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30%的磷酸水溶液，通過與酸反應(yīng)和強(qiáng)力表面活性劑/洗滌劑的協(xié)同作用，展現(xiàn)出對不銹鋼及其他濕潤部件的高效清潔能力。相較于傳統(tǒng)的硝酸“鈍化”處理，該方法在清潔效果上更為顯著，且對材料的損傷程度更低，特別是對于低紫外波長日常應(yīng)用環(huán)境下的部件。值得注意的是，此磷酸清洗步驟并非直接用于鈍化，而是作為系統(tǒng)鈍化前清潔的重要首步。

一般而言，在離子色譜分析中對陽離子的檢測，或是除配備氧化方式的電化學(xué)檢測器外的其他應(yīng)用，通常不需要實(shí)施完整的鈍化系統(tǒng)?？紤]到真空脫氣機(jī)的存在（每個(gè)通道體積為8mL），在某些情況下，磷酸并非必須用于全部通道的清洗。然而，若計(jì)劃對所有四個(gè)通道使用磷酸清洗，推薦采用濕灌注方式，以4mL/min的流速對每個(gè)通道進(jìn)行8至10分鐘的清洗，以確保脫氣機(jī)的徹底清潔。完成此步驟后，強(qiáng)烈建議對管路進(jìn)行徹底沖洗，至少使用清水沖洗2至3次，以確保從溶劑過濾頭等關(guān)鍵部件中徹底清除磷酸殘留。

 

1、酸鈍化

HPLC系統(tǒng)內(nèi)部可能面臨的污染物多種多樣，包括人為觸摸、實(shí)驗(yàn)室化學(xué)環(huán)境暴露、零部件制造殘留，以及先前流動(dòng)相和樣品的殘留物。雖然流動(dòng)相可以逐步清洗系統(tǒng)，但某些釋放的雜質(zhì)會(huì)附著在色譜柱和檢測器濕潤表面，進(jìn)而影響系統(tǒng)整體性能。

 

磷酸清洗：

 

磷酸清洗是有效去除系統(tǒng)中有機(jī)雜質(zhì)的方法。其洗滌作用似乎比強(qiáng)有機(jī)溶劑更為高效和迅速。這一步驟應(yīng)在硝酸鈍化之前進(jìn)行。

 

硝酸鈍化：

 

硝酸鈍化主要是通過在不銹鋼表面形成一層均勻的氧化層，保護(hù)其免受腐蝕（如鹵化物、螯合劑等），并減少金屬離子進(jìn)入流動(dòng)相。

 

需進(jìn)行磷酸清洗和硝酸鈍化的應(yīng)用：

 

所有氨基酸分析系統(tǒng)

 

配備電化學(xué)檢測器的系統(tǒng)

 

分析無機(jī)陽離子，包括過渡金屬的系統(tǒng)

 

利用柱后添加衍生試劑或絡(luò)合樣品組分的系統(tǒng)

 

僅需進(jìn)行磷酸清洗的應(yīng)用：

 

在低pH和低紫外檢測波長下運(yùn)行的常規(guī)HPLC系統(tǒng)

 

需要高靈敏度性能的梯度紫外檢測系統(tǒng)

 

系統(tǒng)清洗指南：

 

執(zhí)行清洗步驟時(shí)，請務(wù)必采取適當(dāng)?shù)陌踩雷o(hù)措施。開始前，請取下色譜柱，用兩通或接頭替代。建議選擇254nm作為監(jiān)測的紫外波長。同時(shí)，請通過軟件或移除電纜的方式取消紫外檢測器的自動(dòng)回零功能。

 

2、沖洗步驟

 

1.甲醇沖洗：

 

使用甲醇徹底沖洗HPLC系統(tǒng)，確保泵的所有管路都等比例地流過甲醇。

 

2.水沖洗：

 

使用純水以同樣的方式?jīng)_洗系統(tǒng)，確保所有管路都被水徹底清洗。

 

3.磷酸水溶液沖洗：

 

導(dǎo)入約30% v/v的磷酸水溶液，并以1mL/min的流速?zèng)_洗系統(tǒng)約一個(gè)小時(shí)。

 

在此過程中，確?；顒?dòng)所有的閥門，如參比閥、進(jìn)樣閥和旁路閥等，以充分清洗整個(gè)系統(tǒng)。

 

4.重復(fù)或跳過硝酸沖洗：

 

如果需要，重復(fù)水沖洗步驟，并考慮使用6N硝酸(HNO?)進(jìn)行進(jìn)一步的清洗。

 

除非絕對必要，建議跳過硝酸鈍化步驟，因?yàn)橄跛崾菑?qiáng)紫外吸收溶液。

 

若選擇跳過，直接進(jìn)行第7步。

 

5.硝酸水溶液沖洗（若需要）：

 

如果選擇使用硝酸，導(dǎo)入約40%的6N硝酸水溶液，并以1mL/min的流速?zèng)_洗系統(tǒng)約一個(gè)小時(shí)。

 

6.再次水沖洗并檢查：

 

使用純水再次徹底沖洗系統(tǒng)，并仔細(xì)檢查是否有任何滲漏。

 

在沖洗過程中，持續(xù)活動(dòng)所有閥門，以確保系統(tǒng)被徹底清洗。

 

如果計(jì)劃使用低于270nm的紫外波長進(jìn)行檢測，請?zhí)貏e注意增加水沖洗的次數(shù)和新鮮度，以去除系統(tǒng)中的所有痕量硝酸根離子。

 

硝酸清洗后，可能需要幾天時(shí)間才能觀察到在低紫外波長下的基線穩(wěn)定。持續(xù)換水并保持耐心是關(guān)鍵。

 

7.恢復(fù)實(shí)驗(yàn)溶劑沖洗：

 

返回到甲醇沖洗階段，然后用實(shí)驗(yàn)所需的溶劑繼續(xù)沖洗系統(tǒng)。

 

8.恢復(fù)紫外檢測器功能：

 

通過軟件或接上電纜的方式，重新啟用紫外檢測器的自動(dòng)回零功能。