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嘉峪檢測(cè)網(wǎng) 2024-11-10 11:19
在過(guò)去,細(xì)胞培養(yǎng)用的是天然培養(yǎng)基,就是一些組織的提取物或體液,因?yàn)樗鼇?lái)自體內(nèi),各種參數(shù)都和體內(nèi)環(huán)境比較像,像美國(guó)科學(xué)家Ross Granvlle Harrison,他就是利用懸滴法將一只青蛙胚胎的神經(jīng)細(xì)胞種植在青蛙的淋巴液里來(lái)完成短時(shí)間的培養(yǎng)和觀察。
但顯然這樣的培養(yǎng)基批量制備的難度大,且無(wú)法做到批次穩(wěn)定,隨著細(xì)胞培養(yǎng)研究進(jìn)入第二個(gè)歷史階段,一批可在體外增殖的細(xì)胞系被建立起來(lái)后,質(zhì)量更穩(wěn)定、生產(chǎn)效率更高的培養(yǎng)基需求就越來(lái)越高了。
此時(shí),就出現(xiàn)了化學(xué)成分明確的培養(yǎng)基,例如MEM,一種由細(xì)胞生長(zhǎng)所需要的最基礎(chǔ)必須的、穩(wěn)定的數(shù)種化學(xué)成分按照一定比例配制而成,再在使用前,往里面添加一些不穩(wěn)定其他必要成分,例如血清、特定的氨基酸等,以此來(lái)支持細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖。
而隨著細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)的成熟,對(duì)其研究的要求越來(lái)越高,越來(lái)越多種類的培養(yǎng)基相繼問(wèn)世,甚至有不少培養(yǎng)基就是為了培養(yǎng)某種特定細(xì)胞而設(shè)計(jì)的。這些培養(yǎng)基的最終演化方向就是要盡可能的高度集成化,盡可能降低那些不可控因素,例如血清。
工業(yè)化的細(xì)胞生產(chǎn)中,就常用到無(wú)血清培養(yǎng)基,因?yàn)檠灞旧韥?lái)自動(dòng)物,而動(dòng)物血清的批次差異是必然存在的,這對(duì)那些需要高度穩(wěn)定的工業(yè)化生產(chǎn)來(lái)說(shuō)是不可控的質(zhì)量風(fēng)險(xiǎn)。
目前,商品化的培養(yǎng)基有很種,其成分配方也是公開且標(biāo)準(zhǔn)化的,這些培養(yǎng)基又以DMEM、MEM和RPMI1640的應(yīng)用最為廣泛。
MEM,也叫低限量必須培養(yǎng)基,是從基礎(chǔ)培養(yǎng)基BME發(fā)展而來(lái)的,它僅僅含有必須氨基酸、水溶性維生素、無(wú)機(jī)鹽。
DMEM是一種改良型的BME培養(yǎng)基,其氨基酸的濃度是MEM的2倍,微生物濃度是MEM的4倍,用于緩沖pH的鹽離子例如碳酸氫根離子的濃度也更多,DMEM最初設(shè)計(jì)初衷是為了小鼠成纖維細(xì)胞的培養(yǎng)。
RPMI1640是為淋巴樣細(xì)胞的培養(yǎng)而設(shè)計(jì)的,其成分里缺乏鈣離子,當(dāng)然,拿RPMI1640培養(yǎng)貼壁細(xì)胞也不是不行,只是其更適合懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞。
此外,F(xiàn)12、M199也是非常常見的培養(yǎng)基。
F12培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分種類比DMEM要多,但其營(yíng)養(yǎng)成分的濃度比較低,適合克隆化的培養(yǎng),DMEM則比較適合高細(xì)胞密度、大量增殖細(xì)胞的培養(yǎng)需求。
M199的話則是一種含有豐富、全面維生素的改良型培養(yǎng)基,除了水溶性維生素外,也同時(shí)包括了所有的脂溶性維生素。
我們?cè)陴B(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候沒有必要去記住更沒有必要背這些培養(yǎng)基的特點(diǎn),對(duì)其有個(gè)大致了解即可。因?yàn)槿绻沭B(yǎng)的是細(xì)胞系,通常是可以沿用上一屆或前輩培養(yǎng)該細(xì)胞的培養(yǎng)條件來(lái)繼續(xù)養(yǎng)的,如果是買商品化的細(xì)胞,那就遵照企業(yè)提供的培養(yǎng)條件來(lái)養(yǎng)。
了解培養(yǎng)基的基本特點(diǎn),是為了在培養(yǎng)中靈活變通,不至于換個(gè)條件就不知所措。
這里還截取了一份不同細(xì)胞的建議培養(yǎng)基和血清列表。


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