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嘉峪檢測網(wǎng) 2024-12-11 17:27
目的：梳理信使核糖核酸（mRNA）疫苗的開發(fā)、應用現(xiàn)狀及產業(yè)化挑戰(zhàn)，為國內此類產品的開發(fā)提供參考。方法：針對mRNA疫苗的設計、特點、生產及應用現(xiàn)狀的相關研究進行整理、分析，介紹國內外對mRNA疫苗的監(jiān)管采取的相關舉措，并對這一突破性平臺技術未來產業(yè)化應用將面臨的關鍵問題進行總結分析。結果與結論：mRNA技術憑借其通用、快速、靈活的特點應用于不同領域的疫苗/藥物開發(fā)，尤其是mRNA疫苗在抗擊新型冠狀病毒肺炎疫情上取得了迅速且顯著的成效，開啟了核酸藥物發(fā)展的新時代。為了保障mRNA疫苗的安全、有效、可及，部分國家及地區(qū)制定了配套的相關法規(guī)，并設立了特別審評部門加強對mRNA疫苗的上市監(jiān)管。由于產品特性、生產工藝的原因，mRNA疫苗產業(yè)化在疫苗可及性、生產管理、質量控制、共線生產導致的系統(tǒng)污染風險、知識產權風險以及新病毒變體的開發(fā)等多方面均存在挑戰(zhàn)。
2020年以來，新型冠狀病毒肺炎（CoronaVirus Disease 2019，COVID-19）疫情的發(fā)生促成了歷史上最快速的疫苗開發(fā)[1-3]。信使核糖核酸（Messenger Ribonucleic Acid，mRNA）技術由于其靈活的設計方式、低免疫原性、易于大規(guī)模生產的特點被迅速地應用于新冠疫苗開發(fā)，并且通過脂質納米顆粒（Lipid Nanoparticles，LNPs）遞送的mRNA疫苗技術路線在預防COVID-19方面已成為現(xiàn)實[4-5]。
本文對mRNA疫苗的結構設計和特點進行分析，并結合近年來國內外監(jiān)管情況，探討這一突破性技術平臺未來應用產業(yè)化將面臨的關鍵問題。
1、mRNA技術
mRNA技術通過核酸在細胞內表達外源蛋白從而達到表達抗原，激活免疫反應或表達功能正常蛋白，修復受損基因的目的[6]。1990年，Jon Wolff團隊將體外合成的 mRNA經肌肉注射至小鼠骨骼肌內，首次發(fā)現(xiàn)在骨骼肌細胞內有特定蛋白質的表達[7]。但是，由于mRNA的不穩(wěn)定性、高先天免疫原性和較低的體內遞送效率，導致該技術當時并未受到資本的青睞。直至2005年，尿苷修飾mRNA的發(fā)現(xiàn)以及遞送技術的不斷發(fā)展才給該領域帶來新的生機。2021年，拉斯克獎宣布將臨床醫(yī)學研究獎授予Katalin Karikó和Drew Weissma，以表彰他們發(fā)現(xiàn)了基于mRNA修飾的新治療技術。
基于mRNA技術的治療手段，根據(jù)其潛在作用機制可用于預防性疫苗、治療性疫苗和治療性藥物[8]。
預防性疫苗，主要應用于感染性疾病的預防，通過mRNA來表達病原體的抗原蛋白，從而激發(fā)宿主的獲得性免疫反應，產生中和抗體以抵抗病原體的入侵。目前，最為人熟知的預防性mRNA治療臨床實例就是新冠病毒的預防性疫苗，包括2款已經獲得美國食品藥品管理局（Food and DrugAdministration，F(xiàn)DA）批準上市的疫苗和眾多國內外處于臨床階段的疫苗。隨著mRNA序列設計、遞送技術的不斷完善，mRNA技術將不僅在新冠疫苗領域獲得突破性進展，在其他傳染病預防性疫苗例如預防巨細胞病毒（Cyto-megalo Virus，CMV）、寨卡病毒、呼吸道合胞病毒（Respiratory SyncytialVirus，RSV）、流感病毒、狂犬病毒、人類免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV）等也都已經進入臨床開發(fā)階段[9-11]。其中，季節(jié)性流感疫苗也被多家公司布局，如Moderna公司首款進入臨床開發(fā)階段的季節(jié)性流感疫苗候選產品mRNA-1010的Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗已完成首批受試者接種[12]。
治療性疫苗，是通過打破機體的免疫耐受，提高機體的特異性免疫反應，對一些目前尚無有效治療藥物的疾病起到治療作用。其中包括很多處于臨床研究階段的以腫瘤新生抗原為靶點的個性化癌癥mRNA治療疫苗[13]。這些治療性疫苗通過表達癌癥新生抗原蛋白來激活特異性識別癌細胞新生抗原的細胞免疫，從而殺傷癌細胞達到治療效果。
基于mRNA技術的治療性藥物，其覆蓋范圍則更加廣泛，它們的共同點就是mRNA翻譯產物可以作為發(fā)揮治療作用的分子。例如在基于mRNA的基因治療中，mRNA被遞送到有基因缺陷的細胞中，翻譯產生正常功能的蛋白從而補償缺陷基因的部分功能，達到治療效果。Moderna公司研發(fā)的針對VEGF-A靶點的mRNA療法正在進行2型糖尿病患者治療的臨床實驗[14]。此外，BNT141也是由BioNTech公司開發(fā)的一款編碼Claudin 18.2抗體的mRNA治療藥物，目前正在開展實體瘤治療的Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗[15]。國內外多家企業(yè)還布局了治療性疫苗（主要為癌癥疫苗）和創(chuàng)新mRNA療法等多個管線，為癌癥、罕見疾病、神經系統(tǒng)疾病等提供更有效、更安全的治療選擇[16-17]。
2、mRNA疫苗
mRNA疫苗的基本概念是利用mRNA編碼抗原，通過體外轉錄技術合成mRNA分子，利用合適的遞送系統(tǒng)將mRNA運輸進入人體，依靠細胞自身的翻譯系統(tǒng)將mRNA翻譯成目標蛋白，從而達到臨床治療或預防的目的[18-19]。
2.1mRNA疫苗的設計
目前研制的mRNA疫苗主要有2種，從結構可分為非復制mRNA和自擴增mRNA。非復制mRNA序列相對較短，有5個關鍵組件構成：5’帽結構（Cap）、5’和3’非翻譯區(qū)（UntranslatedRegion，UTR）、開放閱讀框（Open ReadingFrame，ORF）區(qū)和3’Poly（A）尾。自擴增mRNA一般基于甲病毒基因組改造而來，其在非復制mRNA的序列基礎上還具有編碼一種RNA依賴的RNA聚合酶復合物的序列。傳統(tǒng)的mRNA疫苗編碼目的抗原，而自擴增mRNA利用一種病毒復制機制，使該種mRNA在細胞內擴增并增加蛋白表達，從而最小化mRNA所需劑量[20-22]。
許多因素會影響mRNA在細胞中的穩(wěn)定性和蛋白表達，例如：5’UTR 或3’UTR 的選擇、mRNA的二級結構、Poly（A）尾的優(yōu)化、mRNA 密碼子的優(yōu)化、修飾核苷酸的選擇等。但是，可以通過修改或更改這些組件以提高mRNA的穩(wěn)定性、翻譯效率和免疫刺激特征。因此，設計mRNA分子時需綜合考慮這些因素的影響，例如CureVac公司的新冠疫苗CVnCoV，為防止其mRNA被模式識別受體發(fā)現(xiàn)的策略就是通過序列工程化和密碼子優(yōu)化來消除疫苗mRNA中的尿嘧啶，同時提高鳥嘌呤和胞嘧啶占所有堿基的比例[23]。
2.2mRNA疫苗的特點
①與DNA疫苗相比，由于抗原翻譯發(fā)生在細胞質而不是細胞核中，不會整合到基因組，沒有造成插入突變的風險，因此，mRNA 疫苗具有更高的生物安全性；
②與基于病毒載體的疫苗相比，mRNA僅具有瞬時活性，通過生理代謝途徑可完全降解，使得mRNA不會長期存留在體內，產生毒性；
③mRNA是通過無細胞酶促轉錄反應產生的，該反應能夠實現(xiàn)快速和可擴展的生產。由于其平臺化的生產方式，編碼不同抗原的mRNA在物理和化學上性質相似，新mRNA疫苗的配方設計和制造過程遵循相同的步驟，因此，更加易于開發(fā)且生產工藝相對穩(wěn)定[24]。
2.3mRNA疫苗的生產方式
mRNA疫苗的技術步驟包括：DNA 質粒構建→體外轉錄→遞送系統(tǒng)裝載。該技術具有平臺化的生產方式，其中最關鍵的步驟就是mRNA的設計以及遞送系統(tǒng)的裝載。由于mRNA是一個包含負電荷的大分子且極不穩(wěn)定，無法穿過由陰離子脂質構成的細胞膜，且在體內易被核酸酶降解，因此需要創(chuàng)新的遞送載體[25]。如前文所說，mRNA的設計方式將影響mRNA在細胞中的穩(wěn)定性和翻譯效率，而遞送系統(tǒng)的裝載則直接影響最終產品的穩(wěn)定性、均一性。這些載體技術主要包括：LNPs、脂質多聚物納米載體技術（Lipopolyplex，LPP）、魚精蛋白載體技術等[26-27]。因此，研發(fā)具有自主知識產權的脂質載體也成為mRNA領域研究的熱點和難點。Moderna公司和BioNTech公司開發(fā)的2種mRNA新冠疫苗均采用了LNPs遞送技術[28]，將藥物包封于類脂質雙分子層內而形成微型泡囊體，通過非共價親和力和細胞膜結合并通過內吞作用被攝取，進入細胞后，mRNA逃離內吞小泡，被釋放到細胞質中表達靶蛋白。但是，這種技術也存在穩(wěn)定性較差的問題。因此，新型載體的開發(fā)以及多種遞送體系的有機結合方式有望能夠更好地解決遞送系統(tǒng)的細胞毒性以及內吞、逃逸、蛋白表達上所面臨的問題。
3、mRNA疫苗的國內外監(jiān)管現(xiàn)狀
根據(jù)mRNA疫苗作用效果的不同可分為預防性和治療性。通常預防性疫苗的審評主要由各國/地區(qū)的藥品監(jiān)管機構（如FDA）的疫苗組負責，治療性藥品/疫苗由藥品組負責，并且在新冠疫情的特殊時期，部分國家和地區(qū)也成立了特別審評部門，例如歐洲藥品管理局（European MedicinesAgency，EMA）為新冠疫苗開發(fā)成立了COVID-19特別工作組（COVID-19 EMA Pandemic TaskForce，ETF），我國也成立了國務院聯(lián)防聯(lián)控機制科研攻關組疫苗研發(fā)專班專家組，對新冠疫苗的審批實行“統(tǒng)一指揮、提前介入、隨到隨評、科學審評”的原則，做好應急審批的工作。
3.1國內mRNA疫苗監(jiān)管相關法規(guī)和指導原則
由于新型冠狀病毒肺炎疫情防控的應急工作需要，2020年8月，國家藥品監(jiān)督管理局藥品審評中心（Center for Drug Evaluation，CDE）集中頒布了5個關于新型冠狀病毒預防用疫苗研發(fā)技術指導原則，涉及藥學研究、非臨床研究和臨床研究等多個方面（見表1）[29-33]。其中，《新型冠狀病毒預防用mRNA疫苗藥學研究技術指導原則（試行）》[30]主要針對非復制型mRNA疫苗藥學研制制定的技術指導意見，包括模板設計、質粒構建、生產工藝、制劑處方、質量特性及標準制定、穩(wěn)定性研究、申報臨床階段的考量等多個方面。研發(fā)者需根據(jù)自身產品相關特點和屬性開展相應的研究，針對mRNA新冠疫苗的申報可與CDE提前溝通，進行申報資料的滾動遞交。截至2021年9月，艾博生物、斯微生物、麗凡達生物均已有新冠mRNA疫苗產品進入臨床試驗階段。
表1 國內mRNA疫苗相關技術監(jiān)管文件
3.2國外mRNA疫苗監(jiān)管相關法規(guī)和指導原則
2020年12月22日，WHO生物制品標準化委員會（WHO Expert Committee on BiologicalStandardization，ECBS）公開征求對《預防傳染病mRNA疫苗的質量、安全性及有效性評價的法規(guī)考慮要點》（Evaluation of the Quality, Safety andEfficacy of Messenger RNA Vaccines for the Preventionof Infectious Diseases:Regulatory Considerations）的修訂意見[34]，ECBS起草小組根據(jù)反饋的425條意見于2021年7月再次征求公共意見。該指導原則共有10章，從通用考量、特殊考量、mRNA疫苗生產及質控、非臨床評價和臨床評價等方面提出對mRNA技術的法規(guī)考量點。與前述CDE發(fā)布的《新型冠狀病毒預防用mRNA疫苗藥學研究技術指導原則（試行）》[30]不同的是，這份文件草案的范圍不僅限于包裝在LNPs 中的mRNA，還包括自擴增型mRNA（sa-mRNA）。同時，WHO明確表示，不應將文件草案視為僅針對新冠疫苗提供指導，并且概述了在適當情況下的具體考慮，以幫助申辦人開發(fā)多價mRNA疫苗或針對某些病原體改變現(xiàn)有疫苗株。因此，針對mRNA預防性疫苗的開發(fā)策略，該草案的適用范圍更廣，為申請人做全球申報時提供了很重要的參考依據(jù)。
FDA于2021年1月19日以及2021年10月1日分別發(fā)布了《COVID-19 公共衛(wèi)生緊急事件期間藥品許可及細胞和基因治療產品的生產考慮》（Manufacturing Considerations for Licensed andInvestigational Cellular and Gene Therapy ProductsDuring COVID-19 Public Health Emergency）和《關于Comirnaty問答（COVID-19 mRNA疫苗）》[Q&Afor Comirnaty（COVID-19 Vaccine mRNA）]，對申請人在新冠相關mRNA疫苗申報時做出指導[35-36]。EMA也于2021年9月16日發(fā)布了《EMA 關于加速COVID-19治療和疫苗開發(fā)支持和評估程序的舉措》（EMA Initiatives for Acceleration of DevelopmentSupport and Evaluation Procedures for COVID-19Treatments and Vaccines）[37]，但這些舉措都僅限于與新冠疫苗相關的產品。見表2。
表2 國外mRNA疫苗相關技術監(jiān)管文件
3.3其他相關法規(guī)和指導原則
mRNA具有的遞送系統(tǒng)通常包括LNPs、LPP等。在制劑的質量研究、藥代動力學、非臨床安全性研究方面，可以借鑒有關納米藥物指導原則。
此外，治療型mRNA疫苗是在體內通過表達特定蛋白，刺激機體產生特異性免疫反應，可借鑒基因治療產品相關的部分要求。但是，該類療法與基因治療產品的風險不同，目前國內外尚無先例可循，并不完全適用所有基因治療產品的技術要求，期待監(jiān)管部門和企業(yè)共同努力，建立mRNA療法適用的監(jiān)管要求和指導原則。
3.4mRNA疫苗的監(jiān)管現(xiàn)狀
mRNA疫苗作為一種新興技術，目前暫無監(jiān)管案例可循。在Moderna公司和輝瑞/BioNTech公司的mRNA新冠疫苗獲得FDA、EMA等監(jiān)管機構緊急授權使用以來，EMA于2021年8月11日已發(fā)出相關警告：mRNA疫苗可能有更多危險副作用，這些癥狀包括多形紅斑、腎小球腎炎或腎臟炎癥、腎病癥候群等[38]。美國疾病控制與預防中心也發(fā)現(xiàn)，青少年群體中罕見的心臟炎癥，可能與使用了mRNA技術的新冠疫苗接種存在關聯(lián)。從疫苗臨床安全性角度出發(fā)，應持續(xù)監(jiān)測產品上市后不良反應，以及對生理功能潛在的非期望作用，包括但不限于對中樞神經系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)等多方面的影響。由于mRNA疫苗供應需求的激增，疫苗生產場地遍布全球各地，在目前全球國際交通受限的情況下，監(jiān)管機構對各個生產場地的現(xiàn)場核查挑戰(zhàn)無疑是巨大的。事實上，F(xiàn)DA授權新冠疫苗之前并沒有做批準前檢查；而對于部分原液及重要輔料，包括LNP的生產場地，也均未開啟GMP檢查。因此，從疫苗質量及生產角度出發(fā)，國內疫苗生產企業(yè)尚可派駐駐廠員監(jiān)管，但對于全球其他國家/地區(qū)的生產場地，無疑需要遠程核查方式的進一步探索，包括檢查的頻次和內容均需要全球監(jiān)管機構進行深入探究。
4、mRNA疫苗產業(yè)化存在的相關問題
由于產品特性、生產工藝的原因，mRNA疫苗產業(yè)化存在多方面挑戰(zhàn)。包括：
4.1疫苗的可及性
現(xiàn)有mRNA疫苗對冷鏈運輸要求較高，例如Moderna公司和BioNTech公司開發(fā)的2種mRNA新冠疫苗分別需要在-15～-25℃和-60～-90℃的條件下進行儲存和運輸，較高的運輸成本無疑給疫苗的跨國供應帶來困難?？梢酝ㄟ^持續(xù)的工藝優(yōu)化穩(wěn)定遞送系統(tǒng)的包封率提高產品的穩(wěn)定性，開發(fā)耐熱性更好的疫苗。
4.2mRNA疫苗的生產管理及質量控制
從質粒生產、體外轉錄中復雜物料體系的混合和控制（包含多種酶的參與）、遞送系統(tǒng)裝載時mRNA-LNP的純化工序以及生產過程中各級中間產品/成品的質量評價，mRNA疫苗生產時所面臨的挑戰(zhàn)貫穿于各個環(huán)節(jié)，都需要在疫苗完成最初的結構設計之后對工藝進行持續(xù)的優(yōu)化和質量的提升[39]。
4.3防止共線生產導致的系統(tǒng)污染風險
由于國際生產產能緊缺以及已上市品種數(shù)目較少的原因，尚無產品存在共線生產的情況。但是，由于mRNA疫苗模塊化、平臺化的生產特點，未來，新mRNA疫苗的生產將很有可能采用同一生產車間或生產線，如何建立全封閉mRNA疫苗生產方式，以及對清潔驗證的挑戰(zhàn)是企業(yè)必須要提前思考的問題。
4.4開發(fā)擁有自主知識產權的mRNA疫苗
核酸遞送系統(tǒng)、基因修飾、加帽技術是mRNA開發(fā)的幾個高壁壘，其核心專利仍掌握在少數(shù)幾家企業(yè)手中，因此，mRNA技術在中國的產業(yè)化落地必須考慮可能面臨的知識產權風險。
4.5新出現(xiàn)病毒變體的疫苗開發(fā)
病毒基因組在復制時常常會發(fā)生突變，新型冠狀病毒尤其如此。目前，正處在早期開發(fā)階段的新冠mRNA疫苗研發(fā)單位均已開始針對各類病毒突變株進行研究，CureVac公司也于2021年10月宣布退出其第一代COVID-19候選疫苗的開發(fā)，轉移到二代疫苗的開發(fā)上。從長遠角度來看，能夠開發(fā)一種預防新冠病毒和其他未來冠狀病毒的泛冠狀病毒疫苗非常重要?？梢葬槍Σ煌跔畈《局械谋Ｊ匚稽c，加快抗原發(fā)現(xiàn)和疫苗設計。
5、結 語
由于mRNA設計和核酸遞送技術數(shù)十年來的發(fā)展，這些多方面的技術創(chuàng)新結合在一起，克服了mRNA疫苗生產方面的諸多挑戰(zhàn)，促進了簡易、有效、靈活機動、可擴大化的平臺化合成流程的誕生。目前，輝瑞制藥公司/BioNTech制藥公司的新冠疫苗已于2021年8月獲得FDA的正式批準（16歲以上人群）[40]，Moderna公司也已完成FDA的生物制品許可申請。我國自COVID-19疫情發(fā)生以來，涌現(xiàn)了多家基于mRNA技術的新銳公司，但是到目前為止，國內尚無已批準上市的mRNA疫苗產品，除了復星醫(yī)藥引進BioNTech公司的mRNA疫苗產品外，我國多家公司的mRNA產品均處于臨床或早期開發(fā)階段。如前文所述，作為一種新興技術，使用mRNA作為疫苗/療法仍然面臨諸多挑戰(zhàn)，仍需克服mRNA開發(fā)核心技術的高壁壘。同時，對監(jiān)管機構而言，與產品特性相匹配的相關法規(guī)和技術指導原則仍有待完善。隨著生物技術的飛速發(fā)展，相信在不久的將來，基于mRNA技術的產品將在生物制品領域占有重要的地位。本文對近年來mRNA技術的應用領域、mRNA疫苗的設計和特點，并結合國內外監(jiān)管情況進行綜述，探討該平臺產業(yè)化應用目前存在的一些關鍵問題，以期為國內此類產品的開發(fā)提供參考。
參考文獻
[1] Thanh Le T, Andreadakis Z, Kumar A, et al. The COVID-19Vaccine Development Landscape[J]. Nat Rev DrugDiscov，2020，19（5）：305-306.
[2] Huang Q, Zeng J, Yan J. COVID-19 mRNA Vaccines[J]. JGenet Genomics，2021，48（2）：107-114.
[3] Lamb Y N. BNT162b2 mRNA COVID-19 Vaccine: FirstApproval[J]. Drugs，2021，81（4）：495-501.
[4] Teo S P. Review of COVID-19 mRNA Vaccines:BNT162b2 and mRNA-1273[J]. J Pharm Pract, 2021，DOI:10.1177/08971900211009650.
[5] Skowronski DM, De Serres G. Safety and Efficacy of theBNT162b2 mRNA Covid-19 Vaccine[J]. N Eng J Med，2021，384（11）：10.
[6] Dolgin E. The Tangled History of mRNA Vaccines[J].Nature，2021，597（7876）：318-324.
[7] Wolff JA, Malone RW, Williams P, et al. Direct GeneTransfer into Mouse Muscle in Vivo[J]. Science，1990，247（4949 Pt 1）：1465-8.
[8] Wang Y, Zhang Z, Luo J, et al. mRNA Vaccine: A PotentialTherapeutic Strategy[J]. Mol Cancer，2021，20（1）：33.
[9] Pardi N, Hogan MJ, Weissman D. Recent Advances inmRNA Vaccine Technology[J]. Curr Opin Immunol, 2020（65）：14-20.
[10] Flemming A. mRNA Vaccine Shows Promise inAutoimmunity[J]. Nat Rev Immunol，2021，21（2）：72.
[11] Jeeva S, Kim KH, Shin CH, et al. An Update on mRNABased Viral Vaccines[J]. Vaccines (Basel)，2021，9（9）：965.
[12] Moderna. Moderna Announces First Participant Dosed inPhase 1/2 Study of Its Quadrivalent Seasonal Flu mRNAVaccine[EB/OL].（2021-07-07）[2021-10-18]. https://investors.modernatx.com/news/news-details/2021/Moderna-Announces-First-Participant-Dosed-in-Phase12-Study-of-Its-Quadrivalent-Seasonal-Flu-mRNAVaccine-07-07-2021/default.aspx.
[13] Miao L, Zhang Y, Huang L. mRNA Vaccine for CancerImmunotherapy[J]. Mol Cancer，2021，20（1）：41.
[14] Anttila V, Saraste A, Knuuti J, et al. Synthetic mRNAEncoding VEGF-A in Patients Undergoing Coronary ArteryBypass Grafting: Design of a Phase 2a Clinical Trial[J]. MolTher Methods Clin Dev，2020（18）：464-472.
[15] ClinicalTrials.gov. Safety, Pharmacokinetics, Pharmacodynamics,and Preliminary Efficacy Trial of BNT141[EB/OL].（2020-12-24）[2021-10-18]. https://www.clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04683939.
[16] Zhang C, Maruggi G, Shan H, et al. Advances in mRNAVaccines for Infectious Diseases[J]. Front Immunol，2019（10）：594.
[17] Khalid K, Padda J, Khedr A, et al. HIV and Messenger RNA(mRNA) Vaccine[J]. Cureus，2021，13（7）：e16197.
[18] Lavarone C, O’Hagan DT, Yu D, et al. Mechanismof Action of mRNA-based Vaccines[J]. Expert RevVaccines，2017，16（9）：871-881.
[19] Uchida S, Perche F, Pichon C, et al. Nanomedicine-BasedApproaches for mRNA Delivery[J]. Mol Pharm，2020，17（10）：3654-3684.
[20] Liu T, Liang Y, Huang L. Development and DeliverySystems of mRNA Vaccines[J]. Front Bioeng Biotechnol，2021（9）：718-753.
[21] Karpenko LI, Rudometov AP, Sharabrin SV, et al. Deliveryof mRNA Vaccine against SARS-CoV-2 Using aPolyglucin: Spermidine Conjugate[J]. Vaccines (Basel)，2021，9（2）：76.
[22] Verbeke R, Lentacker I, De Smedt SC, et al. Three Decadesof Messenger RNA Vaccine Development[J]. Nano Today，2019（28）：100766.
[23] Chaudhary N, Weissman D, Whitehead K A. mRNAVaccines for Infectious Diseases: Principles, Delivery andClinical Translation[J]. Nat Rev Drug Discov，2021，20（11）：880.
[24] Topol EJ. Messenger RNA Vaccines Against SARS-CoV2[J]. Cell，2021，184（6）：1401.
[25] Reichmuth AM, Oberli MA, Jaklenec A, et al. mRNAVaccine Delivery Using Lipid Nanoparticles[J]. TherDeliv，2016，7（5）：319-334.
[26] Kramps T, Probst J. Messenger RNA-Based Vaccines:Progress, Challenges, Applications[J]. Wiley InterdiscipRev RNA，2013，4（6）：737-49.
[27] Iavarone C, O'hagan DT, Yu D, et al. Mechanism of Actionof mRNA-Based Vaccines[J]. Expert Rev Vaccines，2017，16（9）：871-881.
[28] Kim J, Eygeris Y, Gupta M, et al. Self-Assembled mRNAVaccines[J]. Adv Drug Deliv Rev，2021（170）：83-112.
[29] 國家藥品監(jiān)督管理局. 新型冠狀病毒預防用mRNA疫苗藥學研究技術指導原則（試行）[EB/OL].（2020-08-14）[2021-10-18]. http://www.gov.cn/xinwen/2020-08/15/content_5535069.htm.
[30] 國家藥品監(jiān)督管理局.《新型冠狀病毒預防用疫苗臨床研究技術指導原則（試行）》及起草說明[EB/OL].（2020-08-14）[2021-10-18]. http://www.gov.cn/xinwen/2020-08/15/content_5535069.htm.
[31] 國家藥品監(jiān)督管理局.《新型冠狀病毒預防用疫苗臨床評價指導原則（試行）》及起草說明[EB/OL].（2020-08-14）[2021-10-18]. http://www.gov.cn/xinwen/2020-08/15/content_5535069.htm.
[32] 國家藥品監(jiān)督管理局.《新型冠狀病毒預防用疫苗研發(fā)技術指導原則（試行）》及起草說明[EB/OL].（2020-08-14）[2021-10-18]. http://www.gov.cn/xinwen/2020-08/15/content_5535069.htm.
[33] 國家藥品監(jiān)督管理局. 新型冠狀病毒預防用疫苗非臨床有效性研究與評價技術要點（試行）[EB/OL].（2020-08-14）[2021-10-18]. http://www.gov.cn/xinwen/2020-08/15/content_5535069.htm.
[34] WHO. Evaluation of the Quality, Safety and Efficacy ofMessenger RNA Vaccines for the Prevention of InfectiousDiseases: Regulatory Considerations[EB/OL].（2021-07-14）[2021-10-18]. https://prais.paho.org/en/publicconsultation-on-evaluation-of-the-quality-safety-andefficacy-of-messenger-rna-vaccines-for-the-preventionof-infectious-diseases-regulatory-considerations/.
[35] FDA. Manufacturing Considerations for Licensed andInvestigational Cellular and Gene Therapy ProductsDuring COVID-19 Public Health Emergency[EB/OL].（2021-01-19）[2021-10-18]. https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidancedocuments/manufacturing-considerations-licensed-andinvestigational-cellular-and-gene-therapy-productsduring.
[36] FDA. Q&A for Comirnaty（COVID-19 Vaccine mRNA）[EB/OL].（2021-10-18）[2021-10-18]. https://www.fda.gov/vaccines-blood-biologics/qa-comirnaty-covid-19-vaccine-mrna.
[37] EMA. EMA Initiatives for Acceleration of DevelopmentSupport and Evaluation Procedures for COVID-19Treatments and Vaccines[EB/OL].（2021-09-16）[2021-10-18]. https://www.ema.europa.eu/en/documents/other/ema-initiatives-acceleration-development-supportevaluation-procedures-covid-19-treatments-vaccines_en.pdf.
[38] EMA. Safety Updates for Authorised COVID-19 Vaccines[EB/OL].（2021-08-11）[2021-10-18]. https://www.ema.europa.eu/en/human-regulatory/overview/public-healththreats/coronavirus-disease-covid-19/treatmentsvaccines/vaccines-covid-19/safety-covid-19-vaccines.
[39] Rosa SS, Prazeres DMF, Azevedo AM, et al. mRNAVaccines Manufacturing: Challenges and Bottlenecks[J].Vaccine，2021，39（16）：2190-2200.
[40] FDA. Summary Basis for Regulatory Action- Comirnaty[EB/OL].（2021-08-11）[2021-10-18].https://www.fda.gov/media/151733/download.
本文作者孫程潔、成殷、王沖，上海藥品審評核查中心，來源于中國藥事，僅供交流學習。
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