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嘉峪檢測網(wǎng) 2024-09-05 20:37
摘 要： 建立了頂空氣相色譜法同時測定10種兒童藥品中甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷、甲苯8種有機(jī)溶劑殘留量。采用Agilent DB-624毛細(xì)管色譜柱（60 m×0.53 mm，3 μm）分離，程序升溫，進(jìn)樣口溫度為200 ℃，氫火焰離子化檢測器溫度為250 ℃，頂空平衡溫度為85 ℃，平衡時間為20 min，分流比為10∶1。結(jié)果表明，8種有機(jī)溶劑能夠有效分離，在各自的質(zhì)量濃度范圍內(nèi)與色譜峰面積線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)不小于0.998；樣品的平均加標(biāo)回收率為95.12%～101.92%，測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.44%～3.33%（n=6），檢出限為0.01～0.07 μg/mL。18批次樣品中有11批次檢出乙醇，檢出率61.11%，其他成分均未檢出。該方法操作簡單、靈敏度高、快速有效，可以為兒童藥中有機(jī)溶劑的殘留測定提供依據(jù)。
關(guān)鍵詞： 頂空氣相色譜法； 頂空進(jìn)樣； 殘留溶劑； 兒童藥品； 乙醇
殘留溶劑是指在藥品生產(chǎn)過程中使用的，但未能完全去除的有機(jī)溶劑。根據(jù)其危害程度，殘留溶劑可以分為一、二、三類，并在《中華人民共和國藥典》2020年版通則0861中有相關(guān)的限度要求。一類溶劑屬于或極度疑似為人體致癌物或是環(huán)境危害物，二類溶劑屬于可導(dǎo)致不可逆毒性的溶劑或?qū)儆诜沁z傳性毒性動物致癌物質(zhì)，三類溶劑則屬于低潛在毒性溶劑[1?2]。由此可見，藥品中殘留的有機(jī)溶劑是否能得到合理有效的控制，直接關(guān)系到藥品的質(zhì)量可控性與安全性[3]。然而，殘留溶劑的控制和檢測存在一定的難點(diǎn)，因?yàn)椴煌幤?、不同企業(yè)對于同種藥品的生產(chǎn)過程中使用的有機(jī)溶劑根據(jù)實(shí)際情況可能不盡相同，所以無法建立統(tǒng)一的測定方法[4]。目前常見的殘留溶劑測定方法有氣相色譜法[5?8]、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法[9?14]等，該方法都能同時對一種或多種溶劑進(jìn)行測定，但是卻未曾有專門針對兒童藥品進(jìn)行測定的報(bào)道。兒童藥品中的有機(jī)溶劑可能是由原輔料帶來，也有可能是由藥品包裝材料中帶來，藥物的基質(zhì)比較復(fù)雜。考慮到甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷和甲苯等8種溶劑在藥品合成或藥品生產(chǎn)中使用頻率較高，成分的沸點(diǎn)較低，筆者建立頂空進(jìn)樣氣相色譜法，對12種常見的兒童藥品進(jìn)行有機(jī)溶劑殘留的測定，以確保兒童藥品的安全、有效和質(zhì)量可控。
1、 實(shí)驗(yàn)部分
1.1 主要儀器與試劑
氣相色譜儀：GC-2010型，配FID 檢測器，日本島津公司。
頂空進(jìn)樣器：HSS 8650型，意大利DANI公司。
電子天平：XS205DU型，感量為0.01 mg，瑞士梅特勒-托利多公司。
二甲基亞砜：色譜純，批號2021603，天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所。
甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷、甲苯：均為色譜純，德國默克集團(tuán)。
健兒消食口服液、健脾糖漿、小兒止咳糖漿、小兒五維賴氨酸糖漿、小兒感冒顆粒、小兒退熱口服液、五維他口服溶液、小兒咳喘靈口服液、小兒氨酚黃那敏顆粒、小兒化痰止咳顆粒、小兒咳喘靈顆粒、復(fù)方甘草口服溶液，以上均為南寧市售藥品。
1.2 色譜條件
色譜柱：Agilent DB-624石英毛細(xì)管柱(60 m×0.53 mm，3 μm，美國安捷倫科技有限公司)；柱溫：程序升溫，起始溫度為40 ℃，保持8 min，以8 ℃/min升溫至120 ℃，保持6 min，再以60 ℃/min升溫至200 ℃，保持5 min；進(jìn)樣口溫度：200 ℃；檢測器溫度：250 ℃；載氣：氮?dú)?，流量?.5 mL/min；分流比：10∶1；頂空平衡時間：20 min；頂空平衡溫度：85 ℃；進(jìn)樣時間：0.5 min。
1.3 溶液配制
單一對照品儲備液：分別精密稱取甲醇375 mg、乙醇625 mg、乙酸乙酯625 mg、丙酮625 mg、異丙醇625 mg、四氫呋喃90 mg、正庚烷625 mg、甲苯112 mg，分別置于不同的10 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜使溶解并稀釋至標(biāo)線，搖勻，配制成質(zhì)量濃度分別為37.5、62.5、62.5、62.5、62.5、9.0、62.5、11.2 mg/mL的單一對照品儲備液。
混合對照品儲備液：分別精密量取單一對照品儲備液各0.1 mL，置于同一只100 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標(biāo)線，搖勻。
混合對照品溶液：精密量取混合對照品儲備液2 mL，置于10 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標(biāo)線，搖勻。精密移取2 mL置于頂空瓶中，加蓋密封。
空白溶液：精密量取二甲基亞砜2 mL于20 mL頂空瓶中，加蓋密封。
系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：精密量取混合對照品儲備液0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.0 mL，分別置于不同的10 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標(biāo)線，搖勻，即得系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
樣品溶液：若待測的藥品為液體制劑，則精密量取0.1 mL置于20 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜稀釋至標(biāo)線，搖勻，精密量取2 mL，置于頂空瓶中，加蓋密封；若待測的藥品為固體制劑，則精密稱取0.1 g，置于20 mL容量瓶中，加入二甲基亞砜使溶解稀釋至標(biāo)線，搖勻，精密量取2 mL，置于頂空瓶中，加蓋密封。
2、 結(jié)果與討論
2.1 色譜柱的選擇
考察了HP-FFAP (強(qiáng)極性色譜柱)、DB-624 (中等極性色譜柱)、DB-5 (弱極性色譜柱)三種不同極性的石英毛細(xì)管柱對8種溶劑測定結(jié)果的影響。結(jié)果表明，DB-624型色譜柱的分離效果和理論塔板數(shù)最好，靈敏度最高，因此選擇DB-624色譜柱作為工作色譜柱。
2.2 溶劑的選擇
考察了二甲基亞砜和N，N-二甲基甲酰胺作為溶劑時對測定結(jié)果的影響。在同一色譜條件下，當(dāng)使用二甲基亞砜作為溶劑時，8種溶劑的色譜峰面積更大，理論塔板數(shù)更高，各成分之間的分離效果更好，因此選擇二甲基亞砜作為溶解用溶劑。
2.3 頂空平衡溫度、平衡時間、柱流量的確定
考察了不同平衡溫度(75、80、85、90 ℃)平衡20 min對測定結(jié)果的影響，發(fā)現(xiàn)隨著溫度升高，殘留溶劑的色譜峰面積逐漸變大，但考慮到平衡溫度過高可能導(dǎo)致待測組分的不穩(wěn)定，所以最終選擇平衡溫度為85 ℃；同時考察了在85 ℃下不同平衡時間(10、20、25、30、35 min)對測定結(jié)果的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)在20 min時各成分的色譜峰面積最大，故選擇平衡時間為20 min；考察了不同色譜柱流量(2.0、2.5、3.0 mL/min) 8種溶劑的出峰情況，發(fā)現(xiàn)柱流量越高，出峰時間越快，當(dāng)柱流量為3.0 mL/min時，乙酸乙酯峰與丙酮峰無法達(dá)到基線分離。當(dāng)柱流量為2.0 mL/min時，各成分出峰時間延長，乙酸乙酯與丙酮在柱溫為120 ℃時出峰，導(dǎo)致兩者無法達(dá)到有效分離，因此最終選擇色譜柱流量分別為2.5 mL/min。
2.4 專屬性試驗(yàn)
在1.2色譜條件下，分別取空白溶劑、混合對照品溶液、加標(biāo)樣品溶液依次進(jìn)樣分析，色譜圖如圖1所示。從圖1中可以看出，8種溶劑色譜峰之間的分離度均大于2.0，空白溶劑對測定無干擾。該方法的專屬性符合要求。
圖1 空白溶劑、混合對照品溶液、加標(biāo)樣品溶液氣相色譜圖
Fig. 1 Chromatograms of blank sample solution，standard solution and spiked sample solution
2.5 線性關(guān)系、檢出限及定量限
精密量取系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液2 mL，置于頂空瓶中，密封，進(jìn)樣測定，記錄色譜峰面積，以各待測成分的質(zhì)量濃度(x)為橫坐標(biāo)，對應(yīng)的色譜峰面積(y)為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。取混合對照品儲備液，用二甲基亞砜逐級稀釋，測定并記錄色譜峰面積，以信噪比為3對應(yīng)的溶液質(zhì)量濃度作為方法檢出限，以信噪比為10對應(yīng)的溶液質(zhì)量濃度作為定量限。8 種溶劑的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、定量限和檢出限見表1。
表1 8種溶劑質(zhì)量濃度的線性范圍、線性方程、相關(guān)系數(shù)、檢出限和定量限
Tab. 1 Linear ranges of the mass concentration，linear equations，correlation coefficients，limits of detection，and limits of quantification of the eight solvents
2.6 樣品加標(biāo)回收與精密度試驗(yàn)
取小兒止咳糖漿樣品0.1 mL，置于20 mL容量瓶中，精密加入混合對照品儲備液0.4 mL，再加入二甲基亞砜稀釋至標(biāo)線，搖勻，精密量取2.0 mL，置于頂空瓶中，加蓋密封，搖勻，在1.2色譜條件下進(jìn)樣測定，平行制備6份，記錄色譜峰面積并計(jì)算各種溶劑的平均回收率及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差。樣品加標(biāo)回收與精密度試驗(yàn)結(jié)果見表2。由表2可知，8種溶劑的平均回收率為95.12%～101.92%，測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.44%～3.33%(n=6)。
表2 樣品加標(biāo)回收與精密度試驗(yàn)結(jié)果
Tab. 2 The results of sample recovery and precision test
3、 結(jié)語
建立了頂空-氣相色譜法同時測定兒童藥品中8種有機(jī)溶劑(甲醇、乙醇、乙酸乙酯、丙酮、異丙醇、四氫呋喃、正庚烷、甲苯)的殘留。優(yōu)化了色譜柱型號、頂空平衡時間、平衡溫度以及色譜柱流量等參數(shù)條件，該方法操作簡單、靈敏度高、重現(xiàn)性好，可用于兒童藥品中多種溶劑殘留量的定量檢測，為保障兒童藥品的質(zhì)量安全提供技術(shù)支持。
參考文獻(xiàn)：
1 章澤恒，陸才洋，龍慧玲，等. HS-GC法測定利格列汀的7種殘留溶劑［J］.海峽藥學(xué)，2023，35（8）：33.
ZHANG Zeheng，LU Caiyang，LONG Huiling，et al. Determination of 7 residual solvents in ligretine by HS-GC［J］. Strait Pharmaceutical Journal，2023，35（8）：33.
2 朱鳳昌，崇小萌，楊青，等. ICH Q3C殘留溶劑指導(dǎo)原則與中國藥典殘留溶劑控制略［J］.中國醫(yī)藥工業(yè)雜志，2021，52（9）：1 259.
ZHU Fengchang，CHONG Xiaomeng，YANG Qing，et al. ICH Q3C guideline and chinese pharmacopoeia control strategy for residual solvents［J］. Chinese Journal of Pharmaceuticals，2021，52（9）：1 259.
3 顧曉風(fēng)，唐倩倩.頂空氣相色譜法測定吡侖帕奈中5種有機(jī)溶劑［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2023，32（7）：74.
GU Xiaofeng，TANG Qianqian. Determination of five organic solvents in perampanel by headspace gas chromatography［J］. Chemical Analysis and Meterage，2023，32（7）：74.
4 劉穎，王志軍，董欣，等.藥品中殘留溶劑的控制理念及測定方法的應(yīng)用［J］.中國新藥雜志，2017，26（17）：2 040.
LIU Ying，WANG Zhijun，DONG Xin，et al. Progress in the control concepts and determination methods of residual solvents in pharmaceuticals［J］. Chinese Journal of New Drugs，2017，26（17）：2 040.
5 王春霞，徐艷梅，蓋成，等.氣相色譜法測定恩曲他濱中5種有機(jī)溶劑殘留量［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2022，31（6）：36.
WANG Chunxia，XU Yanmei，GAI Cheng，et al. Determination of 5 residual organic solvents in entrutabine by gas chromatography［J］. Chemical Analysis and Meterage，2022，31（6）：36.
6 黃祝剛，李亞囡，孫濱濱，等.頂空-氣相色譜法測定葡萄糖氯化鈉注射液中12種溶劑殘留量［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2020，29（3）：68.
HUANG Zhugang，LI Yanan，SUN Binbin，et al. Determination of 12 solvents residues in glucose sodium chloride injection by headspace-gas chromatography［J］. Chemical Analysis and Meterage，2020，29（3）：68.
7 顏立毅，鄭麗斯.頂空氣相色譜法測定食用植物油中苯、甲苯和二甲苯［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2023，32（9）：84.
YAN Liyi，ZHENG Lisi. Determination of benzene，toluene and xylene in edible vegetable oil by headspace gas chromatography［J］. Chemical Analysis and Meterage，2023，32（9）：84.
8 王文昌，張曉芳，吳娟娟，等.氣相色譜法測定7-氨基-3-（丙烯-1-基）-3-頭孢烯-4-羧酸中溶劑殘留量［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2023，32（7）：21.
WANG Wenchang，ZHANG Xiaofang，WU Juanjuan，et al. Determinition of solvents residues in 7-amino-3-（propen-1-yl）-3-cefenm-4-carboxylic acid by gas chromatography［J］. Chemical Analysis and Meterage，2023，32（7）：21.
9 付蒙，陳曉莉，周姝，等.頂空氣相色譜-質(zhì)譜法測定藥品包裝材料中40種有機(jī)溶劑殘留量［J］.中國藥品標(biāo)準(zhǔn)，2023，24（1）：96.
FU Meng，CHEN Xiaoli，ZHOU Zhu，et al. Simultaneous determination of 40 kinds of residual organic solvents in pharmaceutical packaging materials by headspace gas chromatography-mass spectrometry［J］. Drug Standards of China，2023，24（1）：96.
10 胡琳珊.吹掃捕集氣相色譜-質(zhì)譜法測定水中59種揮發(fā)性有機(jī)物［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2022，31（7）：33.
HU Linshan. Determination of 59 volatile organic compounds in water by gas chromatography-mass spectrometry with purge and trap sampling［J］. Chemical Analysis and Meterage，2022，31（7）：33.
11 李創(chuàng)，潘揚(yáng)昌，韋英亮.氣相色譜-質(zhì)譜法測定灌溉水中16種痕量多環(huán)芳烴［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2023，32（12）：23.
LI Chuang，PANG Yangchang，WEI Yingliang. Determination of 16 trace polycyclic aromatic hydrocarbons in irrigation water by gas chromatography-mass spectrometry［J］. Chemical Analysis and Meterage，2023，32（12）：23.
12 方正杰，劉家榮，孫滕，等.凝膠滲透色譜/氣相色譜-質(zhì)譜法測定塑料玩具中16種多環(huán)芳烴［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2023，32（8）：20.
FANG Zhengjie，LIU Jiarong，SUN Teng，et al. Determination of 16 polycyclic aromatic hydrocarbons in plastic toys by gel permeation chromatography-gas chromatography-mass spectro-metry［J］. Chemical Analysis and Meterage，2023，32（8）：20.
13 劉淼，孫欣陽，尹燕敏.超聲波萃取-氣相色譜-質(zhì)譜法測定環(huán)境空氣顆粒物中的半揮發(fā)性有機(jī)物［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2021，30（11）：27.
LIU Miao，SUN Xinyang，YIN Yanmin. Determination of semi-volatile organic compounds in ambient air particulate matter by gas chromatography-mass spectrometry after ultrasonic extra-ction［J］. Chemical Analysis and Meterage，2021，30（11）：27.
14 管悅，泮燕媚.液液萃取氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法測定含油半固體食品中19種鄰苯二甲酸酯類化合物［J］.化學(xué)分析計(jì)量，2024，33（4）：90.
GUAN Yue，PAN Yanmei. Determination of 19 phthalic acid esters in oily semi-solid food by liquid-liquid extraction combined with GC-MS/MS［J］. Chemical Analysis and Meterage，2024，33（4）：90.
引用本文： 鄭美玲，張明麗，胡欣怡，等. 頂空氣相色譜法同時測定兒童藥品中8種殘留溶劑［J］. 化學(xué)分析計(jì)量，2024，33（7）：18. (ZHENG Meiling, ZHANG Mingli, HU Xinyi, et al. Simultaneous determination of 8 residual solvents in children's drugs by headspace gas chromatography[J]. Chemical Analysis and Meterage, 2024, 33(7): 18.)
來源：化學(xué)分析計(jì)量
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