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一、項目介紹

代謝物檢測是現(xiàn)代生物化學(xué)分析領(lǐng)域中的重要組成部分，主要用于評估各種生物體（包括人體、動植物和微生物）在新陳代謝過程中產(chǎn)生的中間及最終產(chǎn)物。這些代謝物不僅是生理功能狀態(tài)的直接反映，還與環(huán)境污染物的毒性效應(yīng)、藥物療效及毒副作用、疾病診斷及預(yù)后評估等諸多方面密切相關(guān)。因此， 代謝物檢測在疾病診斷、藥物研發(fā)、營養(yǎng)科學(xué)、環(huán)境學(xué)、毒理學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮了重要作用。

二、檢測方法

目前，代謝物檢測主要依賴于高靈敏度和高分辨率的儀器分析技術(shù)，其中質(zhì)譜（MS）技術(shù)結(jié)合液相色譜（LC）/氣相色譜（GC）是最常用的方法，即LC-MS/GC-MS。這一組合能夠?qū)崿F(xiàn)對復(fù)雜生物樣本中多種代謝物的同時定性和定量分析。

1、測試原理：

高效液相色譜(HPLC)：以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（LC-MS）：樣品通過液相色譜分離后的各個組分依次進入質(zhì)譜檢測器，各組分在離子源被電離，產(chǎn)生帶有一定電荷、質(zhì)量數(shù)不同的離子。不同離子在電磁場中的運動行為不同，采用質(zhì)量分析器按不同質(zhì)荷比（m/z）把離子分開，得到依質(zhì)荷比順序排列的質(zhì)譜圖。通過對質(zhì)譜圖的分析處理，可以得到樣品的定性和定量結(jié)果。

圖1. LC-MS流程示意圖

氣相色譜(GC)：是一種常見的分離和分析技術(shù)，主要用于檢測和定量混合氣體或揮發(fā)性有機物的組成。其工作原理是利用樣品中各組分在流動的惰性氣體（如氮氣或氦氣）攜帶下，通過固定相（色譜柱）時因分配系數(shù)不同而實現(xiàn)分離，然后通過檢測器對各個組分進行定性和定量分析。

氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)：是一種將氣相色譜與質(zhì)譜兩種分析技術(shù)相結(jié)合的高端檢測技術(shù)。在該系統(tǒng)中，樣品首先通過氣相色譜進行分離，根據(jù)各組分在色譜柱上的保留時間差異將其分離成單一組分；隨后，這些分離出的單一組分逐個進入質(zhì)譜儀進行離子化和質(zhì)量分析，從而得到每個組分的精確質(zhì)量和分子結(jié)構(gòu)信息。

圖2. GC-MS流程示意圖

2、應(yīng)用范圍：

在樣本應(yīng)用上，動物血漿、組織、細胞，植物的根、莖、葉、花、種子、果實，以及微生物發(fā)酵液等樣本的大部分代謝物不易揮發(fā)、較好電離，常用LC-MS分析。GC-MS更多用于揮發(fā)性物質(zhì)、熱穩(wěn)定性化合物的分析鑒定，如短鏈脂肪酸、芳香烴、風(fēng)味類揮發(fā)物等。

三、樣本準(zhǔn)備

1.樣本量要求

  表1：不同樣本樣本量要求

2. 樣品管上名稱和表中樣品編號務(wù)必保持一致，后續(xù)分析報告按樣品編號輸出。

3. 具體樣品量要求請和e測試工作人員確認(rèn)。

四、結(jié)果展示

表2：脂肪酸測試結(jié)果   

五、常見問題

1.GC-MS可以測試多大分子量的樣本？

GC-MS一般適用于分子量500以下，沸點400℃以下，揮發(fā)性或半揮發(fā)性，熱穩(wěn)定性的化合物，大分子測不了。

2.液質(zhì)是否可以測三級結(jié)構(gòu)？

一般只有離子阱質(zhì)譜才可以達到三級，但是二級譜也是可以做結(jié)構(gòu)確認(rèn)的。如果只測質(zhì)譜，不管哪一種，都只是在推測結(jié)構(gòu)，并不能準(zhǔn)確判定。