查項目”。與早年歐美藥典一樣，2020年版《中國藥典》也收載了0821<重金屬檢查法>、一些特定元素測定及中藥重金屬測定通則，如四部中的0804<硒檢查法>、0807<鐵鹽檢查法>、0822<砷鹽檢查法>，為濕化學(xué)法；中藥測定法中的2321<鉛、鎘、砷、汞、銅測定法>，2322<汞、砷元素形態(tài)及價態(tài)測定法>，為AAS、ICP-MS儀器分析方法。
其中上述是化學(xué)法顯色測定總量的方法已顯得較為落后，2017年我國已成為ICH正式成員國和管委會成員，為加快推進(jìn)ICH相關(guān)要求在我國的實施進(jìn)程，在參考ICH Q3D指導(dǎo)原則及USP、EP實施策略的基礎(chǔ)上，結(jié)合我國國情制定《中國藥典》元素雜質(zhì)限度和測定指導(dǎo)原則，提高我國藥品中元素雜質(zhì)控制水平和保障患者用藥安全勢在必行。
個人理解：從上面匯總的ICH及歐美藥典對元素雜質(zhì)相關(guān)控制要求的演變歷程看，不難看出傳統(tǒng)的化學(xué)檢查法在逐漸退出歷史舞臺，取而代之的是專屬性更強、靈敏度更高的儀器檢查法，定量方式由總量、半定量向單一定量的轉(zhuǎn)變。
雖然制藥工業(yè)界內(nèi)有以下聲音：一是目前Q3D和M7的適用范圍多在美國、歐盟和日本，但全球大量的原料藥和輔料的供應(yīng)商均在上述地區(qū)之外；二是元素雜質(zhì)和致突變雜質(zhì)研究通常需要專屬性/靈敏度更好的昂貴儀器，而制藥行業(yè)中高端精密儀器龍頭企業(yè)均為歐美所有；三是通過食物中途徑攝入的元素雜質(zhì)或致突變雜質(zhì)很有可能超過其在藥物中的含量，采用高昂的成本進(jìn)行研究控制，其風(fēng)險與獲益比是否合理，認(rèn)為元素雜質(zhì)和致突變雜質(zhì)是歐美國家制造的煙霧彈。但不可否認(rèn)的事實是，各國藥監(jiān)機構(gòu)都在按Q3D和M7指導(dǎo)原則在進(jìn)行審評審批，包括中國藥監(jiān)機構(gòu)CDE。
二、各國藥典重金屬檢查法的對比
2.1 各國藥典重金屬檢測法概述
▲表4-各國藥典當(dāng)前重金屬檢查法通則匯總
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藥典
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USP38 ?231? Heavy Metals，已經(jīng)刪除 |
USP2023 ?232? Elemental Impurities—Limit
USP2023 ?233? Elemental Impurities—Procedures
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EP11.3 2.4.8. Heavy metals |
EP11.3 2.4.20. Determination of elemental impurities
EP11.3 5.20. Elemental impurities
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BP2013 AppendixVⅡ Limit Test for Heavy Metals |
Limit Test for Heavy Metal已作廢，現(xiàn)執(zhí)行
BP2022 AppendixVⅢ. Determination of Elemental impurities
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JP18 ?1.07?Heavy Metals Limit Test |
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重金屬檢查法在各國藥典中均有收錄或收錄過，原理為重金屬離子在一定條件下與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色，比較對照溶液和供試品溶液的深淺來判斷某一品種樣品重金屬是否超過限量，但無法測定某一重金屬的含量。
如中國藥典通則0821，是采用硫代乙酰胺試液或硫化鈉試液作顯色劑，以鉛（Pb）的限量表示。在規(guī)定實驗條件下，與硫代乙酰胺試液在弱酸性條件下產(chǎn)生的硫化氫發(fā)生顯色的金屬離子有銀、鉛、汞、銅、鎘、鉍、銻、錫、砷、鋅、鈷與鎳等。由于藥品生產(chǎn)過程中遇到鉛的機會較多，且鉛易積蓄中毒，故以鉛作為重金屬的代表，用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液。
由于重金屬在不同藥物中存在的形式不同，故需要采用不同的方法檢測。以中國藥典為例，由于實驗條件不同，分為三種檢測方法：
第一法：適用于溶于水、稀酸或有機溶劑如乙醇的藥品，供試品不經(jīng)有機破壞，在酸性溶液中進(jìn)行顯色，檢查重金屬。
第二法：適用于難溶或不溶于水、稀酸或乙醇的藥品，或受某些因素（如自身有顏色的藥品、藥品中重金屬不呈游離狀態(tài)或重金屬離子與藥品形成配位化合物等）干擾不適宜采用第一法檢查的藥品，供試品需經(jīng)有機破壞，殘渣經(jīng)處理后在酸性溶液中進(jìn)行顯色，檢查重金屬。
第三法：用來檢查能溶于堿而不溶于稀酸（或在稀酸中即生產(chǎn)沉淀）的藥品中的重金屬。
2.2 各國藥典重金屬檢測法對比
由于重金屬在不同藥物中存在的形式不同，故相應(yīng)分為不同的方法檢測；中國藥典和美國藥典重金屬檢測收載3種方法，日本藥典中收載4種方法，歐洲藥典中收載的方法多達(dá)8種。各國藥典主要檢查方法均為目視比色法，其中歐美藥典重金屬檢查法已明確廢除并被元素雜質(zhì)研究取代，此處不再列舉對比，中國藥典和日本藥典重金屬檢測方法對比見表5。
▲表5-各國藥典重金屬檢測方法對比
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在規(guī)定條件下，與硫代乙酰胺或硫化鈉反應(yīng)顯色 |
在酸性條件下，金屬離子與硫化鈉反應(yīng)顯色 |
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標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液：10μg/ml（當(dāng)天使用）
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標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液：1ppm/2ppm
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甲管（標(biāo)準(zhǔn)鉛）：加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量與醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml后，加水或各品種項下規(guī)定的溶劑稀釋成25ml；
乙管（供試品）：加入按各品種項下規(guī)定的方法制成的供試品溶液25ml；
丙管（標(biāo)準(zhǔn)鉛+供試品）：加入與乙管相同重量的供試品，加配制供試溶液的溶劑適量使溶解，再加與甲管相同量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液與醋酸鹽緩沖液 (pH3.5)2ml后，用溶劑稀釋成25ml；
注：若供試品溶液帶顏色，可在甲管中滴加少量稀焦糖溶液或其他無干擾有色溶液，使之與乙、丙顏色一致
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對照溶液：取各品種專論中規(guī)定體積的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液，置于納式比色管種，加入2ml稀醋酸，加水至50ml。
供試溶液：取各品種專論項下的規(guī)定樣品量，置于納氏比色管中，加水至40ml，加2ml稀醋酸，加水至50ml。
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測上述三個試管中分別加入硫代乙酰胺試液2ml，搖勻，放置2min，在白色背景自上向下觀察。 |
向兩溶液中加入硫化鈉溶液1滴，充分混勻，靜置5min，同置白色背景自上向下觀察。 |
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當(dāng)丙管的顏色不淺于甲管時，乙管的顏色與甲管比較，不得更深。 |
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1）若丙管（供試品+標(biāo)準(zhǔn)鉛）淺于甲管（標(biāo)準(zhǔn)鉛）時，應(yīng)用第二法。
2）甲管滴加稀焦糖等有色溶液仍不能使三管顏色一致，應(yīng)用第二法。
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1）按照熾灼殘渣檢查法0841進(jìn)行熾灼處理，然后取遺留得殘渣；
2）直接取該品種熾灼殘渣檢查項下在500~600℃遺留得殘渣；
3）如供試品為溶液，則取各品種項下規(guī)定量得溶液，蒸發(fā)至干，再按熾灼殘渣檢查法進(jìn)行熾灼處理，然后取遺留殘渣；
按照上述3種方式之一制備遺留殘渣，然后加硝酸0.5ml，蒸干至氧化氮蒸汽除盡后，放冷，加鹽酸2ml，置水浴鍋上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯微粉紅色，再加醋酸鹽緩沖液（pH 3.5）2ml，微熱溶解后，轉(zhuǎn)移至乙管中，加水稀釋成25ml。
4）如不取熾灼殘渣項下遺留殘渣，則可取供試品一定量，緩緩熾灼至完全炭化，放冷，加硫酸0.5~1.0ml，使恰濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡后，加硝酸0.5ml，蒸干，至氧化氮蒸汽除盡后，放冷，在500~600℃熾灼使完全炭化，放冷，加鹽酸2ml，置水浴鍋上蒸干后加水15ml，滴加氨試液至對酚酞指示液顯微粉紅色，再加醋酸鹽緩沖液（pH 3.5）2ml，微熱溶解后，轉(zhuǎn)移至納式比色管中，加水稀釋成25ml。
另取配制供試品溶液的試劑，置瓷皿中蒸干后，加醋酸鹽緩沖液(pH3.5)2ml與水15ml，微熱溶解后，移置納氏比色管中，加標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液一定量，加水稀釋成25ml；
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供試溶液：取各品種項下規(guī)定量的樣品，置石英或磁坩堝或內(nèi)，緩慢加熱至碳化。冷卻后，加硝酸2ml，硫酸5滴，使恰濕潤，用低溫加熱至硫酸除盡后，繼續(xù)加熱至不再產(chǎn)生白煙，在500?600℃熾灼使完全灰化。冷卻，加2ml稀鹽酸，水浴蒸干，加鹽酸3滴潤濕，加10ml熱水，加熱2min。然后加入酚酞指示液1滴，逐滴加入氨試液直至溶液顏色呈淺紅色，加2ml稀醋酸（必要時過濾），并用10ml水進(jìn)行沖洗。將濾液和沖洗液均轉(zhuǎn)移至納氏比色管中，加水稀釋至50ml。
對照溶液：水浴蒸干硝酸2ml、硫酸5滴、鹽酸2ml，在沙浴中進(jìn)一步蒸發(fā)至干燥，用3滴鹽酸濕潤殘渣。后續(xù)按照供試溶液的操作方法進(jìn)行，然后加入專項中要求體積的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液，加水稀釋至50ml。
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甲、乙試管中分別加入硫代乙酰胺試液2ml，搖勻，放置2min，同置白紙上，自上項下透視。 |
向兩溶液中加入1滴硫化鈉溶液，充分混勻后，靜置5min，同置白色背景上，自上向下觀察。 |
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乙管：除另有規(guī)定外，取供試品適量，加氫氧化鈉試液5ml與水20ml溶解后，置納氏比色管中；
甲管：取一定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液，加氫氧化鈉試液5ml，并加水使成25ml。
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供試品溶液：取各品種項下規(guī)定量的供試品置置石英或磁坩堝或內(nèi)，開始緩慢加熱，然后在500?600℃熾灼使完全灰化。冷卻后，加1ml王水（鹽酸-硝酸，3：1），水浴上蒸干，加鹽酸3滴潤濕，加10ml熱水，加熱2min。然后加入酚酞指示液1滴，逐滴加入氨試液直至溶液顏色呈淺紅色，加2ml稀醋酸（必要時過濾），并用10ml水進(jìn)行沖洗。將濾液和沖洗液均轉(zhuǎn)移至納氏比色管中，加水稀釋至50ml。
對照溶液：坩堝中加入1ml王水，水浴加熱至蒸干，后續(xù)按照供試溶液的操作方法進(jìn)行，然后加入專項中要求體積的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液，加水稀釋至50ml。
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甲、乙試管中分別加入硫化鈉試液5滴，搖勻。同置白紙上，自上項下透視。 |
向兩溶液中加入硫化鈉溶液1滴，充分混勻，靜置5min，同置白色背景上，自上向下觀察。 |
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供試品溶液：取各品種項下規(guī)定量的供試品置石英或磁坩堝或內(nèi)，加入10ml硝酸鎂溶液（1g六水合硝酸鎂溶于10ml的95%乙醇中），使乙醇灼燒，使樣品碳化。冷卻，加入1ml硫酸，緩慢加熱，然后在500?600℃熾灼使完全灰化，加少量硫酸潤濕后，繼續(xù)灼燒至完全碳化。冷卻，加入3ml鹽酸使殘渣溶解，至水浴上蒸干。接下來操作同方法2（藍(lán)色標(biāo)記部分）
對照溶液：按供試溶液處理方法，將洗液轉(zhuǎn)移至比色管中，加入規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液，加水稀釋至50ml。
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向兩溶液中加入1滴硫化鈉溶液，充分混勻后，靜置5min，同置白色背景自上向下觀察。 |
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2.3 國內(nèi)藥品重金屬檢測注意事項
1）硫代乙酰胺試液與重金屬反應(yīng)受溶液的pH值、硫代乙酰胺試液加入量、顯色時間等因素的影響，經(jīng)試驗，重金屬硫化物生成的最佳pH值是3.0~3.5，本重金屬檢查選用的醋酸鹽緩沖液（pH3.5）2ml調(diào)節(jié)pH值，顯色劑硫代乙酰胺試液用量2ml，顯色時間一般為2分鐘，是最有利顯色反應(yīng)進(jìn)行、使呈色最深的條件。故配制醋酸鹽緩沖液（pH3.5）時，要用pH計調(diào)節(jié)溶液的pH值，應(yīng)注意控制硫代乙酰胺試液的加入量、顯色劑的顯色時間，且以每27ml中含10~20μg的鉛與顯色劑所產(chǎn)生的顏色為最佳目視比色范圍。
2）三種方法顯示的結(jié)果均為微量重金屬的硫化物微粒均勻混懸在溶液中所呈現(xiàn)的顏色，如果重金屬離子濃度大，加入顯色劑后放置時間長，就會有硫化物聚集下沉。為了便于目視比較，第一、二和第三法中的標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液用量以2.0ml（相當(dāng)于20μg的Pb）為宜，小于1.0ml或大于3.0ml，呈色太淺或太深，均不利于目視比較。故在檢查時，如供試品取樣量與標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液的取用量均未指明時，常以標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液為2.0ml來計算供試品的取樣量，并進(jìn)行試驗。
3）如需取熾灼殘渣項下遺留的殘渣作重金屬檢查時，則熾灼溫度必須控制在500~600℃。實驗證明，熾灼溫度在700℃以上時，多數(shù)重金屬鹽都有不同程度的損失；以鉛為例，在700℃經(jīng)6小時熾灼，損失達(dá)68%。某些供試品（如安乃近、諾氟沙星等）在熾灼時能腐蝕瓷坩堝而帶入較多的重金屬，應(yīng)改用石英坩堝或鉑坩堝操作。
4）熾灼殘渣加硝酸處理，必須蒸干，至氧化氮蒸汽除盡，否則會使硫代乙酰胺水解生成硫化氫，因氧化析出乳硫，影響檢查。蒸干后殘渣加鹽酸處理，使重金屬轉(zhuǎn)化為氯化物，在水浴上蒸干以去除多余的鹽酸，加水溶解，加入酚酞指試液1滴，再逐滴加入氨試液，邊加邊攪拌，直到溶液剛顯微粉紅色為止，再加醋酸鹽緩沖液（pH3.5），使供試液的pH值調(diào)節(jié)至3.5。
5）供試品中如含有高鐵鹽，在弱酸性溶液中會使硫代乙酰胺水解生產(chǎn)的硫化氫進(jìn)一步氧化析出乳硫，影響檢查，加入維生素C（0.5~1.0g）可將高鐵離子還原為亞鐵離子而消除干擾。
6）如供試品自身為重金屬的鹽，在檢查這類藥品中的其他金屬時，必須先將供試品本身的重金屬離子出去，再進(jìn)行檢查。如在枸櫞酸鐵銨中檢查鉛鹽時，利用Fe3+在一定濃度的鹽酸中形式HFeCl62-，用乙醚提取除去，再調(diào)節(jié)供試液至堿性，用氰化鉀試液掩蔽微量的鐵后進(jìn)行檢查；右旋糖酐鐵注射液中重金屬檢查，也是在一定濃度的鹽酸中，用乙酸異丁酯提取去除鐵鹽后進(jìn)行檢查。
7）藥品本身生成的不溶性硫化物，影響重金屬檢查，可加入掩蔽劑以避免干擾。如硫酸鋅和葡萄糖酸銻鈉中鉛鹽檢查，是在堿性溶液中加入氰化鉀試液，或在中性溶液加入酒石酸，使鋅離子或銻離子生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，再依法檢查。
8）為了消除鹽酸或其他試劑可能夾雜的重金屬，故在配制供試品溶液時，如使用鹽酸超過1ml（或與鹽酸1ml相當(dāng)?shù)南←}酸）或使用氨試液超過2ml，以及用硫酸或硝酸進(jìn)行有機破壞，或加入其他試劑進(jìn)行處理的，除另有規(guī)定外，對照溶液應(yīng)取同樣量試液蒸干后，依法檢查。
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