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色譜新手：我在做一個模擬胃內(nèi)容物中藥物反應試驗，需要動態(tài)測定某藥品含量變化。分析時碰到一個棘手問題，進樣量同樣用20ul，用對照品進樣時色譜峰形不錯，進樣品時卻一直不能得到好的峰形。后來分析是模擬胃內(nèi)容物樣品的酸度過高的因素，可我通過稀釋的方法讓樣品酸度和流動相接近，雖然峰形沒問題了，卻發(fā)現(xiàn)因稀釋導致分析物在樣品中含量下降，低于最低檢測限了，如何是好呢？

老手解答：稀釋很方便，但靈敏度更高的檢測器不容易找，不過還是有個簡單的解決方案。當用流動相稀釋樣品時，只要稀釋后樣品中有機相含量比流動相中的有機相比例低10個百分點以上（如流動相中甲醇含量是40%，則樣品中甲醇含量一定要低于30%），樣品流動會被色譜柱進口端延緩或阻擋，稱為“柱上富集”。由于“柱上富集”作用的存在，這種情況下進行大體積樣品進樣，可避免樣品溶劑組成和流動相一樣時進樣量過大產(chǎn)生的“峰展寬”。針對你提的這個實例，可用稀的NaOH溶液調(diào)節(jié)樣品pH和流動相匹配，并將樣品最終稀釋一倍。將進樣量提高一倍到40ul，就可達到最低檢測限的要求。