4206 藥包材不溶性微粒測定法
本法系用以測定藥包材中不溶性微粒的大小和數(shù)量。本法適用于注射劑包裝用橡膠塞、注射液用塑料容器、注射液用塑料組件（內蓋和接口）、免洗預灌封注射器用活塞和免洗筆式注射器用活塞、半組裝預灌封注射器、筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)、滴眼劑用塑料瓶等的不溶性微粒大小及數(shù)量的測定。
本法包括光阻法和顯微計數(shù)法。當光阻法測定結果不符合規(guī)定或供試品不適于用光阻法測定時，應采用顯微計數(shù)法進行測定，并以顯微計數(shù)法的測定結果作為判定依據。
試驗環(huán)境及檢測、光阻法及顯微計數(shù)法的測定原理、對儀器的一般要求、儀器的校準同通則0903 不溶性微粒檢查法中的要求。
第一法 光阻法
（1）注射劑包裝用橡膠塞：取被測膠塞數(shù)個（總表面積約100cm2），置250ml錐形瓶中，加入微粒檢查用水適量（取用微粒檢查用水的毫升數(shù)與被測膠塞總面積的平方厘米數(shù)之比為1:1），用鋁箔（或其他適宜的封口材料）蓋住錐形瓶瓶口，置振蕩器中（水平圓周轉動，振蕩直徑12mm±1mm，振蕩頻率300轉/分鐘±10轉/分鐘）振蕩20秒。小心移開鋁箔（或其他適宜的封口材料），先倒出部分供試液沖洗開啟口及取樣杯后，將供試液倒入取樣杯中，靜置15分鐘或適當時間，開啟攪拌器，緩慢攪拌使微粒適當懸浮，依法測定至少3次，每次取樣量應不少于5ml，記錄數(shù)據，棄去第一次數(shù)據，取后續(xù)測定數(shù)據的平均值作為測定結果。
（2）注射液用塑料容器：注射液用非BFS塑料瓶、塑料袋：取被測樣品適量，加入標示裝量的微粒檢查用水，按照生產工藝進行灌裝、封口、滅菌，用水將容器外壁洗凈；注射液用BFS塑料瓶、塑料安瓿：取預灌裝標示裝量微粒檢查用水的樣品適量，用水將容器外壁洗凈；小心翻轉20次，使溶液混合均勻，立即小心開啟容器，先倒出部分供試品溶液沖洗開啟口，再將供試品溶液倒入取樣杯中，靜置15分鐘或適當時間，開啟攪拌器，緩慢攪拌使微粒適當懸浮（或將供試品容器直接脫氣后置于取樣器上，不加攪拌），依法測定至少3次，每次取樣應不少于5ml，記錄數(shù)據，棄去第一次數(shù)據，取后續(xù)測定數(shù)據的平均值作為測定結果。
注：如適用，可直接檢測由供試品包裝的成品制劑。
（3）注射液用塑料組件（內蓋和接口）：取塑料輸液容器用內蓋或塑料輸液容器用接口5個，置500ml錐形瓶或適當容器中，加入250ml微粒檢查用水，用鋁箔（或其他適宜的封口材料）蓋住錐形瓶瓶口，置振蕩器中（水平圓周轉動，振蕩直徑12mm±1mm，振蕩頻率300轉/分鐘±10轉/分鐘）振蕩20秒。小心移開鋁箔（或其他適宜的封口材料），先倒出部分供試液沖洗開啟口及取樣杯后，將供試液倒入取樣杯中，靜置15分鐘或適當時間，開啟攪拌器，緩慢攪拌使微粒適當懸浮，依法測定至少3次，每次取樣量應不少于5ml，記錄數(shù)據，棄去第一次數(shù)據，取后續(xù)測定數(shù)據的平均值作為測定結果。
（4）免洗預灌封注射器活塞和免洗筆式注射器用活塞：取被測活塞數(shù)個（總表面積不少于50cm2），置250ml錐形瓶中，加入微粒檢查用水適量（取用微粒檢查用水的毫升數(shù)與被測活塞總面積的平方厘米數(shù)之比為1:1），用鋁箔（或其他適宜的封口材料）蓋住錐形瓶瓶口，置振蕩器中（水平圓周轉動，振蕩直徑12mm±1mm，振蕩頻率300轉/分鐘±10轉/分鐘）振蕩20秒。小心移開鋁箔（或其他適宜的封口材料），先倒出部分供試液沖洗開啟口及取樣杯后，將供試液倒入取樣杯中，靜置15分鐘或適當時間，開啟攪拌器，緩慢攪拌使微粒適當懸浮，依法測定至少3次，每次取樣量應不少于5ml，記錄數(shù)據，棄去第一次數(shù)據，取后續(xù)測定數(shù)據的平均值作為測定結果。
（5）半組裝預灌封注射器：取滅菌后注射器適量，以標示裝量的微粒檢查用水充裝注射器，并使用清潔活塞封閉，翻轉注射器20次，翻轉過程中可能需要振搖溶液，使微粒適當懸浮。取下錐頭帽/針套，并用推桿下壓活塞，將注射器內容物排至取樣杯中，靜置15分鐘或適當時間，依法測定至少3次，每次取樣量應不少于5ml，記錄數(shù)據，棄去第一次數(shù)據，取后續(xù)測定數(shù)據的平均值作為測定結果。
（6）筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)：取滅菌后筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)適量，以標示裝量的微粒檢查用水充裝套筒，如果是無菌套筒組件，則在充裝前用清潔墊片或活塞密封套筒一端，充裝后用清潔墊片或活塞密封套筒另一端；如果是預活塞的無菌套筒，則在充裝后用清潔墊片密封套筒；如果是預軋蓋的無菌套筒，則在充裝后用清潔活塞密封套筒，翻轉筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)20次，翻轉過程中可能需要振搖溶液，使微粒適當懸浮。采用適宜的打開方式，減少交叉污染風險，將筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)的內容物排至取樣杯中，靜置15分鐘或適當時間，依法測定至少3次，每次取樣量應不少于5ml，記錄數(shù)據，棄去第一次數(shù)據，取后續(xù)測定數(shù)據的平均值作為測定結果。
（7）滴眼劑用塑料瓶：非BFS滴眼劑用塑料瓶：取滴眼劑用塑料瓶適量，用水將容器外壁洗凈，向瓶內注入標示裝量的微粒檢查用水，如有瓶嘴應按要求組合，懸緊瓶蓋，小心翻轉20次，使溶液混合均勻；BFS滴眼劑用塑料瓶：取預灌裝標示裝量微粒檢查用水的樣品適量，用水將容器外壁洗凈；開啟瓶口，先擠出部分供試液沖洗開啟口及取樣杯后，將滴眼劑用塑料瓶中的內容物排至取樣杯中，靜置15分鐘或適當時間，開啟攪拌器，緩慢攪拌使微粒適當懸浮，依法測定至少3次，每次取樣量應不少于5ml，記錄數(shù)據，棄去第一次數(shù)據，取后續(xù)測定數(shù)據的平均值作為測定結果。
注：如適用，可直接檢測由供試品包裝的成品制劑。
第二法 顯微計數(shù)法
（1）注射劑包裝用橡膠塞：
a. 取完整被測膠塞數(shù)個（總表面積約100cm2），置250ml錐形瓶中，加入微粒檢查用水適量（取用微粒檢查用水的毫升數(shù)與被測膠塞總面積的平方厘米數(shù)之比為1:1），用鋁箔（或其他適宜的材料封口）蓋住錐形瓶瓶口，置振蕩器中（水平圓周轉動，振蕩直徑12mm±1mm，振蕩頻率300轉/分鐘±10轉/分鐘）振蕩20秒。小心移開鋁箔（或其他適宜的封口材料），供試液供進一步測試。
b. 用適宜的轉移容器抽取或量取適量（不少于25ml）的供試液，沿濾器內壁緩緩注入經預處理的濾器中，緩緩抽濾至濾膜近干（如所取供試液的量大于過濾漏斗容積，則在抽濾時分批注入）。供試液全部抽濾后，再用轉移容器抽取或量取微粒檢查用水25ml沿壁洗滌過濾漏斗，并抽濾至濾膜近干，保持抽濾狀態(tài)下，移去過濾漏斗，關掉真空泵，用平頭鑷子將濾膜移至平皿上（必要時，可涂抹極薄層的甘油使濾膜平整），微啟蓋子使濾膜適當干燥后，將平皿閉合，置顯微鏡載物臺上，調好入射光，放大100倍或適當?shù)谋稊?shù)進行顯微測量，調節(jié)顯微鏡使濾膜格柵清晰可見后，移動坐標軸，分別測量有效過濾面積上最長粒徑大于規(guī)定粒徑的微粒數(shù)，共進行平行試驗兩份，計算兩次測定結果的平均值。
（2）注射液用塑料容器：照光阻法（2）制備供試品溶液，照上述（1）b同法測定。
注：如適用，可直接檢測由供試品包裝的成品制劑。
（3）注射液用塑料組件（內蓋和接口）：照光阻法（3）制備供試品溶液，照上述（1）b同法測定。
（4）免洗預灌封注射器和免洗筆式注射器用活塞：照光阻法（4）制備供試品溶液，照上述（1）b同法測定。
（5）半組裝預灌封注射器：照光阻法（5）制備供試品溶液，照上述（1）b同法測定。
（6）筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)：照光阻法（6）制備供試品溶液，照上述（1）b同法測定。
（7）滴眼劑用塑料瓶：照光阻法（7）制備供試品溶液，照上述（1）b同法測定。
注：如適用，可直接檢測由供試品包裝的成品制劑。
起草單位：山東省醫(yī)療器械和藥品包裝檢驗研究院 聯(lián)系電話：0531-82682915
參與單位：上海市食品藥品包裝材料測試所、四川省藥品檢驗研究院、江蘇省醫(yī)療器械檢驗所
藥包材不溶性微粒測定法起草說明
一、制修訂的目的與意義
藥包材不溶性微粒是藥品不溶性微粒的來源之一，《中國藥典》2020年版通則0903 不溶性微粒檢查法中詳細介紹了藥品（靜脈用注射劑及供靜脈注射用無菌原料藥）中不溶性微粒的檢查方法，給出了試驗環(huán)境及檢測、光阻法及顯微計數(shù)法的測定原理、對儀器的一般要求、儀器的校準等方面的要求，并根據標示裝量的不同給出了不同的結果判定指標。但因為藥包材的形式多樣、形狀各異，受到形制、用途、材質三方面的約束，所盛裝藥品的風險等級不同，對不溶性微粒項目的指標也不相同，因此，有必要制定藥包材的不溶性微粒測定法，滿足藥包材的生產、使用和監(jiān)管需求。
二、參考標準
《中國藥典》2020版通則0903 不溶性微粒檢查法、ISO 11040-4《預充式注射器第4部分：注射用玻璃套筒和滅菌后待充裝半組裝注射器》、ISO 11040-6《預充式注射器第6部分：注射用塑料套筒和滅菌后待充裝半組裝注射器》、ISO 11040-8《預充式注射器第8部分：成品預充式注射器的要求和檢測方法》、YBB00272004-2015《包裝材料不溶性微粒測定法》、YBB00072004-2015《預灌封注射器用氯化丁基橡膠活塞》、YBB00082004-2015《預灌封注射器用溴化丁基橡膠活塞》、YBB00112004-2015《預灌封注射器組合件（帶注射針）》、YBB00042005-2015《注射液用鹵化丁基橡膠塞》、YBB00052005-2015《注射用無菌粉末用鹵化丁基橡膠塞》、YBB00022002-2015《聚丙烯輸液瓶》、YBB00342002-2015《多層共擠輸液用膜、袋通則》、YBB00242004-2015《塑料輸液容器用聚丙烯組合蓋（拉環(huán)式）》、YBB00152004-2015《筆式注射器用氯化丁基橡膠活塞和墊片》、YBB00162004-2015《筆式注射器用溴化丁基橡膠活塞和墊片》。
三、需重點說明的問題
1. 范圍
基于現(xiàn)有需求和經驗，本公示稿適用特定的藥包材品種。與藥典通則0903相似，包括光阻法和顯微計數(shù)法，顯微計數(shù)法為仲裁方法。
2. 測定方法
2.1光阻法
供試液制備：單個組件類，如注射劑包裝用橡膠塞、免洗預灌封注射器用活塞和免洗筆式注射器用活塞，屬于包裝系統(tǒng)的一部分，供試液的制備遵循微粒檢查用水的毫升數(shù)與被測膠塞總面積的平方厘米數(shù)之比為1:1的原則，如總表面積為100cm2的膠塞需要加入100ml的微粒檢查用水。
半組裝預灌封注射器屬于包裝容器，其供試液的制備以標示裝量的微粒檢查用水充裝注射器，并使用清潔活塞封閉，盡量排除活塞對半組裝預灌封注射器不溶性微粒測試結果的影響。清潔活塞的說法參考ISO 11040-4附錄D.2微粒測試中“D.2.3.7以標示裝量充裝注射器，并使用清潔活塞封閉”。
筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)：參考國外標準ISO 21881-2019，因筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)存在前端或后端未密封的形式，所以測試前要求至少有一端密封，系統(tǒng)內注入微粒檢查用水后，再用清潔活塞或清潔墊片封閉，以制備供試液進行后續(xù)測試。
2.2顯微計數(shù)法
測試次數(shù)：考慮到YBB標準的延續(xù)性，仍延續(xù)“共進行平行試驗兩份”的表述，一共進行兩次測試。
測試結果：測量有效過濾面積上最長粒徑大于規(guī)定粒徑的微粒數(shù)，規(guī)定粒徑及其指標要求在各品類通則中給出，本方法標準中不做規(guī)定。
3. 修改的內容
在第一次公示稿收到的意見和建議的基礎上，起草組對標準進行了進一步的修改和完善。與第一次公示稿相比，本次公示稿的主要修改之處如下：
（1）適用范圍修改為：“適用于注射劑包裝用橡膠塞、注射液用塑料容器、注射液用塑料組件（內蓋和接口）、免洗預灌封注射器用活塞和免洗筆式注射器用活塞、半組裝預灌封注射器、筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)、滴眼劑用塑料瓶的不溶性微粒大小及數(shù)量的測定。”參考已經公示和征求意見的部分中通則的內容，修改了適用品種的分類和表述，以更好的和各中通則的內容銜接，提高標準的適用性。
（2）全文將振蕩條件中的“直徑12mm±1mm”修改為“振蕩直徑12mm±1mm”。
（3）全文將供試液制備中“緩慢攪拌使溶液均勻”修改為“緩慢攪拌使微粒適當懸浮”。
（4）將第一法 光阻法（6）和第二法 顯微計數(shù)法（6）由“筆式注射器預灌封系統(tǒng)”修改為“筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)”。
（5）將第一法 光阻法（6）筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng) 供試液的制備修改為：“取滅菌后筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)適量，以標示裝量的微粒檢查用水充裝套筒，如果是無菌套筒組件，則在充裝前用清潔墊片或活塞密封套筒一端，充裝后用清潔墊片或活塞密封套筒另一端；如果是預活塞的無菌套筒，則在充裝后用清潔墊片密封套筒；如果是預軋蓋的無菌套筒，則在充裝后用清潔活塞密封套筒，翻轉筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)20次，翻轉過程中可能需要振搖溶液，使微粒適當懸浮。采用適宜的打開方式，減少交叉污染風險……”。
(6) 將第一法 光阻法（7）滴眼劑用塑料瓶 供試液的制備修改為：“非BFS滴眼劑用塑料瓶：取滴眼劑用塑料瓶適量，用水將容器外壁洗凈，向瓶內注入標示裝量的微粒檢查用水，如有瓶嘴應按要求組合，懸緊瓶蓋，小心翻轉20次，使溶液混合均勻；BFS滴眼劑用塑料瓶：取預灌裝標示裝量微粒檢查用水的樣品適量，用水將容器外壁洗凈……”。
（7）第一法 光阻法，除“注射液用塑料容器”部分外，其他部分刪除“(或將供試品容器直接脫氣后置于取樣器上，不加攪拌)”的表述。
（8）全文將“三角燒杯”統(tǒng)一修改為“錐形瓶”。
（9）將第二法 顯微計數(shù)法（1）b.中“放大倍數(shù)100倍”修改為“放大100倍或適當?shù)谋稊?shù)”，“調節(jié)顯微鏡使濾膜格柵清洗可見”修改為“調節(jié)顯微鏡使濾膜格柵清晰可見”。
（10）刪除第二法 顯微計數(shù)法 結果表示中“按規(guī)定粒徑分別提交每1ml中所含平均微粒數(shù)”的表述。
4. 主要意見反饋及回復情況
(1) 建議修改和完善筆式注射器預灌封系統(tǒng)供試液的制備方式，原文描述不清晰?；貜停翰杉{。修改為：筆式注射器用卡式瓶系統(tǒng)：取滅菌后筆式注射器用預灌封系統(tǒng)適量，以標示裝量的微粒檢查用水充裝套筒，如果是無菌套筒組件，則在充裝前用清潔墊片或活塞密封套筒一端，充裝后用清潔墊片或活塞密封套筒另一端；如果是預活塞的無菌套筒，則在充裝后用清潔墊片密封套筒；如果是預軋蓋的無菌套筒，則在充裝后用清潔活塞密封套筒，翻轉筆式注射器預灌封系統(tǒng)20次，……
（2）建議將注射劑包裝用橡膠塞、免洗預灌封注射器活塞和免洗筆式注射器用用活塞供試液的制備中用到的“250ml錐形瓶”改為“250ml三角燒杯”。
回復：不采納。ISO 8871-3、YBB00272004-2015、YY/T 1556 標準中使用的振蕩容器都是錐形瓶，錐形瓶相比于三角燒杯在實驗室更為常見，且振蕩后有靜置時間以排出氣泡和硅油的影響。錐形瓶的瓶口尺寸和形式不會影響到測試結果。
（3）建議將起草說明中：2.1光阻法：“塑料輸液容器用內蓋和接口”的供試液制備單獨進行說明，描述的內容與測定法中樣品和檢查用水量一致。
回復：采納。修改起草說明中供試液的制備部分的描述。
（4）建議將注射劑包裝用橡膠塞供試液制備過程中，加入微粒檢查用水適量改為加入合適的微粒檢查用溶劑適量，建議可以結合產品的特點選擇合適的微粒檢查用溶劑進行實驗。
回復：不采納。與現(xiàn)行的國內外標準保持一致，洗脫液選擇微粒檢查用水，以進一步提高本方法結果的可重復性。
（5）參考美國藥典<381注射用藥品包裝/給藥系統(tǒng)的彈性組件>中理化測試下供試液的準備，建議將注射劑包裝用橡膠塞供試液的制備過程中，加入微粒檢查用水用微粒檢查用水的毫升數(shù)與被測膠塞總面積的平方厘米數(shù)之比改為2：1。
回復：不采納。Usp381理化性能供試液制備與不溶性微粒供試液的制備不能等同。
（6）建議振蕩條件修改為“置振蕩器中 （水平圓周轉動，直徑 12 mm± 1mm ，振蕩頻率 300 轉/ 分鐘± 10 轉/ 分鐘）振蕩 20 秒（或其他適當?shù)臈l件）。”。企業(yè)可以結合產品的特點進行實驗條件選擇，增加企業(yè)實施靈活度。
回復：不采納。本標準是藥包材不溶性微粒的測定方法，藥包材形式多樣，形狀各異，在對單個組件（如膠塞）測定不溶性微粒時，需要振蕩，以使膠塞表面的不溶性微粒充分洗脫到供試液中，不會導致額外粒子貢獻。帶墊片的鋁蓋標準中并未要求測試不溶性微粒。振蕩頻率300±10轉/分鐘參考了國內藥包材標準YBB00112004-2015和國外標準ISO 8871-3，故不做修改。
（7）建議將顯微計數(shù)法中放大 100 倍進行顯微測量修改為放大100倍適當?shù)谋稊?shù)（以看清為準）進行顯微測量。
回復：采納。修改為放大100倍或適當?shù)谋稊?shù)。
（8）為了適用于多種型號檢測設備，建議修改修改為“置振蕩器中（水平圓周轉動，振蕩頻率300轉/分鐘±10轉/分鐘）”，刪除振蕩直徑的要求。
回復：不采納。對振蕩直徑和振蕩頻率進行規(guī)定，能夠提高試驗結果的可重復性，避免不同振蕩條件對實驗結果的影響。經調研，市場上的振蕩器能夠滿足此振蕩條件。
（9）制劑生產廠家以購買非免洗膠塞為主，使用前均需要進行清洗/烘干再使用。進行入場檢測不溶性微粒不具代表性，檢測意義也不大。能否增加適用范圍來支持檢測？例如：該指導適用于出廠檢測和膠塞使用前檢測的描述。
回復：不采納。各品類通則中有規(guī)定。例如，5201 注射劑包裝用橡膠密封件通則公示稿中給出：不溶性微粒用于免洗待滅菌橡膠密封件和免洗免滅菌橡膠密封件，必要時進行檢查。
京公網安備11010802046783號
