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如果流動相脫氣不理想或儀器本身連接管路存在問題，流路中將形成氣泡并引發(fā)一系列問題： 

1. 組分峰面積；

2. 改變峰形；

3. 形成尖峰或鋸齒狀噪聲；

4. 出現(xiàn)鬼峰 ；基線漂移波動增大；

5. 紫外檢測特殊條件下增加噪聲和基線漂移；

6. 降低熒光強度；

7. 溶解氧可能氧化樣品組分和（或）流動相及固定相組分，使檢測失真。

總之，脫氣的目的有兩個：

1. 防止由氣泡的產(chǎn)生引起的故障；

2. 防止由溶解氣體量的變動引起的測定不穩(wěn)定性的發(fā)生。

那么，氣泡是怎么形成的呢？

一、氣泡的形成

流動相中氣體形成的原因有多種，但就氣泡形成的原因來講，最根本的原因是由于氣體在液體中達到過飽和狀態(tài)。平衡狀態(tài)時溶解空氣的量與溶液的性質(zhì)、氣體的種類有關(guān)，也與外界條件有關(guān),主要的外界條件有以下 3 種。

1）溫度升高。一般來說，溶劑中能溶解氣體的量隨溫度的升高而降低，而當溶劑從低溫狀態(tài)下移至高溫時，過量溶解的氣體以氣泡形式逸出。

2）壓力降低。氣體的分壓增高，氣體在溶劑中的溶解量增大，相反在較高壓力下達到飽和的溶液，一旦壓力降低便會產(chǎn)生氣泡。

3）溶劑的混合。氣體的溶解量與氣體的種類有關(guān)，也與溶劑的種類有關(guān)。通常極性低的氣體容易溶解于低極性的溶劑，極性高的氣體容易溶解于高極性的溶劑。通常當兩種不同的溶劑混合時，混合溶劑中溶解的空氣量也將發(fā)生變化。大量實驗證明：混合溶劑中溶解的空氣量比各個純?nèi)軇┑目諝馊芙饬恳　?/span>

二、流路中氣泡產(chǎn)生引發(fā)的問題：

1. 流動相容器產(chǎn)生氣泡的影響

由于藥品儲存室與實驗室之間的溫差、早晨與中午的溫差使流動相溫度升高；某些不同溶劑混合時，此時若沒有充分攪拌，將會造成氣體過飽和而產(chǎn)生氣泡。當這些氣泡通過吸液過濾器和管道進入泵頭以后，將導致泵的動作失常。在進液口，隨著吸液沖程泵頭的壓力降低，導致氣泡膨脹從而使流動相的流量降低，而且由于氣泡的產(chǎn)生和經(jīng)過的途徑、方式都是不規(guī)則的，不僅影響了流動相流量的準確度，而且影響流量的精度。

2. 泵中形成氣泡使液流波動

即使當溶劑在容器中時，溶解空氣并未達到飽和的程度，但溶劑進泵以前還有可能產(chǎn)生氣泡。

1）低壓混合梯度裝置。低壓梯度時，由于低壓梯度單元部位的壓力略低于大氣壓，且混合室多裝在泵后（高壓側(cè)），但實際混合在低壓側(cè)就開始了，所以，低壓梯度比混合發(fā)生在泵后的高壓梯度容易產(chǎn)生氣泡。（常規(guī)單泵四通道的均為低壓混合模式）

2）吸液過濾器的堵塞。當吸液過濾器有部分堵塞時，吸液的阻力增大，過濾器內(nèi)的壓力降低，容易形成氣泡。吸液過濾器應經(jīng)常清洗、保養(yǎng)，否則容易被塵土顆粒等堵塞。

3. 柱中氣泡形成和累積引起流動相繞流

色譜柱中的壓力一般較高，氣體溶解度增大，一般在柱中不易產(chǎn)生氣泡。然而，在接近柱的出口處，壓力相對較低，此外，由于柱溫箱升溫，柱處于較高的溫度，導致在此形成氣泡。一旦氣泡在柱中形成或滯留則會使流動相液流不穩(wěn)定并產(chǎn)生繞流。因此，在實際應用中，HPLC柱的出口端向上，入口端向下，利用浮力盡可能使氣泡不停留在柱中。

4. 檢測器池中形成和累積氣泡引起基線噪聲

當柱箱或檢測器池處于較高溫度時，檢測器池中易產(chǎn)生氣泡。因為液流通過檢測器時，溫度升高而此處的壓力反而減小。即使檢測器池并未加溫，但在某些場合下也可能有氣泡產(chǎn)生。如果氣泡形成于檢測器池中，則將出現(xiàn)尖峰狀或鋸齒狀的基線噪聲，甚至于完全無法測定。

reference：《高效液相色譜中流動相脫氣問題的剖析》