強(qiáng)制降解試驗(yàn)屬于藥品穩(wěn)定性研究的內(nèi)容之一，是研發(fā)分析人員在質(zhì)量研究過(guò)程中無(wú)法繞開(kāi)的一個(gè)話題。強(qiáng)制降解試驗(yàn)如能夠合理、高效的開(kāi)展，將為產(chǎn)品的研發(fā)以及生產(chǎn)檢驗(yàn)提供極大的幫助。然而，查閱國(guó)內(nèi)外相關(guān)的指導(dǎo)原則，除光降解試驗(yàn)外，其他強(qiáng)降解條件（如：高溫、高濕、酸/堿水解、氧化等）均未進(jìn)行明確規(guī)定。工作何時(shí)進(jìn)行，如何開(kāi)展，試驗(yàn)結(jié)果如何評(píng)估都困擾著不少研發(fā)分析人員。因此，一些初入職場(chǎng)的分析人員，一談到強(qiáng)制降解試驗(yàn)，總是不知所措。
作為一名默默奮斗在基層的研發(fā)分析人員，通過(guò)不斷學(xué)習(xí)以及工作中積累的經(jīng)驗(yàn)，淺談下個(gè)人對(duì)強(qiáng)制降解試驗(yàn)理解，分享給大家。
本文擬從以下4個(gè)方面談一下這個(gè)話題：
強(qiáng)制降解試驗(yàn)的目的
何時(shí)開(kāi)展強(qiáng)制降解試驗(yàn)
如何設(shè)計(jì)和開(kāi)展強(qiáng)制降解試驗(yàn)
強(qiáng)制降解試驗(yàn)數(shù)據(jù)的評(píng)估
一、強(qiáng)制降解試驗(yàn)的目的
開(kāi)展強(qiáng)制降解試驗(yàn)是獲得藥物可能的降解途徑和降解產(chǎn)物信息的重要途徑，以指導(dǎo)產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和分析方法開(kāi)發(fā)。
有助于更全面了解藥物的降解情況及雜質(zhì)譜概況。對(duì)分析方法的開(kāi)發(fā)、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立以及穩(wěn)定性研究具有重要意義。也為藥品的處方工藝開(kāi)發(fā)、包裝、貯藏條件的確定提供有益支持。圖1展示了強(qiáng)制降解試驗(yàn)在產(chǎn)品質(zhì)量研究過(guò)程中的重要作用。
▲圖1-強(qiáng)制降解試驗(yàn)在產(chǎn)品質(zhì)量研究過(guò)程中的重要作用。
二、何時(shí)開(kāi)展強(qiáng)制降解試驗(yàn)
根據(jù)上面對(duì)強(qiáng)制降解試驗(yàn)?zāi)康牡姆治?，我們可以在藥物研發(fā)的各階段根據(jù)項(xiàng)目研發(fā)的需求開(kāi)展相應(yīng)的強(qiáng)制降解試驗(yàn)。對(duì)于創(chuàng)新藥，由于通過(guò)文獻(xiàn)獲取對(duì)化合物自身化學(xué)性質(zhì)信息較少，對(duì)于此類藥品，強(qiáng)制降解試驗(yàn)建議盡早開(kāi)展，如產(chǎn)品開(kāi)發(fā)階段，分析方法建立階段即可酌情開(kāi)展相應(yīng)工作，以對(duì)化合物性質(zhì)有初步了解，指導(dǎo)產(chǎn)品開(kāi)發(fā)和分析方法建立。隨著研發(fā)的不斷深入和對(duì)產(chǎn)品性質(zhì)的了解加深，可通過(guò)設(shè)計(jì)比較完整的強(qiáng)制降解試驗(yàn)，對(duì)于全面了解藥物性質(zhì)及其穩(wěn)定性，對(duì)產(chǎn)品處方工藝的確定，包裝系統(tǒng)，以及儲(chǔ)存條件的確定提供指導(dǎo)。對(duì)于仿制藥，一般可通過(guò)文獻(xiàn)調(diào)研了解參比制劑或同類藥品的穩(wěn)定特性及其降解途徑，并結(jié)合藥物結(jié)構(gòu)和劑型特點(diǎn)等先驗(yàn)知識(shí)，有側(cè)重地考察已有較明確提示信息的特定降解類型。特別是，當(dāng)處方工藝或有關(guān)物質(zhì)分析方法與參比存在較大差異時(shí)，可通過(guò)設(shè)計(jì)相應(yīng)強(qiáng)制降解試驗(yàn)來(lái)確認(rèn)/驗(yàn)證分析方法的專屬性和靈敏度。也可通過(guò)采用特定破壞條件的樣品，與另一實(shí)驗(yàn)室的檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行比對(duì)，以評(píng)估分析方法在不同實(shí)驗(yàn)室的適用性。
▲圖2-何時(shí)開(kāi)展相應(yīng)的強(qiáng)制降解工作
圖2展示了何時(shí)開(kāi)展相應(yīng)的強(qiáng)制降解工作?？偨Y(jié)來(lái)說(shuō)，Pre-IND和早期臨床階段一般有目的性開(kāi)展相應(yīng)的強(qiáng)制降解試驗(yàn)，以了解藥物的化學(xué)性質(zhì)及降解途徑。臨床階段后期，因處方工藝、分析方法已確定，需設(shè)計(jì)系統(tǒng)性的開(kāi)展工作，全面了解藥物的降解途徑，潛在降解產(chǎn)物及分析方法的適用性。藥品上市后，一般在產(chǎn)品處方工藝或分析方法發(fā)生重大變更時(shí)候，設(shè)計(jì)強(qiáng)制降解試驗(yàn)，重新評(píng)估產(chǎn)品的降解產(chǎn)物以及分析方法的適用性。
三、如何設(shè)計(jì)和開(kāi)展強(qiáng)制降解試驗(yàn)
由于不同藥物品種化學(xué)性質(zhì)不同，試驗(yàn)考察的目的不同，強(qiáng)制降解試驗(yàn)條件的選擇千差萬(wàn)別，那么如何選擇合適的降解條件，是廣大分析研發(fā)人員需要考慮的事情。筆者查閱相關(guān)指導(dǎo)原則和文獻(xiàn)，結(jié)合個(gè)人工作經(jīng)驗(yàn)中的一些體會(huì)，對(duì)降解類型和試驗(yàn)條件的設(shè)置匯總?cè)缦卤恚?/span>
▲表1-降解類型和試驗(yàn)條件的設(shè)置
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類型
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破壞條件
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破壞時(shí)間
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酸破壞
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常見(jiàn)0.1N~1N HCl溶液（可加溫度）
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破壞時(shí)間從幾分鐘到7天不等，破壞時(shí)間需要摸索（具體項(xiàng)目根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行）。
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堿破壞
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常見(jiàn)0.1N~1N NaOH溶液（可加溫度）
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氧化破壞
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0.1%~3%雙氧水中性條件下室溫破壞7天或20%雙氧水破壞
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高溫破壞
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固體
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60~105℃
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液體
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40~80℃
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光照破壞
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固體
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依據(jù)ICH Q1B進(jìn)行（即總照度不低于1.2 × 106 Lux·h、近紫外能量不低于200w·h·m2）
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液體
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4500lx± 500lx，90uw/cm2條件下，照射一定時(shí)間
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破壞樣品一般溶解至適當(dāng)溶劑中進(jìn)行破壞，如藥品水溶性較差，可加入適量有機(jī)溶劑進(jìn)行溶解。初始條件可優(yōu)先選擇相對(duì)溫和的條件下進(jìn)行破壞，根據(jù)降解程度逐步調(diào)整破壞條件，降解程度一般控制在5%~20%，對(duì)于要求含量為標(biāo)示量的90.0%~110.0%的藥品，建議破壞程度不超過(guò)主成分的10%。避免破壞過(guò)度，造成二次降解。當(dāng)然，由于藥物自身的化學(xué)性質(zhì)，并不是每個(gè)降解途徑都能夠達(dá)到目標(biāo)降解程度，當(dāng)藥品在劇烈條件下破壞一定時(shí)間后，仍達(dá)到相應(yīng)降解程度，則終止降解試驗(yàn)（如，1N HCl溶液室溫破壞7天降解程度仍低于5%，可終止試驗(yàn)，不必追求破壞程度必需在5%~20%）。
四、強(qiáng)制降解試驗(yàn)數(shù)據(jù)的評(píng)估
強(qiáng)制降解試驗(yàn)完成后，應(yīng)根據(jù)試驗(yàn)?zāi)康呐c藥品特點(diǎn)，對(duì)試驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析和評(píng)估，并進(jìn)行相應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)控制和改進(jìn)優(yōu)化。
4.1 藥物降解途徑分析和雜質(zhì)譜研究方面
強(qiáng)制降解試驗(yàn)結(jié)束后，應(yīng)立即檢查樣品物理性質(zhì)(如外觀、溶液的澄清度或顏色)的所有變化，并進(jìn)行含量和降解產(chǎn)物的測(cè)定，通過(guò)結(jié)果分析充分理解試驗(yàn)條件對(duì)藥物穩(wěn)定性的影響，評(píng)估分析方法的適用性，為藥物的處方工藝開(kāi)發(fā)、包裝策略的制定提供指導(dǎo)。
檢測(cè)過(guò)程建議使用多種不同類型的檢測(cè)器，如紫外檢測(cè)器和質(zhì)譜，以最大可能的發(fā)現(xiàn)藥物潛在降解雜質(zhì)。紫外檢測(cè)器應(yīng)使用二極管陣列檢測(cè)器（DAD），以分析降解產(chǎn)物在不同檢測(cè)波長(zhǎng)下的吸收差異，使用質(zhì)譜對(duì)強(qiáng)制降解樣品進(jìn)行分析，避免降解產(chǎn)生的一些無(wú)紫外吸收化合物無(wú)法檢測(cè)。強(qiáng)制降解試驗(yàn)產(chǎn)生的主要降解雜質(zhì)應(yīng)根據(jù)常規(guī)穩(wěn)定性研究結(jié)果分析及ICH Q3等指導(dǎo)原則相關(guān)要求，進(jìn)行雜質(zhì)鑒別和結(jié)構(gòu)確認(rèn)。
4.2 方法研究方面
主要的降解雜質(zhì)與目標(biāo)分析雜質(zhì)及主成分之間應(yīng)具有足夠的基線分離度，且無(wú)干擾（溶劑峰和工藝雜質(zhì)峰），根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果及分析目標(biāo)概況（ATP）對(duì)分析方法進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整。
使用DAD檢測(cè)器，并對(duì)主成分峰的峰純度進(jìn)行分析，以避免降解雜質(zhì)峰與主成分峰的共洗脫現(xiàn)象。
應(yīng)對(duì)降解后樣品的質(zhì)量平衡情況進(jìn)行評(píng)估，可對(duì)降解后雜質(zhì)的增加量與降解后含量之和，與初始的接近程度進(jìn)行評(píng)估。一般要求降解后質(zhì)量平衡在90%~110%，如出現(xiàn)較為嚴(yán)重的質(zhì)量不平衡情況，應(yīng)進(jìn)行解釋說(shuō)明，并進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，對(duì)分析方法進(jìn)行優(yōu)化調(diào)整。
五、總結(jié)
設(shè)計(jì)合理且完善的強(qiáng)制降解實(shí)驗(yàn)，可以促進(jìn)對(duì)藥物降解知識(shí)的全面了解，也是分析方法開(kāi)發(fā)的基礎(chǔ)，方法學(xué)驗(yàn)證的重要內(nèi)容，對(duì)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立和穩(wěn)定性研究都有重要作用。上述僅代表個(gè)人結(jié)合工作對(duì)強(qiáng)制降解試驗(yàn)的理解和認(rèn)知，具體實(shí)施細(xì)節(jié)感興趣的可參照下方文獻(xiàn)進(jìn)一步探討。
參考文獻(xiàn)
[1]淺談化學(xué)藥物強(qiáng)制降解試驗(yàn)的設(shè)計(jì)與開(kāi)展[J]中國(guó)新藥雜志，2019,28（20）:2468-2472
[2] FDA perspectives: scientific considerations of forced degradation studies in ANDA submissions［J］．Pharm Tech，2012，36( 5)
[3] Development of forced degradation and stability indicating studies of drugs-A review [J] Journal of pharm Analysis 2014(3)
[4] Forced degradation studies–comparison between ICH, EMA, FDA and WHO guidelines and ANVISA’s resolution RDC 53/2015 [D]
[5] ICH. Q1(R2)
[6] ICH. Q14 Draft Guideline
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