分析方法開發(fā)活動(dòng)一般應(yīng)滿足以下三個(gè)要求：科學(xué)合理的設(shè)計(jì)、全生命周期風(fēng)險(xiǎn)管理、兼顧效率與成本。
本文主要以HPLC方法開發(fā)為例說明筆者的觀點(diǎn)。
一、科學(xué)合理的設(shè)計(jì)
對分析方法的限度、實(shí)驗(yàn)條件、計(jì)算方法、系統(tǒng)適用性試驗(yàn)、樣品處理等5個(gè)方面分別詳細(xì)研究各項(xiàng)參數(shù)選擇的合理性。各項(xiàng)參數(shù)的選擇不得有明顯的風(fēng)險(xiǎn)，如未評估溶劑效應(yīng)風(fēng)險(xiǎn)、超說明書使用色譜柱、含量測定二步稀釋未評估誤差、未評估緩沖鹽緩沖能力、未評估流動(dòng)相強(qiáng)吸收對檢測結(jié)果的影響等。
分析方法設(shè)計(jì)相關(guān)內(nèi)容繁多，本文難以盡述，請參閱筆者其他方法開發(fā)相關(guān)文章，或關(guān)注藥視網(wǎng)“HPLC方法開發(fā)高手養(yǎng)成計(jì)劃”系列課程及其它線下方法開發(fā)課程。
二、全生命周期風(fēng)險(xiǎn)管理
在方法開發(fā)時(shí)應(yīng)基于物料性質(zhì)、研究數(shù)據(jù)與方法性能的理解識(shí)別分析方法中存在的高風(fēng)險(xiǎn)因素，并進(jìn)行必要的評估與研究，采取適當(dāng)?shù)膽?yīng)對措施，使分析方法在全生命周期（包括方法開發(fā)與驗(yàn)證、方法轉(zhuǎn)移、日常檢測）的風(fēng)險(xiǎn)處于可接受的水平。
因此對于用于商業(yè)批產(chǎn)品放行檢測等一類長時(shí)間使用的分析方法，在方法開發(fā)期間其性能應(yīng)有足夠的儲(chǔ)備，高風(fēng)險(xiǎn)項(xiàng)應(yīng)充分研究，以應(yīng)對儀器、試劑、耗材、操作人員等外部環(huán)境發(fā)生改變的挑戰(zhàn)；例如高風(fēng)險(xiǎn)雜質(zhì)峰應(yīng)達(dá)成基線分離并有明顯間隔，不得設(shè)置難以實(shí)現(xiàn)的參數(shù)范圍限制（如流動(dòng)相pH±0.05），存在殘留吸附的情況應(yīng)詳細(xì)說明定量限、準(zhǔn)確度范圍下限的驗(yàn)證的注意事項(xiàng)......
此外還需評估物資性質(zhì)與供應(yīng)的穩(wěn)定性，即分析方法所使用的儀器、耗材、試劑等物料在不同供應(yīng)商、批間、批內(nèi)等應(yīng)具有相同的性質(zhì)，在預(yù)期的時(shí)間范圍內(nèi)有穩(wěn)定的來源。在實(shí)踐中一般建議如下：
● 優(yōu)先考慮使用簡單無機(jī)鹽、避免使用復(fù)雜有機(jī)物作為流動(dòng)相的添加劑，如使用磷酸及其鹽等無機(jī)鹽代替三氟乙酸（不同供應(yīng)商的三氟乙酸在某些雜質(zhì)檢測中結(jié)果存在明顯差異）；
● 考慮采用國內(nèi)供應(yīng)商的產(chǎn)品如液相色譜儀（如華譜科儀）、色譜柱（如納譜分析）以規(guī)避中西方摩擦可能引起的相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)；
● 避免使用不成熟的分析技術(shù)、技術(shù)不成熟的產(chǎn)品或市場競爭能力弱的公司的產(chǎn)品......
三、兼顧效率與成本
在滿足上述兩個(gè)要求的前提下，分析方法開發(fā)時(shí)應(yīng)統(tǒng)籌規(guī)劃效率與成本的相關(guān)設(shè)計(jì)，盡量簡化操作、縮短運(yùn)行時(shí)間、使用價(jià)格低廉的試劑與耗材，以節(jié)約成本、提高效率。在實(shí)踐中一般建議如下：
3.1 限度
● 只要科學(xué)合理，應(yīng)盡量論證更大的限度（收緊限度是在此之后的對產(chǎn)品質(zhì)量的內(nèi)部更高要求，建議為內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)而不是申報(bào)標(biāo)準(zhǔn)），以減少質(zhì)量控制的難度；相關(guān)內(nèi)容詳見筆者在注冊圈公眾號(hào)的“雜質(zhì)限度制定系列文章”；
● 基于風(fēng)險(xiǎn)科學(xué)合理地減少需要進(jìn)行產(chǎn)品質(zhì)量控制的項(xiàng)目；
3.2 樣品處理
● 操作步驟盡可能簡單；
● 可根據(jù)溶質(zhì)性質(zhì)在溶劑中加入酸、堿等助溶劑減少溶劑中有機(jī)相的比例；
● 有關(guān)物質(zhì)與含量測定等不同檢測項(xiàng)在方法開發(fā)時(shí)應(yīng)統(tǒng)籌考慮是否可以共用同一份溶液；
3.3 實(shí)驗(yàn)條件
● 同一個(gè)項(xiàng)目用到的流動(dòng)相、色譜柱與溶劑種類應(yīng)盡可能少；
● 采用質(zhì)量相近、價(jià)格相對低廉的國產(chǎn)儀器、色譜柱、試劑等；
● 雜質(zhì)定位盡可能使用相對保留時(shí)間（充分評估相對保留時(shí)間的耐用性），而不是對照品，以減少日常檢測過程中的對照品需求。
● 采用短、小粒徑色譜柱代替常規(guī)色譜柱以縮短運(yùn)行時(shí)間；
● 長時(shí)間運(yùn)行的分析方法運(yùn)行時(shí)間應(yīng)盡可能短，有關(guān)物質(zhì)一般建議不超過30分鐘、含量測定10分鐘......
3.4 計(jì)算方法
● 在準(zhǔn)確度符合要求的前提下，雜質(zhì)計(jì)算方法優(yōu)先使用主成分外標(biāo)法、自身對照法、峰面積歸一化法，避免使用對照品外標(biāo)法、內(nèi)標(biāo)法、標(biāo)準(zhǔn)加入法，減少雜質(zhì)對照品制備、采購、管理的成本；
● 在準(zhǔn)確度符合要求的前提下，優(yōu)先考慮單點(diǎn)外標(biāo)法，避免使用標(biāo)準(zhǔn)曲線法；
3.5 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)
● 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)分離度只考察分離風(fēng)險(xiǎn)最高的組分，靈敏度以主成分評估所有組分；
● 系統(tǒng)適用性試驗(yàn)如考察降解雜質(zhì)的分離度，可采用主成分對照品強(qiáng)制降解制備系統(tǒng)適用性溶液；
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