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【問】HPLC柱前衍生和柱后衍生的相關問題？1）為什么要衍生？2）衍生化的分類？3）進行衍生，適用的化合物有哪些？4）進行衍生化的要求有哪些？5）柱前衍生和柱后衍生的優(yōu)缺點？

【答】色譜技術中的化學衍生法系指在色譜過程中用特殊的化學試劑（一般稱為衍生化試劑或標記試劑）使樣品成分轉(zhuǎn)變相應的衍生物之后進行分離檢測或進行檢測的方法。目的為：1．將紫外—可見強吸收功能基團引入被檢測對象或?qū)⑵滢D(zhuǎn)變?yōu)闊晒庋苌?，以提高檢測靈敏度；2提高對分析樣品的分離和選擇性。

從是否與HPLC系統(tǒng)聯(lián)機的角度，化學衍生法分為在線on line）與離線∣Off line）兩種。從發(fā)生衍生化的場合，分為柱前衍生法pre-columnderivatization）與柱后衍生法（post-columnderivatization）兩種。目前，在HPLC中，以離線的柱前衍生法（簡稱柱前衍生法）與在線的柱后衍生法（簡稱柱后衍生法）使用居多。