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使用替代柱子后如何對方法進行調(diào)整以滿足USP的要求?

嘉峪檢測網(wǎng)        2025-01-18 16:26

 

 

色譜新手:請問我做一種藥的分析查美國藥典規(guī)定使用100mm×40mm8μm的色譜柱流速3mLmin可現(xiàn)在市場上已不容易找到這種規(guī)格的產(chǎn)品于是我按USP中色譜柱比較的數(shù)據(jù)庫的指引選了一款選擇性一致的等價色譜柱其規(guī)格是100mm×46mm3μm的色譜柱當(dāng)選用3mLmin的流速時發(fā)現(xiàn)柱壓超高,請問我如何對方法進行調(diào)整以滿足USP的要求?

 

老手解答:流速調(diào)整原則是流動相通過柱子的線速度一致,等價柱的截面積大了,流速也應(yīng)增加才能保持相同的線速度。新流速計算結(jié)果是:(4.6/4.0)2x3.0=4.0ml/min。但3ml/min流速都已導(dǎo)致柱壓太高,4.0ml/min明顯不行。好在USP還有個允許±50%的流速調(diào)整指導(dǎo)原則,這樣將流速調(diào)至2.0ml/min既符合USP規(guī)定,又能使柱壓降到可接受的范圍,但這種改變不能引起其它不好后果。

這個例子中,等度分析中,流速改變會引起塔板數(shù)和峰寬的改變,但不會影響峰的選擇性。3um粒徑色譜柱柱效比8um的高很多,可考慮縮短柱長以補償或部分補償流速降低造成的測定時間增加。所以,更佳選擇是50 mm ×4.6 mm, 3μm的柱子,2.0ml/min的流速運行,可以在符合USP規(guī)定的情況下,又得到更快速的測定分離。

 

 

 

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來源:Internet

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