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導讀

鹽析是指在高濃度緩沖鹽流動相遇到有機相不互溶時形成的結(jié)晶顆粒，這些顆粒會堵塞液相管路及色譜柱。在液相色譜分析中，操作不當可能導致鹽析現(xiàn)象，這是一種由于高濃度緩沖鹽與有機相不相溶而形成的結(jié)晶顆粒，這些顆粒會堵塞液相管路及色譜柱，給實驗人員帶來諸多不便。為了避免鹽析的發(fā)生，本文給出了一些改進措施。

一、鹽析規(guī)避措施

當緩沖鹽濃度較高（50mM以上）時，建議在有機相中添加一定比例的水（例如乙腈/水-80:20），以避免梯度最后有機相比例過高，造成鹽析。

夜間排樣時，推薦使用四元系統(tǒng)，并在序列最后調(diào)出高比例水相的沖洗系統(tǒng)方法，以減少鹽析的風險。

對于二元液相系統(tǒng)，實驗結(jié)束后應切換到小流速（如0.1mL/min）進行過夜沖洗，并保持柱溫箱的溫度控制。

沒有柱溫箱的情況下，可以加裝柱溫箱，并在夜間開啟空調(diào)保持房間恒溫在25℃左右，因為低溫更容易發(fā)生鹽析。

色譜柱使用后通常用純有機相封存，但建議在使用緩沖鹽類流動相前后，使用高水相（如10%甲醇水）進行沖洗，沖洗量應超過10倍柱體積（例如以1mL/min流速沖洗30分鐘以上），且沖洗時不關(guān)閉柱溫箱。

選擇在有機溶劑中有一定溶解性的緩沖鹽，例如乙酸銨，以減少鹽析的可能性。

使用與水混合放熱的有機溶劑，如甲醇，以減少鹽析的風險。

二、預防措施

色譜柱的保存和活化：色譜柱使用后應進行適當?shù)谋４婧突罨幚?，以保持其性能和延長使用壽命。色譜柱活化能讓填料充分潤濕、碳鏈舒展徹底，也能去除色譜柱中的雜質(zhì)。

色譜柱壓力監(jiān)控：色譜柱壓力是判斷色譜柱是否堵塞的重要指標。新色譜柱啟用后，應  記錄其初始壓力，并在后續(xù)使用中對比壓力變化，以判斷色譜柱是否需要更換保護柱柱芯或沖洗。