近日，化妝品檢定所發(fā)布《毒理學(xué)關(guān)注閾值（TTC）方法應(yīng)用技術(shù)指南（征求意見稿）》，內(nèi)容如下：
毒理學(xué)關(guān)注閾值（TTC）方法應(yīng)用技術(shù)指南
（征求意見稿）
1.概述
毒理學(xué)關(guān)注閾值（Threshold of Toxicological Concern，TTC）方法是基于化學(xué)物質(zhì)的毒性效應(yīng)主要與其結(jié)構(gòu)相關(guān)這一基本假設(shè)。關(guān)鍵是確定是否適用于TTC并進(jìn)行結(jié)構(gòu)歸類，且不能低估暴露量。
本指南介紹了TTC在化妝品安全評估中的應(yīng)用，明確了TTC方法的適用范圍、術(shù)語和釋義、物質(zhì)分類、評估程序以及混合物的使用要求。
2.適用范圍
適用于化學(xué)結(jié)構(gòu)明確，且不包含嚴(yán)重致突變警告結(jié)構(gòu)，含量較低且缺乏系統(tǒng)毒理學(xué)研究數(shù)據(jù)的化妝品原料或風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)。
以下原料或風(fēng)險(xiǎn)物質(zhì)不適用于本指南，包括金屬或金屬化合物、強(qiáng)致癌物（如黃曲霉毒素、亞硝基化合物和聯(lián)苯胺類等）、蛋白質(zhì)、類固醇、高分子質(zhì)量的物質(zhì)、有很強(qiáng)生物蓄積性物質(zhì)以及放射性化學(xué)物質(zhì)等；具有防腐、防曬、著色、染發(fā)、祛斑美白、防脫發(fā)、祛痘、抗皺（物理性抗皺除外）、去屑、除臭功能以及具有較高生物活性的原料；具有吸入風(fēng)險(xiǎn)的原料、納米原料和無機(jī)物等。
3.術(shù)語和釋義
3.1毒理學(xué)關(guān)注閾值（Threshold of Toxicological Concern，TTC）
在該暴露水平下，預(yù)計(jì)不存在危害人類健康的風(fēng)險(xiǎn)。
3.2全身暴露量（Systemic Exposure Dosage，SED）
通過各種暴露途徑進(jìn)入體循環(huán)的待評估物質(zhì)的預(yù)計(jì)量，通常以μg/kg bw/day表示。
3.3潛在 DNA 反應(yīng)性致突變物/致癌物（Potential DNA-Reactive Mutagens/Carcinogens）
直接作用于DNA，可能引起DNA損傷導(dǎo)致復(fù)制錯誤或可能誘導(dǎo)細(xì)胞癌變的物質(zhì)。
3.4 Cramer類別（Cramer Class）
在TTC評估中，根據(jù)化學(xué)物質(zhì)的分子結(jié)構(gòu)和潛在毒性將化學(xué)物質(zhì)分為三類，分別為Cramer I類、Cramer II類和Cramer III類。
4.物質(zhì)分類
根據(jù)待評估物質(zhì)是否具有遺傳毒性，分為潛在或非潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物。
4.1潛在 DNA 反應(yīng)性致突變物/致癌物的TTC閾值
潛在 DNA 反應(yīng)性致突變物/致癌物的TTC為0.0025µg/kg/day。
4.2非潛在 DNA 反應(yīng)性致突變物/致癌物的TTC閾值
根據(jù)待評估物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)和代謝物安全性相關(guān)的問題，非潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物分為 Cramer I類 、Cramer II類和Cramer III類物質(zhì)。
Cramer I類：結(jié)構(gòu)簡單易代謝，經(jīng)口毒性低的物質(zhì)。包括：支鏈無環(huán)脂肪烴、普通碳水化合物、普通萜類、不具有特定官能團(tuán)脂肪族化合物的磺酸鹽或氨基磺酸鹽等。這類物質(zhì)的TTC為46 µg/kg/day。
Cramer III類：具有不能初步假定安全性高、甚至可能顯示出有明顯的毒性或含有反應(yīng)性官能團(tuán)的化學(xué)結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，包括：含脂肪族仲胺、氰基、亞硝基、重氮、三氮烯或季銨氮原子的化合物；含除碳、 氫、氧、氮或二價硫以外元素且這些元素非以簡單陰陽離子形式存在的物質(zhì)；某些苯衍生物；某些雜環(huán)物質(zhì)；含有三種以上特定官能團(tuán)且包含游離不飽和雜原子的脂肪族物質(zhì)等。這類物質(zhì)的TTC為2.3 µg/kg/day。
Cramer II 類：介于其中的物質(zhì)。即具有比Cramer I類物質(zhì)毒性強(qiáng)、但不像Cramer III類物質(zhì)那樣具有明顯毒性結(jié)構(gòu)特征的物質(zhì)。包括除醇、醛、側(cè)鏈酮、酸、酯之外沒有其他官能團(tuán)的物質(zhì)；含簡單取代基的單碳環(huán)且無環(huán)縮醛或縮酮的化合物，單環(huán)烷酮或帶有或不帶有環(huán)酮的雙環(huán)物質(zhì)等。這類物質(zhì)的TTC為2.3 µg/kg/day。
5.評估程序
依次按以下步驟展開評估，評估程序流程圖見附錄1.
5.1判斷待評估物質(zhì)是否符合TTC的適用范圍
判斷待評估物質(zhì)是否符合TTC方法的使用條件。如果符合，可使用TTC法進(jìn)行評估該物質(zhì)的安全性；如果不符合，需要按照《化妝品安全評估技術(shù)導(dǎo)則（2021年版）》（以下簡稱《導(dǎo)則》）要求進(jìn)行安全評估。
5.2計(jì)算全身暴露量（SED）
按照《導(dǎo)則》中4.3規(guī)定的方法開展暴露評估，計(jì)算待評估物質(zhì)的SED。
5.3待評估物質(zhì)是否為潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物
開展至少兩項(xiàng)不同遺傳毒性終點(diǎn)的試驗(yàn)（至少包括一項(xiàng)基因突變試驗(yàn)和一項(xiàng)染色體畸變試驗(yàn)）。若待評估物質(zhì)的一項(xiàng)或多項(xiàng)試驗(yàn)結(jié)果為陽性，不能排除遺傳毒性時，則判定該物質(zhì)為潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物；當(dāng)不同遺傳毒性終點(diǎn)的試驗(yàn)結(jié)果均為陰性，判定該物質(zhì)為非潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物。
5.4待評估物質(zhì)是潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物
如SED ≥ 0.0025µg/kg/day，則認(rèn)為其引起癌癥的風(fēng)險(xiǎn)性較高。
如SED < 0.0025µg/kg/day，則認(rèn)為該物質(zhì)引起癌癥的風(fēng)險(xiǎn)性較低，可以安全使用。
5.5待評估物質(zhì)是非潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物
根據(jù)物質(zhì)分類判定原則判斷Cramer類別，并與相應(yīng)的閾值進(jìn)行比對。如根據(jù)原則判斷待評估物質(zhì)屬于Cramer I類物質(zhì)，SED ≥ 46 µg/kg/day，該物質(zhì)需要按照《導(dǎo)則》進(jìn)一步開展安全評估；SED < 46 µg/kg/day，則待評估物質(zhì)在當(dāng)前使用條件下的風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍之內(nèi)。
6.混合物
對于混合物如植物提取物，需確定待評估物質(zhì)是否為潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物，盡可能多的識別出具體成分，除生產(chǎn)過程中添加的必要溶劑或穩(wěn)定劑、防腐劑、抗氧化劑等外，需確定成分含量不低于80%。對于已知成分，分別采用適宜的評估方法進(jìn)行安全評估，以確保使用安全，若含有結(jié)構(gòu)類似的成分，應(yīng)進(jìn)行劑量疊加評估；對于未知成分，若無法確定Cramer類別，其整體的Cramer類別按TTC最低的一類計(jì)，即Cramer III類。
附錄1
TTC應(yīng)用于化妝品安全評估流程圖
圖1 TTC應(yīng)用于化妝品安全評估流程圖
附錄2
TTC法在化妝品原料安全評估中應(yīng)用示例（化學(xué)物質(zhì)）
注：實(shí)例所用數(shù)據(jù)非真實(shí)數(shù)據(jù)，僅供方法參考。
1.待評估物質(zhì)信息
中文名稱：己基癸醇，《已使用化妝品原料目錄（2021年版）》中3202號
INCI名稱/英文名稱：HEXYLDECANOL
CAS號：2425-77-6
化妝品中濃度及使用產(chǎn)品類別：0.0001%，身體乳
分子式：C16H34O
結(jié)構(gòu)式：
圖2 己基癸醇的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖
2.待評估物質(zhì)基本理化特性
物理狀態(tài)： 無色液體
熔點(diǎn)/凝固點(diǎn)： -69℃
相對密度： 0.8369，20℃
沸點(diǎn)： 300℃
蒸汽壓： 0.004 mbar，38℃
溶解度： ＜1 mg/L
脂水分配系數(shù)： 6.66
閃點(diǎn)： 159℃
燃點(diǎn)： 238℃
粘度： 41.1 mPa s，20℃
3.待評估物質(zhì)局部毒理學(xué)信息
急性毒性：根據(jù)供應(yīng)商測試，該原料在大鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)中，LD0>2000 mg/kg bw且無動物死亡，表明該原料急性經(jīng)口毒性為低毒性；
皮膚刺激性：在家兔多次皮膚刺激試驗(yàn)中，采用0.1%的該原料進(jìn)行試驗(yàn)，顯示該成分為無刺激性；
皮膚光毒性和光變態(tài)反應(yīng)：采用0.1%的該原料進(jìn)行試驗(yàn)，未見皮膚光毒性和光變態(tài)反應(yīng)；
皮膚致敏性：根據(jù)供應(yīng)商測試，局部封閉涂皮（Buehler Test, BT）試驗(yàn)中，采用0.1%的該原料進(jìn)行誘導(dǎo)接觸和激發(fā)接觸，未見皮膚變態(tài)反應(yīng)；
遺傳毒性：細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)和體外染色體畸變試驗(yàn)結(jié)果顯示，己基癸醇未引起基因突變和染色劑畸變；
其他系統(tǒng)毒性：未收集到該成分系統(tǒng)毒性信息。
4.評估步驟
4.1判斷待評估物質(zhì)是否符合TTC使用范圍
已知待評估物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)，在身體乳中的含量較低，主要暴露途徑為經(jīng)皮，暴露量可計(jì)算，缺乏系統(tǒng)毒理學(xué)數(shù)據(jù)，且不屬于需排除的情形，故可用TTC法進(jìn)行評估。
4.2計(jì)算全身暴露量
用以下公式計(jì)算：
式中，A為以單位體重計(jì)的化妝品每天使用量[mg/(kg bw·d)]，可參考《The SCCS's Notes of Guidance for the Testing of Cosmetic Substances and Their Safety Evaluation-12th Revision》；C為該化合物在產(chǎn)品中的濃度（%）；DAp為經(jīng)皮吸收率（%），默認(rèn)的經(jīng)皮吸收率為100%。
因此，SED = 7.82×106×0.0001×1×1/(60×100) = 0.13µg/kg/day
4.3待評估物質(zhì)是否為潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物
該物質(zhì)為非潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物。
4.4結(jié)論
根據(jù)物質(zhì)分類原則或使用分類軟件（如歐洲化學(xué)品管理局開發(fā)的Toxtree、經(jīng)濟(jì)合作與發(fā)展組織開發(fā)的QSAR Toolbox等）并經(jīng)確認(rèn)，己基癸醇屬于Cramer I類物質(zhì)。身體乳中濃度為0.0001%的己基癸醇的全身暴露量為0.13µg/kg/day，小于Cramer I類物質(zhì)的毒理學(xué)關(guān)注閾值46 µg/kg/day。
綜上所述，對己基癸醇的局部毒性、遺傳毒性和TTC評價結(jié)果等信息進(jìn)行綜合評價，認(rèn)為身體乳中使用濃度為0.0001%的己基癸醇時，在正常、合理的及可預(yù)見的使用條件下，不會對人體健康產(chǎn)生危害。
5.參考文獻(xiàn)
略。
附錄3
TTC法在化妝品原料安全評估中應(yīng)用示例（植物提取物）
注：實(shí)例所用數(shù)據(jù)非真實(shí)數(shù)據(jù)，僅供方法參考。
1.待評估物質(zhì)信息
中文名稱：某植物提取物，《已使用化妝品原料目錄（2021年版）》中※號
IINCI名稱/英文名稱：※ EXTRACT
化妝品中的濃度及使用產(chǎn)品類別：0.1%，面霜
2.待評估物質(zhì)成分分析
該物質(zhì)為植物提取物，通過文獻(xiàn)檢索或成分分析，含有未知成分8.16%，具體見表1（注：非真實(shí)數(shù)據(jù)，僅供方法參考）。
表1 某植物提取物成分及含量表
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成分
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含量（%）
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纖維素
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25.459
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……
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……
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水
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4.95
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……
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……
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未知成分
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8.16
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3.待評估物質(zhì)毒理學(xué)信息
急性毒性：根據(jù)供應(yīng)商測試，該原料在大鼠急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)中，LD50>2000 mg/kg bw且無動物死亡，表明該原料急性經(jīng)口毒性為低毒性；
皮膚刺激性：根據(jù)供應(yīng)商測試，在家兔多次皮膚刺激試驗(yàn)中，采用2.0 %的該原料進(jìn)行試驗(yàn)，顯示該成分為無刺激性；
皮膚光毒性和光變態(tài)反應(yīng)：根據(jù)文獻(xiàn)資料，采用2.0%的該原料進(jìn)行試驗(yàn)，未見皮膚光毒性和光變態(tài)反應(yīng)；
皮膚致敏性：供應(yīng)商數(shù)據(jù)顯示，局部封閉涂皮（Buehler Test, BT）試驗(yàn)中，采用2.0%的該原料進(jìn)行涂皮和激發(fā)接觸，未見皮膚變態(tài)反應(yīng)；
遺傳毒性：細(xì)菌回復(fù)突變試驗(yàn)和體外染色體畸變試驗(yàn)結(jié)果顯示，該原料未引起基因突變和染色劑畸變；
其他系統(tǒng)毒性：未收集到該成分系統(tǒng)毒性數(shù)據(jù)。
4.評估步驟
4.1判斷待評估物質(zhì)是否符合TTC使用范圍
待評估物質(zhì)的暴露量可計(jì)算，缺乏系統(tǒng)毒理學(xué)數(shù)據(jù)，且不屬于需排除的情形，故可用TTC法進(jìn)行評估。
4.2待評估物質(zhì)是否為潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物
該植物提取物為非潛在DNA反應(yīng)性致突變物/致癌物。
4.3識別出成分是否符合方法應(yīng)用要求
識別出成分為91.84%，超過80%，符合混合物的TTC使用技術(shù)要求。
4.4已知成分的風(fēng)險(xiǎn)評估
1）纖維素
纖維素，INCI名稱CELLULOSE，屬于一般認(rèn)為安全物質(zhì)（GRAS）。CIR評估結(jié)果顯示，使用濃度為0.002%~99%時，纖維素在駐留類化妝品中的實(shí)際使用都是安全的。該植物提取物中含有25.459%的纖維素，產(chǎn)品中含量為0. 25%。纖維素在本產(chǎn)品中的應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍之內(nèi)。
2）其他成分，分別采用適宜的評估方法進(jìn)行了安全評估，以確保使用安全，若含有結(jié)構(gòu)類似的成分，應(yīng)進(jìn)行劑量疊加進(jìn)行評估參照。
具體各成分評估內(nèi)容略。
4.5未知成分的風(fēng)險(xiǎn)評估
該植物提取物中未知成分的含量為8.16%，未測試遺傳毒性，保守起見，將未知成分當(dāng)作整體計(jì)算全身暴露量，與TTC最低的 Cramer III類別對比。未知成分在產(chǎn)品中的暴露量為：SED = 1.54×106×0.001×0.0816×1×1/60 = 2.09µg/kg/day，低于2.3µg/kg/day，故無系統(tǒng)毒性風(fēng)險(xiǎn)。未知成分在本產(chǎn)品中的應(yīng)用風(fēng)險(xiǎn)在可接受范圍之內(nèi)。
5.綜合評價
基于權(quán)重證據(jù)，包括該植物提取物的毒理學(xué)數(shù)據(jù)，已知成分的MoS值，使用歷史，CIR評估報(bào)告，證明了在當(dāng)前使用條件下，已知成分的風(fēng)險(xiǎn)可接受；該植物提取物中未知成分的全身暴露量SED低于Cramer III類別的閾值2.3µg/kg/day，證明在當(dāng)前使用條件下，未知成分的風(fēng)險(xiǎn)可接受。
綜上所述，對該植物提取物的局部毒性、遺傳毒性和TTC等信息進(jìn)行綜合評價，認(rèn)為該植物提取物在面霜中使用濃度為0.1%時，在正常、合理的及可預(yù)見的使用條件下，不會對人體健康產(chǎn)生危害。
6.參考文獻(xiàn)
略。
《毒理學(xué)關(guān)注閾值（TTC）方法應(yīng)用技術(shù)指南（征求意見稿）》起草說明
為引導(dǎo)化妝品行業(yè)提升化妝品安全評估能力和水平，規(guī)范開展化妝品安全評估工作，推進(jìn)化妝品安全評估制度有序?qū)嵤?，依?jù)《化妝品監(jiān)督管理?xiàng)l例》（以下簡稱《條例》）《化妝品注冊備案管理辦法》《化妝品安全評估技術(shù)導(dǎo)則（2021年版）》（以下簡稱《導(dǎo)則》）等相關(guān)法律法規(guī)和規(guī)范性文件要求，國家藥監(jiān)局化妝品監(jiān)管司組織中國食品藥品檢定研究院（以下稱中檢院）起草了《毒理學(xué)關(guān)注閾值（TTC）方法應(yīng)用技術(shù)指南（征求意見稿）》（以下簡稱《指南（征求意見稿）》）?，F(xiàn)將起草的有關(guān)情況說明如下：
一、必要性
化妝品安全評估是產(chǎn)品安全評價的有效手段，能有效地反映出化妝品的潛在風(fēng)險(xiǎn)。目前，美國、歐盟、日本等發(fā)達(dá)國家或地區(qū)，均運(yùn)用安全評估手段進(jìn)行化妝品安全性評價。為規(guī)范指導(dǎo)化妝品安全評估工作，國家藥監(jiān)局發(fā)布了《導(dǎo)則》的公告（2021年第51號），提供了化妝品產(chǎn)品安全評估報(bào)告的完整版和簡化版示例，并提出在2024年5月1日前，化妝品注冊人、備案人可以按照《導(dǎo)則》相關(guān)要求，提交簡化版產(chǎn)品安全評估報(bào)告。
隨著過渡期即將結(jié)束，行業(yè)反饋實(shí)施完整版安全評估壓力較大，存在安評能力不足、部分原料安全信息尤其是植物提取物的系統(tǒng)毒性信息不足以及國際化妝品動物禁令等困難。為推進(jìn)化妝品安全評估制度平穩(wěn)實(shí)施，提升行業(yè)安全評估相關(guān)技術(shù)的應(yīng)用能力，需要制訂發(fā)布更為全面、詳實(shí)的安全評估技術(shù)應(yīng)用指南，細(xì)化安全評估技術(shù)要求，明確方法的適用范圍和評估程序，并給出應(yīng)用示例，指導(dǎo)企業(yè)提升化妝品安全評估能力和水平。
二、制定原則
（一）依法依規(guī)原則?！吨改希ㄕ髑笠庖姼澹纷裱婪ㄒ酪?guī)原則，貫徹《條例》精神，落實(shí)《導(dǎo)則》和《公告》等相關(guān)文件要求，對相關(guān)技術(shù)問題和技術(shù)原則予以明確。
（二）科學(xué)可行原則性。在充分參考國內(nèi)外化妝品、化學(xué)品和食品相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)法規(guī)的基礎(chǔ)上，如歐盟消費(fèi)者委員會《化妝品成分測試及其安全性評估指南》、歐盟化學(xué)品管理局（ECHA）、歐盟食品安全局(EFSA)和美國環(huán)境保護(hù)局（US EPA）等相關(guān)指南文件，充分結(jié)合我國化妝品行業(yè)評估能力現(xiàn)狀，制訂《指南（征求意見稿）》。
（三）公開透明原則。起草過程中，堅(jiān)持“公開透明、廣泛參與”原則，多次組織監(jiān)管部門、技術(shù)專家、行業(yè)協(xié)會和企業(yè)召開專題會議進(jìn)行專題研究，同時根據(jù)意見反饋情況及時修改完善。
三、主要內(nèi)容
本《指南（征求意見稿）》共六部分，分別對TTC技術(shù)進(jìn)行概述、明確其適用范圍、術(shù)語和釋義、物質(zhì)分類、評估程序以及混合物應(yīng)用技術(shù)要求。同時，附錄中提供了評估流程圖、化學(xué)物質(zhì)和植物提取物的應(yīng)用示例。
四、需說明的問題
（一）關(guān)于適用范圍。本《指南（征求意見稿）》在參考國際相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)的基礎(chǔ)上，結(jié)合我國化妝品行業(yè)特點(diǎn)，基于風(fēng)險(xiǎn)管理原則，結(jié)合原料功能，對可能相對較高風(fēng)險(xiǎn)的幾類原料以及國際共識不適用的物質(zhì)，明確提出不適合應(yīng)用TTC方法。
（二 ）關(guān)于動態(tài)更新。相對于化學(xué)物質(zhì)，應(yīng)用TTC技術(shù)對混合物如植物提取物進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評估的研究報(bào)道較少。隨著工作的逐步開展，科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步和人們認(rèn)知水平的提高，《指南》將持續(xù)更新相關(guān)技術(shù)要求，提高風(fēng)險(xiǎn)特征鑒定的水平和預(yù)見性，使風(fēng)險(xiǎn)管理處于合理可控的水平。
京公網(wǎng)安備11010802046783號
