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在科研探索的征途中，高效液相色譜儀（HPLC）作為實驗室的得力助手，其穩(wěn)定運行直接關(guān)系到實驗數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性與科研項目的進(jìn)展。今天，我將結(jié)合個人經(jīng)驗，深入分享幾點關(guān)于HPLC維護(hù)的關(guān)鍵心得，旨在通過實際案例增強(qiáng)內(nèi)容的邏輯性和可讀性，助力各位同仁更好地掌握這一精密儀器的日常保養(yǎng)與故障排除技巧。

1. 濾頭的清洗藝術(shù)：預(yù)防堵塞，確保流暢

在HPLC的日常使用中，濾頭的清潔往往被忽視，卻直接關(guān)系到流動相的質(zhì)量與實驗的穩(wěn)定性。記得有一次，實驗結(jié)果顯示出峰時間異常，排查后發(fā)現(xiàn)竟是濾頭堵塞所致。這提醒我們，盡管產(chǎn)品手冊強(qiáng)調(diào)需定期更換并過濾流動相，實際操作中卻容易疏忽這一環(huán)節(jié)。特別是在高溫環(huán)境下，濾頭堵塞更為常見。

優(yōu)化策略：我采用10%稀硝酸進(jìn)行超聲清洗10分鐘，有效去除附著物，隨后用純水徹底沖洗，確保無殘留。建議設(shè)定定期清洗計劃，特別是當(dāng)流動相中含有鹽分時，更應(yīng)增加清洗頻率。此外，每次更換流動相前，都應(yīng)檢查其過濾狀態(tài)，避免隔夜水直接使用。

2.泵的維護(hù)：壓力穩(wěn)的秘訣

當(dāng)實驗過程中發(fā)現(xiàn)壓力過高、波動較大時，那很有可能是泵的單向閥出問題了。我一般首先找一張干凈的A4紙，用扳手小心的把單向閥取出來放上面，注意單向閥的方向，一般廠家都會有個標(biāo)記，注意不要弄反方向。

取出來之后用洗耳球吹一下，正常的情況應(yīng)該是一邊可以吹透一邊不行，否則就是有問題了。清洗一般用甲醇超聲即可，要是問題嚴(yán)重的話可以先用5%稀硝酸超聲10min，接著用純水清洗干凈并超聲10min，最后再用甲醇超聲10min。

注意稀硝酸超聲后一定要用純水洗凈超聲才可用甲醇超聲。單向閥安裝之后要注意監(jiān)測是否漏液，壓力是否正常。清洗瓶中的液體要經(jīng)常查看和更換，若液體不夠會影響泵的清洗和儀器的自檢，實驗室的戴安U3000就有一次因為清洗瓶中異丙醇不夠，一直不能通過自檢，等到發(fā)現(xiàn)之后已經(jīng)浪費了大半天的時間。

3. 檢測池的深度清洗

檢測池一般不用常拆，我之所有拆的經(jīng)驗是因為樣品把管路堵了，系統(tǒng)壓力很高，通過一系列的排除發(fā)現(xiàn)其他地方?jīng)]有問題，于是把柱子卸掉，用注射器從流通池進(jìn)口打溶劑，發(fā)現(xiàn)溶劑不能從出口出來，于是確定檢測池這塊有問題，叫工程師太費勁就自己拆了洗。

不同型號液相的具體構(gòu)造不一樣，所以建議大家在動手之間把說明書多研究幾遍，拆的時候同樣準(zhǔn)備一張干凈A4紙，兩個燒杯一大一小，里面放好甲醇。

依利特的檢測池比較容易拆開，把如上圖兩個螺絲小心擰松，就可以把檢測池拿出來，如下圖：

再小心把中間的螺絲擰松就可以完全把檢測池拿出來了，因為之間確定檢測池管路堵了，但是不確定是進(jìn)口還是出口，所以接下來要把管路分別卸下來，注意用標(biāo)記筆標(biāo)明進(jìn)出口的位置，以免安裝的時候弄混淆。

如下圖，朝上的拍出來的兩個孔是接檢測器電路的，我們在后續(xù)安裝完畢后務(wù)必保持這兩個位置的干燥，而沒有拍出來的兩個連接管路的孔是檢測池的進(jìn)出口，我們需要標(biāo)記。

其實初次拆開看到管路在檢測器上有繞圈我是充滿了疑問的，如下圖，其實這是進(jìn)口管，為了確保被分析物質(zhì)進(jìn)入檢測池的時候和檢測池里面的溫度環(huán)境基本一致，廠家就會用到如此的設(shè)計，把進(jìn)口管路在檢測池上纏繞幾圈，當(dāng)我們拆的時候按照管路直接拆開即可。

這種耐高壓的不銹鋼連接管口徑很細(xì)，一般堵了就難以再生了，不過也正是因為口徑很細(xì)，堵的位置一般會比較靠前，所以通常的做法就是先剪掉5~10cm再從注射器試試是否依舊堵塞，若沒法辦就只能換管路了。

借著這個機(jī)會還可以把檢測池清洗一下，待把管路卸去后直接把整個檢測池放進(jìn)甲醇超聲，若有需要還可以把檢測池拆開對立面進(jìn)行超聲清洗。

但是進(jìn)行這個步驟要注意不要在石英玻璃上留下刻痕，而且每個石英玻璃都有一個墊圈，清洗后注意要記得安裝否則會漏液，還有安裝的時候螺絲不要太緊，記住之前打開時候的力道，剛好就好，否則石英玻璃會被壓碎。當(dāng)對上述各部件完成清洗之后就可以進(jìn)行復(fù)原安裝了，要記得檢測池后面兩個接電路的孔要保持干燥，可以用吹風(fēng)吹干。

另外由于出口管直接排廢液，我當(dāng)時裝的時候就用了比較短的（大概10cm）不銹鋼管，然后隨便接上一根管路到廢液桶，結(jié)果出了如下問題：梯度洗脫的時候，當(dāng)甲醇和水的比例跑到60%左右的時候，會出現(xiàn)一系列的有規(guī)律的大峰，明顯不是我的樣品峰。

由于之前做制備液相改短管路的時候遇到過，所以我很快的判斷這是因為我的出口管太短不耐壓所致。由于手上沒有多余的不銹鋼管所以我用了小口徑的PEEK管代替，為了確保足夠耐壓我用了足足50cm，安裝完畢，再次檢測，儀器恢復(fù)正常。

其實在做制備液相的時候為了提高組分接收的純度，我們經(jīng)常會采取改短檢測器出口管路，但是這種做法帶來的結(jié)果就是容易產(chǎn)生氣泡，反而影響實驗結(jié)果。所以大家在更換檢測池出口管路的時候盡量維持管路原來的長度，要想減短可以用一個備壓管。

結(jié)語

HPLC出問題是正常的，每次遇到問題我總這么想，這么貴重的儀器只要按照說明做，一般的拆裝應(yīng)該不會對儀器造成硬傷，所以自己經(jīng)常動手，以上的一點心得拿出來分享希望對大家有幫助，謝謝各位的關(guān)注！