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嘉峪檢測(cè)網(wǎng) 2025-02-08 13:05
［摘要］ 抗體偶聯(lián)藥物( antibody-drug conjugates，ADCs) 正在引領(lǐng)腫瘤治療的新革命，通過結(jié)合抗體的高特異性和化療藥物的強(qiáng)大殺傷力，為腫瘤治療提供了一種更加精準(zhǔn)且有效的手段。本文綜述了ADCs 的研發(fā)歷程、國(guó)內(nèi)外上市情況、臨床試驗(yàn)情況以及監(jiān)管法規(guī)，并重點(diǎn)探討了ADCs 在新藥臨床研究申請(qǐng)( investigational new drug，IND) 階段藥學(xué)研究的關(guān)注點(diǎn)。本文旨在為ADCs 的藥學(xué)研究和審評(píng)提供參考，進(jìn)而推動(dòng)此類產(chǎn)品的臨床轉(zhuǎn)化和應(yīng)用。
抗體偶聯(lián)藥物( antibody-drug conjugates，ADCs)是一種新興的靶向治療藥物。它結(jié)合了抗體藥物的特異性與化療藥物的殺傷力，以提供更加精準(zhǔn)且有效的治療方案［1］。傳統(tǒng)的化療藥物雖然具有強(qiáng)大的殺傷力，但由于缺乏特異性，往往會(huì)對(duì)正常細(xì)胞造成大量的毒性損傷，進(jìn)而導(dǎo)致患者出現(xiàn)嚴(yán)重的不良反應(yīng)［2］。相比之下，抗體藥物雖然可以減少對(duì)正常細(xì)胞的損傷，但其殺傷力通常弱于化療藥物［3］。ADCs 的出現(xiàn)為解決這一矛盾提供了可能性。
如圖1 所示，ADCs 由三部分組成: 裸抗、連接子( linker)和有效載荷( payload) 。ADCs 通過其裸抗部分能夠特異性地識(shí)別并結(jié)合到腫瘤細(xì)胞表面的抗原，然后被腫瘤細(xì)胞內(nèi)吞形成內(nèi)吞囊泡。隨后，內(nèi)吞囊泡會(huì)與溶酶體融合，ADCs 發(fā)生降解并釋放出毒性藥物分子，從而促使腫瘤細(xì)胞凋亡［1］; 此外，毒性藥物分子還可能從腫瘤細(xì)胞中釋放出來，進(jìn)而殺傷周圍的腫瘤細(xì)胞，該過程被稱為“旁觀者”效應(yīng)［4］。由于其獨(dú)特的作用機(jī)制，ADCs 既可以保證療效，又能減少對(duì)正常細(xì)胞的損傷。然而，ADCs 的研發(fā)并不簡(jiǎn)單。首先，裸抗的選擇和生產(chǎn)是一大挑戰(zhàn)，因?yàn)槁憧剐枰哂懈叨鹊奶禺愋院陀H和力，才能精確地識(shí)別并結(jié)合到腫瘤細(xì)胞［5］。其次，連接子和有效載荷的設(shè)計(jì)及其合成也是一大難題。連接子需要在保證連接穩(wěn)定性的同時(shí)，能在合適的條件下釋放有效載荷［6］。而有效載荷則需要具有足夠的殺傷力，且其毒性特性需要與裸抗的靶向性相匹配［6］。此外，ADCs 的生產(chǎn)過程繁瑣復(fù)雜，涉及生物技術(shù)和化學(xué)技術(shù)的結(jié)合，質(zhì)量控制難度大［7］。因此，ADCs 的藥學(xué)研究是一項(xiàng)重要且復(fù)雜的工作，需要深入研究和探討。本文將詳細(xì)分析和討論ADCs 產(chǎn)品的國(guó)內(nèi)外上市及臨床申報(bào)情況、監(jiān)管現(xiàn)狀以及新藥臨床研究申請(qǐng)( investigational new drug， IND) 階段藥學(xué)研究的關(guān)注點(diǎn)，以期為ADCs產(chǎn)品在IND 階段的藥學(xué)研究和審評(píng)提供參考。
1、 ADCs 產(chǎn)品國(guó)內(nèi)外上市及申報(bào)情況
1.1 國(guó)內(nèi)外已上市ADCs 產(chǎn)品概述
截至目前，全球已有15 款A(yù)DCs 產(chǎn)品上市( 見表1) 。
通過對(duì)這些產(chǎn)品的分析，我們可以清晰地歸納出ADCs 產(chǎn)品的發(fā)展歷程。主要分為以下幾個(gè)階段: 概念提出期與早期探索( 20 世紀(jì)初至20 世紀(jì)70 年代) 、第一代ADCs 的興起與挑戰(zhàn)( 1980—2000 年) 、第二代ADCs 的發(fā)展與成熟( 2011—2013 年) 以及第三代ADCs 的創(chuàng)新與突破( 2019 年至今) 。
概念提出期與早期探索( 20 世紀(jì)初至20 世紀(jì)70 年代) : ADCs 的概念并非近年才出現(xiàn)，早在20 世紀(jì)初，德國(guó)科學(xué)家、諾貝爾醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)得主Paul Ehrlich就已經(jīng)構(gòu)思了ADCs 的基本理念，并形象地將其稱為“魔法子彈”［8］。然而，直到20 世紀(jì)50 年代，ADCs 的研究才開始取得實(shí)質(zhì)性進(jìn)展。1958 年，Mathe 率先實(shí)現(xiàn)了鼠抗白細(xì)胞免疫球蛋白與甲氨蝶呤的偶聯(lián)，并將其應(yīng)用于白血病的治療［9］。20 世紀(jì)50 年代后期至70 年代，臨床研究中開始出現(xiàn)偶聯(lián)了有效載荷( 如放射性核素、毒素或藥物) 的鼠單克隆抗體或多克隆抗體。由于抗體的免疫原性及其制備技術(shù)等一系列挑戰(zhàn)，ADCs 的研究進(jìn)展緩慢，幾十年間幾乎沒有顯著突破。
第一代ADCs 的興起與挑戰(zhàn)( 1980—2000 年) :隨著1975 年單克隆抗體的誕生和后續(xù)人源化抗體的出現(xiàn)，ADCs 的研究逐漸走上正軌。20 世紀(jì)80 年代，第一個(gè)基于嵌合人源化單克隆抗體的ADC 應(yīng)用于癌癥模型研究［1］。2000 年，第一代ADCs 產(chǎn)品Mylotarg 獲得了美國(guó)FDA 批準(zhǔn)，用于治療急性粒細(xì)胞白血病。然而，由于靶向性、偶聯(lián)技術(shù)和有效性等多個(gè)問題，這款藥物在血液中的穩(wěn)定性不佳，毒素小分子容易提前釋放，這導(dǎo)致了嚴(yán)重的毒副反應(yīng)，并最終在2010 年被撤市。
第二代ADCs 的發(fā)展與成熟( 2011—2013 年) :盡管面臨困難，科學(xué)家們并未放棄對(duì)ADCs 的研究。經(jīng)過10 余年的努力，2011 年，新型ADCs 產(chǎn)品Adcetris獲得了美國(guó)FDA 的批準(zhǔn)，用于治療間變性大細(xì)胞淋巴瘤。2013 年，另一款A(yù)DCs 產(chǎn)品Kadcyla 也獲得了美國(guó)FDA 的批準(zhǔn)，用于治療HEＲ-2 陽性轉(zhuǎn)移性乳腺癌。這2 款藥物的成功上市標(biāo)志著第二代ADCs 產(chǎn)品的誕生。相比于第一代產(chǎn)品，它們?cè)谀[瘤細(xì)胞靶向性、偶聯(lián)技術(shù)穩(wěn)定性以及細(xì)胞毒素小分子有效性等多個(gè)維度上都有了大幅改善。
第三代ADCs 的創(chuàng)新與突破( 2019 年至今) :2019 年，Polivy 和Enhertu 的相繼上市標(biāo)志著第三代ADCs 產(chǎn)品的出現(xiàn)。定點(diǎn)偶聯(lián)技術(shù)的采用使得藥物-抗體比值( drug-antibody ratio，DAＲ) 均一化，這也帶來了更少的脫靶毒性和更好的藥動(dòng)學(xué)效率。同時(shí)，完全人源化抗體的使用可以進(jìn)一步降低免疫原性。值得一提的是，2021 年，榮昌生物公司的愛地希成為了中國(guó)首個(gè)原創(chuàng)ADCs 產(chǎn)品獲得批準(zhǔn)上市。這也是我國(guó)首個(gè)同時(shí)獲得了美國(guó)FDA 和中國(guó)國(guó)家藥品監(jiān)督管理局突破性療法認(rèn)定的ADCs 產(chǎn)品。
1. 2 ADCs 產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)情況
截至2024 年3 月27 日，在國(guó)際臨床試驗(yàn)注冊(cè)平臺(tái)( http: / /www． clinicaltrials． gov) 上開展的與ADCs相關(guān)的臨床試驗(yàn)共計(jì)281 項(xiàng)( 關(guān)鍵詞: antibody-drug conjugate) ［10］。其中，美國(guó)以189 項(xiàng)位居首位，中國(guó)以51 項(xiàng)位居第2，歐盟和澳大利亞分別有15 和7項(xiàng)。同時(shí)，我們統(tǒng)計(jì)了每年新增的ADCs 臨床試驗(yàn)數(shù)量( 見圖2) 。
1995—2023 年，新增的ADCs 臨床試驗(yàn)數(shù)量呈快速增長(zhǎng)趨勢(shì)。在近10 年( 2014—2023年) 中，新增的ADCs 臨床試驗(yàn)數(shù)量的年化增長(zhǎng)率達(dá)到了13． 43%。
如表2 所示，按照適應(yīng)證進(jìn)行排序，研究頻次排名前5 的分別是乳腺癌( 59 次) 、實(shí)體瘤( 51 次) 、淋巴瘤( 42 次) 、卵巢癌( 18 次) 及白血病( 18 次) ，其余主要為其他類型癌癥。此外，ADCs 的臨床研究也在拓寬適應(yīng)證類型，包括輕鏈淀粉樣變性( light chain amyloidosis) 、彌漫性皮膚系統(tǒng)性硬化癥( diffuse cutaneous systemic Sclerosis) 和大動(dòng)脈炎( takayasu arteritis) 等。目前，ADCs 的臨床研究主要集中在早期階段，但已有多項(xiàng)臨床研究進(jìn)入了Ⅲ期( 36項(xiàng)) 或Ⅳ期( 1 項(xiàng)) 臨床研究。
2、 國(guó)內(nèi)外對(duì)ADCs 產(chǎn)品的監(jiān)管情況
不斷攀升的ADCs 產(chǎn)品的臨床試驗(yàn)申請(qǐng)數(shù)量以及ADCs 固有的大分子與小分子結(jié)合的復(fù)雜模式給監(jiān)管帶來了更多挑戰(zhàn)，在ADCs 產(chǎn)品的設(shè)計(jì)過程中，需要對(duì)裸抗、連接子、有效載荷進(jìn)行選擇并合理組合，不斷優(yōu)化偶聯(lián)方式與偶聯(lián)位點(diǎn)，不同的ADCs 產(chǎn)品呈現(xiàn)出巨大的差異，這就導(dǎo)致了其生產(chǎn)工藝及質(zhì)量屬性具有個(gè)性化的特點(diǎn)，也使質(zhì)量控制成為了研發(fā)的重點(diǎn)和難點(diǎn)，因此業(yè)界亟需更為科學(xué)與全面的監(jiān)管體系來規(guī)范ADCs 產(chǎn)品的研發(fā)與生產(chǎn)。
2. 1 我國(guó)對(duì)ADCs 產(chǎn)品的監(jiān)管情況
目前，我國(guó)針對(duì)ADCs 產(chǎn)品發(fā)布了《抗體偶聯(lián)藥物藥學(xué)研究與評(píng)價(jià)技術(shù)指導(dǎo)原則》《抗體偶聯(lián)藥物非臨床研究技術(shù)指導(dǎo)原則》及《抗腫瘤抗體偶聯(lián)藥物臨床研發(fā)技術(shù)指導(dǎo)原則》，提出了ADCs 開發(fā)過程中對(duì)靶抗原、抗體、連接子、有效載荷、原液、制劑的不同考量及關(guān)注要點(diǎn)。其中，藥學(xué)研究方面，有效載荷-連接子部分的質(zhì)量控制可參考化學(xué)藥物相關(guān)指導(dǎo)原則，如《化學(xué)藥物原料藥制備和結(jié)構(gòu)確證研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化學(xué)藥物雜質(zhì)研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化學(xué)藥物殘留溶劑研究技術(shù)指導(dǎo)原則》《化學(xué)藥物質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)建立的規(guī)范化過程技術(shù)指導(dǎo)原則》《手性藥物質(zhì)量控制研究技術(shù)指導(dǎo)原則》以及ICH 等相關(guān)指導(dǎo)原則; 裸抗部分的質(zhì)量控制可參考《中華人民共和國(guó)藥典》及相關(guān)指導(dǎo)原則，如《人用單克隆抗體質(zhì)量控制技術(shù)指導(dǎo)原則》、ICH 等; ADCs 原液及制劑則應(yīng)關(guān)注偶聯(lián)引起的關(guān)鍵質(zhì)量屬性的控制。
2. 2 美國(guó)對(duì)ADCs 產(chǎn)品的監(jiān)管情況
美國(guó)FDA 發(fā)布了ADCs 藥物的臨床藥理行業(yè)指南“Clinical Pharmacology Considerations for Antibody-Drug Conjugates Guidance for Industry”，但尚無藥學(xué)方面的指導(dǎo)原則，目前抗體、原液和制劑可參考生物制劑相關(guān)指南，有效載荷及連接子可參考對(duì)小分子化學(xué)藥的要求。在美國(guó)，ADCs 產(chǎn)品的藥學(xué)審評(píng)涉及生物制品辦公室( Office of Biological Products，OBP) 和新藥質(zhì)量評(píng)價(jià)辦公室( Office of New Drug Quality Assessment，ONDQA) 2 個(gè)部門，其中，OBP 負(fù)責(zé)ADCs 抗體的審評(píng)，ONDQA 負(fù)責(zé)有效載荷及連接子的審評(píng)，最終由OBP 和ONDQA 共同完成原液和制劑的審評(píng)。
3、 ADCs 產(chǎn)品的藥學(xué)研究關(guān)注點(diǎn)
3. 1 裸抗部分
3. 1.1 上游構(gòu)建方面
上游構(gòu)建是保障ADCs 產(chǎn)品質(zhì)量與安全性的首要環(huán)節(jié)。首先，應(yīng)明確目的基因的來源及序列信息，并對(duì)目的基因序列進(jìn)行優(yōu)化以提升蛋白質(zhì)的表達(dá)和功能。目的基因合成和構(gòu)建后，通過測(cè)序方法進(jìn)行驗(yàn)證，確保其與預(yù)期一致。其次，需關(guān)注宿主細(xì)胞的來源、特性，并確保其經(jīng)過適當(dāng)?shù)臒o血清馴化。表達(dá)載體的設(shè)計(jì)和構(gòu)建是實(shí)現(xiàn)目的基因高效表達(dá)的核心，需確保所選用的功能元件能夠促進(jìn)目的基因在宿主細(xì)胞中的高效表達(dá)，并通過測(cè)序等方法驗(yàn)證表達(dá)載體序列與理論序列一致。
此外，應(yīng)關(guān)注細(xì)胞庫(kù)的建立和穩(wěn)定性，如主細(xì)胞庫(kù)( MCB) 、工作細(xì)胞庫(kù)( WCB) 以及生產(chǎn)終末細(xì)胞庫(kù)( EOPC) 的建立過程，包括凍存條件、密度、體積、數(shù)量和批號(hào)等信息，并開展細(xì)胞庫(kù)的穩(wěn)定性研究，評(píng)估其在傳代和貯存過程中的生長(zhǎng)穩(wěn)定性、表達(dá)穩(wěn)定性、遺傳穩(wěn)定性。根據(jù)《中華人民共和國(guó)藥典》2020 年版要求，對(duì)細(xì)胞庫(kù)開展全面的檢定，包括細(xì)胞鑒別、微生物檢測(cè)、內(nèi)外源病毒因子檢測(cè)、逆轉(zhuǎn)錄病毒檢測(cè)等，以確保最終產(chǎn)品的安全性。生產(chǎn)工藝的模擬和優(yōu)化有助于確保產(chǎn)品在商業(yè)化生產(chǎn)中的穩(wěn)定性和一致性，藥學(xué)研究應(yīng)根據(jù)穩(wěn)定性研究結(jié)果( 細(xì)胞生長(zhǎng)、蛋白表達(dá)、遺傳穩(wěn)定性及病毒安全性) 優(yōu)化生產(chǎn)工藝，并合理擬定限傳代次。此外，由于單克隆細(xì)胞株的篩選和評(píng)估是確保生物制品一致性的關(guān)鍵，應(yīng)通過科學(xué)的方法篩選出合適的細(xì)胞株，并評(píng)估其生產(chǎn)能力和產(chǎn)品質(zhì)量，同時(shí)采用多種方法進(jìn)行單克隆性確認(rèn)。
3. 1. 2 生產(chǎn)用原材料方面
ADCs 產(chǎn)品的生產(chǎn)過程涉及不同類型原材料的使用，原材料的來源與用途需被明確記錄和追蹤，以確保其質(zhì)量和供應(yīng)的連續(xù)性。同時(shí)，制定嚴(yán)格的內(nèi)控標(biāo)準(zhǔn)，包括對(duì)原材料的純度、活性、安全性等關(guān)鍵指標(biāo)進(jìn)行質(zhì)控，并提供質(zhì)量分析證書( certificate of analysis，COA) ，以滿足生產(chǎn)的具體要求。安全性檢測(cè)是另一個(gè)不可忽視的方面，特別是對(duì)于動(dòng)物源性物料，必須進(jìn)行牛海綿狀腦病( bovine spongiform encephalopathy，BSE) 和傳染性海綿狀腦病( transmissible spongiform encephalopathy，TSE) 風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，以確保原材料不會(huì)引入任何傳染性疾病的風(fēng)險(xiǎn)。此外，對(duì)生產(chǎn)用原材料開展全面的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，建立和完善原材料分級(jí)管理體系，是確保原材料風(fēng)險(xiǎn)可控的有效手段。
在原材料供應(yīng)鏈中，可能涉及原材料變更，這要求進(jìn)行充分的評(píng)估和驗(yàn)證工作，以確保新舊原材料的質(zhì)量和安全性相當(dāng)，甚至新采用的原材料更優(yōu)。對(duì)于企業(yè)自產(chǎn)的原材料，申請(qǐng)人需提供完整的藥學(xué)研究資料，包括生產(chǎn)工藝和質(zhì)控信息等。
3. 1. 3 裸抗生產(chǎn)工藝方面
裸抗生產(chǎn)工藝流程主要涉及上游細(xì)胞培養(yǎng)工藝的種子復(fù)蘇、逐級(jí)擴(kuò)增、生產(chǎn)培養(yǎng)和收獲澄清等步驟以及下游純化工藝中的親和層析、離子交換層析和除病毒過濾等關(guān)鍵技術(shù)。通過對(duì)關(guān)鍵工藝步驟及其參數(shù)的控制，以確?？贵w中間體的質(zhì)量和純度。未處理收獲液檢測(cè)是評(píng)估產(chǎn)品微生物安全性的重要手段，需要對(duì)病毒、支原體、真菌和細(xì)菌等潛在污染物進(jìn)行全面監(jiān)測(cè)。此外，病毒去除/滅活驗(yàn)證是確保生物制品安全性的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，要求涵蓋不同模式病毒，常見的如小鼠細(xì)小病毒( minute virus of mice，MVM) 、異嗜性小鼠白血病病毒( xenotropic murine leukemia virus，X-MuLV) 等; 并應(yīng)在最差條件下評(píng)估病毒的安全系數(shù)，以驗(yàn)證生產(chǎn)工藝中病毒去除或滅活步驟的有效性。
在工藝穩(wěn)健性和批間一致性方面，通過持續(xù)的工藝優(yōu)化和數(shù)據(jù)分析，可以提高生產(chǎn)過程的穩(wěn)定性，確保產(chǎn)品質(zhì)量的一致性。同時(shí)，工藝變更管理要求對(duì)任何工藝調(diào)整進(jìn)行嚴(yán)格的評(píng)估和驗(yàn)證，以保障變更后工藝的質(zhì)量和安全性。對(duì)于生產(chǎn)規(guī)模放大或生產(chǎn)場(chǎng)地轉(zhuǎn)移等情況，由于其可能會(huì)對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量產(chǎn)生潛在影響，因此需要采取措施確保不同規(guī)模和場(chǎng)地下生產(chǎn)的產(chǎn)品均符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。此外，如果涉及委托生產(chǎn)，應(yīng)加強(qiáng)對(duì)受托生產(chǎn)企業(yè)的審計(jì)和監(jiān)督，建立完善的質(zhì)量管理體系，保障臨床受試者的安全。
3. 1. 4 裸抗質(zhì)量研究方面
對(duì)于裸抗的質(zhì)量控制，涉及從分子結(jié)構(gòu)到生物學(xué)功能等諸多層面。首先，需確認(rèn)裸抗的一級(jí)結(jié)構(gòu)，即氨基酸序列，并通過高級(jí)結(jié)構(gòu)分析確保其正確折疊及功能，對(duì)于游離巰基和二硫鍵錯(cuò)配情況需重點(diǎn)關(guān)注。其次，對(duì)裸抗的翻譯后修飾，如糖基化、磷酸化以及潛在的脫酰胺化或天冬氨酸異構(gòu)化等，進(jìn)行深入分析，以保證其生物活性和穩(wěn)定性與預(yù)期相符。由于裸抗的糖基化發(fā)生在細(xì)胞培養(yǎng)階段，其修飾類型及水平可能受到下游純化影響，除非偶聯(lián)過程直接涉及到糖鏈，否則ADCs 原液和制劑生產(chǎn)過程都不會(huì)影響糖基化。因此，重點(diǎn)控制裸抗的糖基化修飾［11］。生物學(xué)活性評(píng)估包括抗原結(jié)合活性、抗體依賴性細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞毒作用( antibody-dependent cell-mediated cytotoxicity，ADCC)和補(bǔ)體依賴的細(xì)胞毒性( complement dependent cytotoxicity，CDC) 研究，是確保療效的重要環(huán)節(jié)。此外，純度和雜質(zhì)控制是保證裸抗安全性和有效性的關(guān)鍵，對(duì)于分子大小異質(zhì)體和電荷變異體，需關(guān)注其對(duì)于產(chǎn)品安全性和有效性的影響。工藝相關(guān)雜質(zhì)也應(yīng)進(jìn)行限度控制，如蛋白質(zhì)A 殘留、外源性DNA 殘留、宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留、消泡劑、胰島素和篩選劑等，以避免這些雜質(zhì)對(duì)產(chǎn)品安全性和有效性產(chǎn)生負(fù)面影響。裸抗下游純化的清除能力可減少外源性DNA 殘留和宿主細(xì)胞蛋白質(zhì)殘留，而ADCs 原液和制劑的生產(chǎn)均不是這些雜質(zhì)的重要來源，因此在裸抗部分加以重點(diǎn)控制。對(duì)于可能存在的微生物安全問題，需對(duì)裸抗的微生物限度及細(xì)菌內(nèi)毒素含量進(jìn)行控制。在此基礎(chǔ)上，制定和完善裸抗的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，確立純度、雜質(zhì)、生物學(xué)活性等關(guān)鍵質(zhì)量屬性的標(biāo)準(zhǔn)限度，并通過積累多批次數(shù)據(jù)合理擬定各檢項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)限度的范圍。同時(shí)對(duì)分析方法進(jìn)行初步的驗(yàn)證，包括準(zhǔn)確性、精密度和專屬性等關(guān)鍵項(xiàng)目。
3. 1. 5 裸抗穩(wěn)定性研究方面
參照生物制品穩(wěn)定性研究的有關(guān)指導(dǎo)原則，對(duì)裸抗開展長(zhǎng)期、加速穩(wěn)定性研究，以評(píng)估其在整個(gè)有效期內(nèi)的穩(wěn)定性表現(xiàn); 開展不同影響因素( 如高溫、光照、振蕩、凍融、pH 變化、氧化等) 的穩(wěn)定性研究，為確定最佳儲(chǔ)存和運(yùn)輸條件提供數(shù)據(jù)支持。同時(shí)，在檢項(xiàng)中應(yīng)增加微生物限度考察，確保裸抗在儲(chǔ)存過程中的微生物安全性。穩(wěn)定性研究結(jié)果應(yīng)能支持Ⅰ期臨床試驗(yàn)。
3.2 有效載荷-連接子部分
有效載荷指的是藥物到達(dá)腫瘤細(xì)胞、腫瘤微環(huán)境或其他靶細(xì)胞后發(fā)揮作用的小分子，目前最常見的是小分子細(xì)胞毒性藥物; 而連接子指的是使裸抗與有效載荷穩(wěn)定連接的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
生產(chǎn)工藝方面，要重點(diǎn)關(guān)注起始物料的選擇和生產(chǎn)工藝，基于ICH Q11 指南的要求，對(duì)于起始物料和中間體加強(qiáng)質(zhì)量控制，減少潛在雜質(zhì)的引入［12］。
結(jié)構(gòu)確證方面，應(yīng)采用各種分析技術(shù)( 如核磁共振、質(zhì)譜、紅外光譜等) 確證有效載荷和連接子的化學(xué)結(jié)構(gòu)，包括平面結(jié)構(gòu)和立體構(gòu)型。
質(zhì)量研究方面，深入分析生產(chǎn)過程中可能產(chǎn)生的雜質(zhì)，包括有機(jī)雜質(zhì)、無機(jī)雜質(zhì)、元素雜質(zhì)、基因毒性雜質(zhì)、降解雜質(zhì)、殘留溶劑等，參考ICH Q3 指南的要求，并制定合理的雜質(zhì)限度。對(duì)于含有手性中心的化合物，需重點(diǎn)關(guān)注手性雜質(zhì)的研究和控制; 對(duì)于可與抗體偶聯(lián)的各種衍生雜質(zhì)，關(guān)注檢查方法的專屬性，保證擬定方法對(duì)各種潛在雜質(zhì)可有效分離、檢出。對(duì)于實(shí)際檢出量較高的雜質(zhì)進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，必要時(shí)作為特定雜質(zhì)訂入各質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)?？傊?，雜質(zhì)含量應(yīng)控制在藥理毒理研究的安全范圍內(nèi)。確保有效載荷和連接子的質(zhì)量滿足臨床研究標(biāo)準(zhǔn)也至關(guān)重要，包括對(duì)外觀、純度、有關(guān)物質(zhì)( 特定和非特定雜質(zhì)) 、殘留溶劑、水分和含量等方面的嚴(yán)格質(zhì)量控制。同時(shí)，還需建立和完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，并通過方法學(xué)驗(yàn)證以確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。此外，連接子與裸抗中的某些殘基反應(yīng)形成共價(jià)鍵的能力理應(yīng)得到重視。
對(duì)有效載荷和連接子也應(yīng)開展穩(wěn)定性研究，以確保最佳的儲(chǔ)存條件和有效期，穩(wěn)定性研究結(jié)果應(yīng)支持臨床試驗(yàn)期間的研究。在臨床研究過程中，根據(jù)技術(shù)要求和工藝認(rèn)知的深入，要不斷優(yōu)化生產(chǎn)工藝，并進(jìn)行批量放大研究和驗(yàn)證，以滿足臨床試驗(yàn)和后續(xù)商業(yè)化生產(chǎn)的需求。需要注意的是，用于臨床的有效載荷-連接子樣品的生產(chǎn)應(yīng)在符合GMP 條件下制備。
3. 3 ADCs 原液和制劑部分
3. 3. 1 ADCs 原液和制劑生產(chǎn)工藝方面
ADCs 原液和制劑的生產(chǎn)工藝與裸抗的生產(chǎn)工藝相比，有諸多方面的差異。首先，ADCs 原液需對(duì)偶聯(lián)工藝進(jìn)行重點(diǎn)關(guān)注，研究偶聯(lián)反應(yīng)的條件，如抗體濃度、還原劑與抗體的摩爾比、連接子-載荷與抗體的摩爾比、pH 值、還原時(shí)間、偶聯(lián)時(shí)間等，以確保有效載荷-連接子與抗體的有效偶聯(lián)。同時(shí)在中間體和關(guān)鍵質(zhì)量屬性控制環(huán)節(jié)，ADCs 原液需對(duì)DAＲ 值、游離小分子藥物含量等進(jìn)行監(jiān)控，這些是評(píng)估偶聯(lián)效率和產(chǎn)品質(zhì)量的關(guān)鍵指標(biāo)。對(duì)于ADCs 原液和制劑來說，還需要額外關(guān)注工藝相關(guān)雜質(zhì)，如小分子藥物殘留、連接子殘留、溶劑殘留等，并進(jìn)行相應(yīng)的去除和安全性評(píng)估。同時(shí)，ADCs 制劑需要進(jìn)行處方開發(fā)，包括輔料的選擇和使用，確保輔料的質(zhì)量和安全性，考慮輔料與小分子藥物的相容性以及輔料對(duì)ADCs 制劑穩(wěn)定性的影響。在工藝驗(yàn)證研究方面，無菌工藝模擬也應(yīng)被納入開展。
對(duì)于工藝穩(wěn)健性、批間一致性、工藝變更管理、生產(chǎn)規(guī)模及轉(zhuǎn)移和委托生產(chǎn)管理的要求，則與裸抗部分保持嚴(yán)格的一貫要求，確保產(chǎn)品的質(zhì)量一致性和臨床安全性。在ADCs 藥物開發(fā)中，經(jīng)常涉及不同類型的變更，如原材料或中間體供應(yīng)商變動(dòng)、處方工藝調(diào)整、生產(chǎn)規(guī)模擴(kuò)大、生產(chǎn)場(chǎng)地更迭以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)更新等。多數(shù)變更應(yīng)根據(jù)風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基本原則，并參照ICH Q5E 等相關(guān)指南，通過開展可比性研究來確認(rèn)其影響，尤其重視變更前后關(guān)鍵質(zhì)量屬性的差異［12］。對(duì)于臨床試驗(yàn)期間發(fā)生的重大變更，申請(qǐng)人應(yīng)主動(dòng)及時(shí)地與監(jiān)管機(jī)構(gòu)進(jìn)行溝通交流。
3. 3. 2 ADCs 原液和制劑質(zhì)量研究方面
在結(jié)構(gòu)及理化性質(zhì)表征模塊，除了一級(jí)結(jié)構(gòu)、高級(jí)結(jié)構(gòu)、翻譯后修飾、生物學(xué)活性、純度和雜質(zhì)、微生物安全這些裸抗常規(guī)的關(guān)注點(diǎn)外，對(duì)于ADCs 原液還需額外關(guān)注偶聯(lián)位點(diǎn)、DAＲ 值、藥物載藥量分布等。其中藥物載藥量分布環(huán)節(jié)，由于賴氨酸偶聯(lián)、半胱氨酸偶聯(lián)及位點(diǎn)特異性偶聯(lián)等偶聯(lián)技術(shù)所形成的DAＲ 值分布有明顯差異，應(yīng)加以區(qū)分。此外，對(duì)于產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)，應(yīng)開展對(duì)于未偶聯(lián)裸抗、雜質(zhì)偶聯(lián)ADCs、空載連接子、游離小分子、有效載荷-連接子中間體等的檢測(cè); 對(duì)于工藝相關(guān)雜質(zhì)，要額外開展還原劑殘留、偶聯(lián)試劑/酶殘留、有機(jī)溶劑殘留等檢測(cè)。
對(duì)于ADCs 原液和制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及其限度的制定，除了考慮抗體類產(chǎn)品的常規(guī)檢測(cè)項(xiàng)外，還需將DAＲ 值、藥物載藥量分布、未偶聯(lián)抗體含量、游離小分子含量等納入檢測(cè)項(xiàng)。臨床試驗(yàn)期間要持續(xù)完善質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，同時(shí)積累多批次數(shù)據(jù)合理擬定各檢項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)限度范圍。
關(guān)于ADCs 對(duì)照品，需關(guān)注ADCs 對(duì)照品的詳細(xì)來源、標(biāo)定研究、驗(yàn)收標(biāo)準(zhǔn)、檢測(cè)報(bào)告、穩(wěn)定性研究結(jié)果，如使用多批次對(duì)照品，要關(guān)注其可溯源性。
3. 3. 3 ADCs 原液和制劑穩(wěn)定性研究方面
參照生物制品穩(wěn)定性研究的有關(guān)指導(dǎo)原則，對(duì)ADCs 原液和制劑開展長(zhǎng)期、加速穩(wěn)定性研究，并根據(jù)情況有選擇性地開展影響因素研究，以評(píng)估其在整個(gè)有效期內(nèi)的穩(wěn)定性表現(xiàn)。在穩(wěn)定性考察項(xiàng)目中，ADCs 原液除了裸抗穩(wěn)定性研究包含的考察項(xiàng)目，還應(yīng)特別關(guān)注偶聯(lián)所產(chǎn)生的穩(wěn)定性問題，如DAＲ 值的變化、新的產(chǎn)品相關(guān)雜質(zhì)等。由于偶聯(lián)過程中引入了化學(xué)結(jié)構(gòu)，ADCs 原液通常對(duì)光照和溫度更為敏感，應(yīng)加以重視; 同時(shí)，ADCs 原液和制劑的降解途徑可能與裸抗不同，需特別關(guān)注由于偶聯(lián)產(chǎn)生的新降解產(chǎn)物和降解途徑。
對(duì)于ADCs 制劑需開展使用穩(wěn)定性研究，模擬臨床使用條件，評(píng)估ADCs 制劑在稀釋、配伍、輸注等過程中的穩(wěn)定性，確保產(chǎn)品在臨床使用過程中保持其療效和安全性。臨床研究用樣品的保存、運(yùn)輸和使用均應(yīng)有穩(wěn)定性研究數(shù)據(jù)的支持。
3. 3. 4 內(nèi)包材方面
裸抗、ADCs 原液和制劑所使用的包裝材料，需確保來源明確并符合質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，包括對(duì)供應(yīng)商的嚴(yán)格評(píng)估和對(duì)包材類型、材質(zhì)、規(guī)格的信息收集。其次，開展初步的包材相容性研究，評(píng)估其化學(xué)惰性、物理穩(wěn)定性和生物相容性，以確保包材不會(huì)影響產(chǎn)品的穩(wěn)定性，同時(shí)防止產(chǎn)品成分從包材中遷移。
3. 4 藥學(xué)研究變更方面
在ADCs 的開發(fā)過程中，常涉及生產(chǎn)用原材料的變更、處方工藝的調(diào)整、生產(chǎn)規(guī)模的擴(kuò)大、生產(chǎn)場(chǎng)地的轉(zhuǎn)移以及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的更新等。面對(duì)這些變更，開展可比性研究是至關(guān)重要的?？杀刃匝芯繎?yīng)以風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估為基礎(chǔ)，并遵循ICH Q5E 等相關(guān)指南的要求，重點(diǎn)監(jiān)測(cè)變更前后關(guān)鍵質(zhì)量屬性的波動(dòng)。由于ADCs 自身的復(fù)雜性，制定和實(shí)施變更應(yīng)更加審慎。如上游生產(chǎn)工藝的變更所造成的裸抗、有效載荷的質(zhì)量屬性差異，這些差異是否會(huì)對(duì)后續(xù)的偶聯(lián)工藝或ADCs 的關(guān)鍵質(zhì)量屬性造成不利影響。此外，在臨床研究開展過程中，任何重大變更應(yīng)及時(shí)與監(jiān)管機(jī)構(gòu)進(jìn)行溝通和交流，確保變更的透明性和科學(xué)性，從而保障ADCs 的安全性和有效性。
4、 結(jié)語
隨著ADCs 在腫瘤治療領(lǐng)域的快速發(fā)展，其獨(dú)特的作用機(jī)制和廣闊的應(yīng)用前景受到了廣泛關(guān)注［13］。本文綜述了ADCs 的研發(fā)歷程、國(guó)內(nèi)外上市情況、臨床申報(bào)現(xiàn)狀以及監(jiān)管法規(guī)，并重點(diǎn)探討了IND 階段藥學(xué)研究的關(guān)注點(diǎn)。在IND 階段，藥學(xué)研究的核心在于確保ADCs 產(chǎn)品的安全性。從裸抗的選擇和生產(chǎn)、連接子和有效載荷的設(shè)計(jì)到ADCs 的生產(chǎn)過程和質(zhì)量控制，每一步都需嚴(yán)格把關(guān)。我們期待通過不斷的技術(shù)創(chuàng)新和深入研究使ADCs 產(chǎn)品能夠?yàn)榛颊邘砀嗟闹委熯x擇。同時(shí)，監(jiān)管機(jī)構(gòu)和科研人員應(yīng)通力合作，確保這類創(chuàng)新藥物的安全性和有效性，讓更多患者受益于這一革命性的治療手段。
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內(nèi)容來源：中國(guó)新藥雜志 2025 年 第 34 卷 第 1 期
來源：Internet
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