培養(yǎng)基滅菌是否徹底直接影響實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),影響培養(yǎng)基滅菌的因素有很多, 除了培養(yǎng)基內(nèi)雜菌的種類(lèi)和數(shù)量,還與滅菌時(shí)間和溫度的選擇等因素有關(guān)。今天小編與大家一起分享影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素。
1、培養(yǎng)基滅菌的定義
物理或化學(xué)方法從培養(yǎng)基中殺滅有生活能力的細(xì)菌營(yíng)養(yǎng)體及其孢子,或從中將其除去。
2、培養(yǎng)基滅菌的目的
殺滅培養(yǎng)基中的微生物,為后續(xù)發(fā)酵過(guò)程創(chuàng)造無(wú)菌的條件。
3、培養(yǎng)基滅菌的要求
1、達(dá)到要求的無(wú)菌程度——10-3
2、盡量減少營(yíng)養(yǎng)成分的破壞
4、培養(yǎng)基滅菌的方法
1、化學(xué)滅菌
2、過(guò)濾滅菌
3、濕熱滅菌
5、培養(yǎng)基滅菌溫度的選擇
1、應(yīng)考慮微生物的熱致死溫度(應(yīng)高于該溫度,一般以芽孢為準(zhǔn));
2、在保證滅菌效果的前提下,盡可能減少培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)成份的破壞;
3、遵循培養(yǎng)基廠家建議。
6、影響培養(yǎng)基滅菌的主要因素
1、培養(yǎng)基成分
油脂、糖類(lèi)及蛋白質(zhì)等組成的高濃度有機(jī)物會(huì)包于細(xì)胞的周?chē)问揭粚颖∧亩绊憻岬膫鲗?dǎo)。而高濃度的鹽類(lèi)、色素則削弱其耐熱性,滅菌較易。一般糖類(lèi)含量較多的時(shí)候最好選用115℃/30 分鐘;一般的培養(yǎng)基可選擇 121℃/20 分鐘。
2、pH值
pH值對(duì)微生物的耐熱性影響很大。pH值在6.0~8.0 時(shí),微生物最不易死亡。pH值6.0時(shí),微生物比較容易死亡,此時(shí)pH很容易滲入微生物的細(xì)胞,從而改變細(xì)胞的生理反應(yīng),促使其死亡。所以培養(yǎng)基的pH越低,所需的時(shí)間也越短。
3、培養(yǎng)基中顆粒
顆粒小,容易滅菌,顆粒大,則難滅菌。培養(yǎng)基結(jié)塊會(huì)造成培養(yǎng)基滅菌的不徹底。
4、泡沫
泡沫中的空氣形成隔熱層,使熱量難以滲透進(jìn)去,殺死其中的雜菌,從而影響培養(yǎng)基滅菌效果。
5、滅菌器內(nèi)冷空氣是否排凈
高壓蒸汽滅菌器在使用時(shí),冷空氣排除干凈,才能達(dá)到飽和蒸汽。當(dāng)水蒸氣中含有空氣時(shí),壓力表上所示的壓力不是水蒸氣的實(shí)際壓力,而是水蒸氣壓力和空氣壓力的和。相同的壓力下,含空氣的蒸汽的溫度低于飽和蒸汽的溫度,所以當(dāng)滅菌器加熱達(dá)到需要的滅菌壓力時(shí),如果含有空氣,滅菌器內(nèi)達(dá)不到所需的滅菌溫度,就達(dá)不到應(yīng)有的滅菌效果。