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本期有小伙伴提問：怎樣培養(yǎng)細(xì)胞才能使其避免被細(xì)菌污染，又可以保證其處于5%二氧化碳環(huán)境呢？

細(xì)胞培養(yǎng)的成功與否直接影響著實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。通過get一些簡單而有效的小竅門，我們可以減少細(xì)胞在培養(yǎng)過程中被污染的風(fēng)險(xiǎn)，保證細(xì)胞健康生長。

一、  無菌操作和器具清潔

無菌操作和良好的清潔習(xí)慣，是細(xì)胞培養(yǎng)中非常重要的一環(huán)。在進(jìn)行任何操作前，我們都要確保在無菌條件下進(jìn)行。細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)所用的器皿，包括培養(yǎng)瓶、培養(yǎng)皿等等，都要對(duì)著酒精燈的火焰打開開口，以減少細(xì)菌的進(jìn)入。細(xì)胞培養(yǎng)使用的試劑，在酒精擦拭試劑儲(chǔ)存器皿后帶入超凈臺(tái)，同時(shí)要盡量避免試劑與試劑之間的交叉污染。另外，定期清潔和消毒培養(yǎng)箱、培養(yǎng)室和工作臺(tái)等區(qū)域也是非常重要的。

二、  定期更換培養(yǎng)基

定期更換培養(yǎng)基是維持細(xì)胞健康生長的關(guān)鍵之一。新鮮的培養(yǎng)基可以提供細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)，同時(shí)也可以減少細(xì)菌等污染物的積累。定期更換培養(yǎng)基有助于保持培養(yǎng)環(huán)境的清潔和穩(wěn)定，幫助維持細(xì)胞的健康生長狀態(tài)。

三、避免過度開啟培養(yǎng)箱

在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中應(yīng)盡量少開培養(yǎng)箱，這樣能保持環(huán)境穩(wěn)定，減少細(xì)菌進(jìn)入的風(fēng)險(xiǎn)。另外，將細(xì)胞從培養(yǎng)箱中取出進(jìn)行操作時(shí)，確實(shí)應(yīng)該盡量減少操作時(shí)間，以避免細(xì)胞受到外界環(huán)境的不利影響。長時(shí)間暴露在室溫條件下，可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞受到溫度變化和二氧化碳濃度變化的影響，從而影響細(xì)胞的狀態(tài)和生存能力。

四、加入適量的NaHCO3

在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，維持適當(dāng)?shù)腃O2濃度對(duì)于細(xì)胞生長和繁殖是非常重要的，CO2濃度與維持培養(yǎng)液的pH有直接關(guān)系。隨著CO2釋放量增多，培養(yǎng)基會(huì)變酸，我們可以通過添加適量的NaHCO3，來幫助調(diào)節(jié)培養(yǎng)基中的CO2濃度，從而維持合適的pH值。如果培養(yǎng)箱中CO2的濃度設(shè)定在5%，那么我們通常需要向培養(yǎng)液中加入1.97 g/L的NaHCO3。